Файл: Методичка по мікробіології.doc

ВУЗ: Не указан

Категория: Не указан

Дисциплина: Не указана

Добавлен: 02.12.2019

Просмотров: 2397

Скачиваний: 2

ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.

У грамнегативних бактерій мається одношарова муреїнова мережа (5–20 % від маси клітинної стінки), зв'язана за допомогою ліпопротеїну із зовнішньою мембраною з фосфоліпідів, білків і ліпополісахаридів. Між клітинною стінкою і цитоплазматичною мембраною знаходиться периплазма, що містить ферменти.

Цитоплазматична мембрана складається з подвійного шару ліпідів, а також інтегральних білків. Цитоплазма є середовищем, що зв'язує усі внутрішньоклітинні структури в єдину систему. Внутрішню порожнину клітини заповнює цитозоль – напіврідка колоїдна маса, що складається на 70–80 % із води, розчинених білків, РНК, ферментів, продуктів і субстратів метаболічних реакцій. У цитоплазмі прокаріот немає компартментації – відсутні внутрішньоклітинні мембранні системи у вигляді оформлених органел. Немає хлоропластів, мітохондрій, апарата Гольджі, ендоплазматичної мережі і центріолей, що маються в еукаріотах. У цитозолі розташовано структури клітини (численні рибосоми, відповідальні за синтез білків, нуклеоїд), прості і складні цитоплазматичні мембранні утворення (мезосоми, хроматофори, тилакоїди, хлоросоми, фікобілісоми, аеросоми, магнітосоми, карбоксисоми) і включення, що є запасними речовинами (глікоген, сірка і т.д.). Рибосоми розташовуються у цитоплазмі вільно, вони дрібніше, ніж в еукаріотах (коефіцієнт седиментації у прокаріот – 70S), і відрізняються з кількості білків. Цитоплазматична мембрана утворює складчасті інвагінації усередину цитоплазми, які називаються мезосомами і виконують функції мітохондрій, тобто енергетичних центрів клітини. За допомогою ферментів у них відбувається окислювання жирних кислот, окисне фосфорилювання, тобто процеси дихання. У фототрофних прокаріот фотосинтетичний апарат утворений хроматофорами, тилакоїдами у вигляді системи трубочок, везикул, здвоєних мембранних пластин із функціонуючими структурами (хлоросоми, фікобілісоми), що знаходяться безпосередньо в цитоплазмі. В ній зосереджено фотосинтезуючі пігменти: бактеріохлорофіли і каротиноїди, фікобіліни, фікоеритрини, за своїм складом відмінні від пігментів рослин. Нуклеоїд – еквівалент ядра у бактерій. Він являє собою компактно скручену (суперспіралізовану) замкнуту в кільце бактеріальну хромосому з двохнитчастої молекули ДНК. На відміну від ядра еукаріот нуклеоїд бактерій не має ядерної оболонки, ядерця й гістонів. Крім нуклеоїда в бактеріальній клітині можуть знаходитися позахромосомні фактори спадковості – плазміди, що представляють ковалентно замкнуті кільця ДНК. Вони здатні до реплікації незалежно від бактеріальної хромосоми.

Джгутики – органи пересування бактерій, що складаються з тонких спірально вигнутих ниток білка флагеліна, і перевищують за довжиною розмірів клітини. Джгутик з'єднується із клітиною складно збудованим шарніроподібним базальним тільцем, що виконує функцію мотора. За допомогою конструкції таких хемомеханічних перетворювачів здійснюються обертальні рухи.


Ворсинки, чи пілі (фімбрії), – нитковидні утворення, що складаються з білка піліна, більш тонкі й короткі, чим джгутики, відповідальні за прикріплення бактерій до субстратів. F-пілі – фактор фертильності, беруть участь у кон'югації бактерій (із розмноженням бактерій не мають нічого загального).

Запасні речовини утворюються в клітині в результаті метаболізму, і їхнє утворення залежить від умов культивування мікроорганізмів. У цитоплазмі зустрічаються різні включення у вигляді гранул глікогену, полісахаридів, жирних кислот і поліфосфатів (волютин). Вони накопичуються за умов надлишку живильного субстрату в навколишнім середовищі і виконують роль енергетичного резерву. Карбоксисоми, чи поліедральні тіла, виявлені в клітинах ціанобактерій і хемолітоавтотрофів. Вони являють собою багатогранні включення з білковою мембраною, що містять ключовий фермент фіксації вуглекислого газу в циклі Кальвіна. Газові вакуолі (чи аеросоми) є регуляторами плавучості і характерні для водяних бактерій, особливо пурпурних і зелених сіркобактерій.

Магнітосоми виявлено в клітинах бактерій, що володіють магнітотаксисом (пливуть уздовж ліній магнітного полю). Це частки Fe3O4, оточені мембраною.

Спори – своєрідна форма спочиваючих грампозитивних бактерій, що утворюються у несприятливих умовах зовнішнього середовища. Спори бактерій у порівнянні з вегетативними клітинами мають високу стійкість до несприятливих умов зовнішнього середовища. Вони являють собою округлі, овальні чи еліпсоїдальні утворення. Якщо діаметр спори не перевищує діаметра клітини, така клітина називається бацилярною, якщо перевищує, то в залежності від розташування спори: у центрі чи на кінці клітини – клостридіальною чи плектридіальною. У бацилярній клітині спора може розміщатися центрально, термінально або субтермінально.


Додаток 2 (до ЛР № 6)

Способи стерилізації живильних середовищ, посуду й інших

лабораторних матеріалів

Матеріал, що стерилізують

Метод

стерилізації

Режим

стерилізації

Примітка

Живильні середовища з ґрунтовою витяжкою; картопляні середовища

Автоклавування

1,52 атм,

30 хвилин

У колбах, пробірках і т.д., закритих ватними пробками

Рідкі й агаризовані середовища, що не містять цукрів й інших речовин, які розкладаються при температурі 120С

Автоклавування

1 атм, 20 хвилин

Те ж

Рідкі й агаризовані середовища з цукрами й іншими речовинами, що не витримують нагрівання при температурі 120С

Автоклавування

0,5 атм,

1530 хвилин

Те ж

Середовища чи компоненти середовищ, що не витримують нагрівання вище температури 100С

Роздрібнена стерилізація

Текуча пара

3 рази по

3040 хвилин через добу

Те ж

Середовища чи компоненти середовищ, що не витримують нагрівання, наприклад, білки, деякі вітаміни й ін.

Фільтрування через бактеріальні фільтри

Чашки Петрі, піпетки, шпателі

Гарячим повітрям у сушильній шафі

165170С,

2 години

Загорнені в папір (отвори піпеток закриті ватними тампонами)

Колби, пробірки, хімічні склянки, флакони, скляні центрифужні пробірки

Гарячим повітрям у сушильній шафі

165170С,

2 години

Закриті ватними пробками

Утримувачі бактеріальних фільтрів, гумові пробки і шланги, фільтри Зейтця

Автоклавування

1 атм, 20 хвилин

Загорнені в папір

Мембранні фільтри

Автоклавування

5 атм, 15 хвилин

У судині з дистильованою водою

Центрифужні пробірки, виготовлені з термолабільних пластмас

УФ-променями

Термін експозиції встановлюють експериментально

Пробірки після опромінення зберігають у стерильному посуді

Металеві інструменти

У полум'ї

710 с

Безпосередньо перед роботою


72