Файл: Навч.посібник Акушерство, гінекологія та штучне осіменіння с.г. тварин, Харута, 2013.pdf

96

Для  розрідження  і  заморожування  сперми  бугая  у  формі 

відкритих  гранул  застосовують  лактозо‐жовткове  середовище  з 
гліцерином.  Розріджують  сперму  після  її  оцінки  так,  щоб  в 
одній  гранулі  (0,2  мл)  після  розморожування  містилось  не 
менше 15 млн сперміїв з ППР. Розріджену сперму (температура 
+31±1  °С)  охолоджують  поступово  (20–30  хв)  до  кімнатної 
температури (+18 +20), потім до +2 +4 °С впродовж 4–7 годин для 
адаптації,  стабілізації  і  еквілібрації  (врівноваження  осмотично 
активних  речовин  і  гліцерину  між  сперміями  і  розріджувачем). 
Заморожування  сперми  проводять  на  охолодженій  у  парах 
рідкого  азоту  (температура  до  –160–170  °С)  фторопластовій 
пластині  з  лунками.  Фасують  за  допомогою  шприца,  піпетки 
або  спеціальної  розливальної  машини.  Після  витримування 
пластини  з  розфасованою  спермою  в  парах  азоту  протягом  
1–2  хвилин  її  занурюють  у  рідкий  азот  на  2  хвилини,  а  потім 
піднімають до верхнього рівня посудини й охолодженою лопат‐
кою  збирають  гранули  в  пластмасові  охолоджені  стаканчики 
(контейнери), які, у свою чергу, поміщають у марлеві торбинки, 
фіксують  і  занурюють  у  рідкий  азот  для  тривалого  зберігання. 
До  вільного  зовнішнього  кінця  нитки  прикріплюють  етикетку  з 
даними  про  бугая‐плідника  (кличка,  інвентарний  номер, 
порода, дата одержання еякуляту та кількість доз). 

Для  розбавлення  і  заморожування  сперми  в  облицьованих 

гранулах  використовують  лактозо‐жовтково‐цитратно‐гліцери‐
нове середовище. Розрідження проводять у спермоприймачі або 
спеціальному  пакеті.  Кожну  частину  середовища  заливають  в 
окремі  пристрої  з  поліетиленової  плівки,  які  сполучені  між 
собою еластичними трубками з патрубками циліндра‐дозатора. 
Пристрій  із  середовищем  №  1  поміщають  у  термостат  при 
температурі  35  °С,  другий  пристрій  із  середовищем  №  2  –  при  
18–22  °С.  Отриману  сперму  розбавляють  середовищем  №  1  у 
співвідношенні  1:1  і  витримують  при  кімнатній  температурі 
протягом  5–10  хвилин.  Потім  розбавляють  її  середовищем  №  2 
до  потрібної  кількості  сперміїв  у  дозі.  Сперму  розфасовують  у 

97

полімерну  трубку  діаметром  3,8–4  мм  з  товщиною  стінок  
120  мкм,  вкладають  її  в  автомат  ПРЖ  і  сполучають  із  муфтою 
спермоприймача.  Весь  розбавлений  еякулят  вдавлюється  в 
трубку, після чого її підводять до зварювального вузла автомата, 
який розділяє трубку на частини із спермодозами об’ємом 0,25 – 
0,33 мл з одночасною герметизацією їх країв і маркуванням доз. 
Спермодози  з  бункера  автомата  переносять  в  алюмінієві  туби 
діаметром  40  мм,  закривають  паралоновими  пробками  і 
загвинчують  в  обойму  пристрою  для  еквілібрації  і  заморожу‐
вання  сперми.  Цей  пристрій  поміщають  у  холодильник  і 
витримують  при  температурі  +2  +4  °С  протягом  4–6  год  за 
постійного  обертання  обойми.  Охолоджені  туби  знімають  з 
апарата,  кріплять  до  них  стержні‐тримачі  і  переносять  у 
широкогорлу посудину (“Харків‐3”), заповнену рідким азотом.  

Для  заморожування  сперми  в  соломинках  (паєтах)  за 

французькою 

технологією 

використовують 

середовище 

“Лецифос” (477 і 488) та “Кріоцифос” (479 і 480). 

Сухі  заготовки  середовища  “Лецифос”  розчиняють  у 

бідистильованій воді, добавляють жовток, після чого розділяють 
на дві частини, у кожну з яких (№ 1 і № 2) добавляють гліцерин – 
відповідно  3  %  і  11  %.  Спочатку  сперму  розбавляють 
середовищем  №  1  при  температурі  32  °С  й  охолоджують 
протягом  45–50  хв  до  4  °С  у  холодильнику  або  за  допомогою 
льоду,  який  розстає.  Охолоджену  сперму  розбавляють 
середовищем  №  2  при  температурі  4  °С  у  співвідношенні  1:1. 
При  цьому  середовище  додають  двома  рівними  порціями  з 
інтервалом  15  хв,  після  чого  охолодження  проводять  ще 
протягом 3 – 3,5 годин. 

Розфасовують  сперму  в  попередньо  стерилізовані  і 

марковані  соломинки  об’ємом  0,5  або  0,25  мл.  Після  їх 
заповнення  спермою  вільний  кінець  запаюють  ультразвуком  і 
розміщують горизонтально на спеціальну охолоджену підставку, 
яку  переносять  у  посудину  Дюара  на  металеву  сітку. 
Температуру  встановлюють  –120  °С  або  –140  °С,  відповідно  для 

98

пайєт  0,25  і  0,5  мл;  витримують  їх  протягом  10–12  хвилин,  а 
потім переносять у рідкий азот для зберігання. 

Середовище  “Кріоцифос”  простіше  за  складом,  аніж 

“Лецифос”, не містить молока, що істотно полегшує проведення 
оцінки  сперми.  У  її  варіант‐479  додають  антибактеріальні 
препарати:  пеніцилін,  стрептоміцин,  лінкоміцин  і  спектино‐
міцин,  а  у  варіанті‐480  –  тилозин,  гентаміцин,  лінкоміцин, 
спектиноміцин.  

Для  розбавлення  і  заморожування  сперми  за  байсогаль‐

ською  технологією  використовують  середовища  ЛЦГЖС  або 
ЛФРМГЖ. Свіжоотриману сперму розбавляють у співвідношенні 
1:1  за  температури  27±1  °С  і  залишають  при  температурі  
18–20 °С на 15 хв. При цьому, як правило, використовують 20 % 
розрахованого  об’єму  середовища,  а  залишки  додають  після 
температурної  витримки.  Розбавлену  сперму  розфасовують  у 
промарковані 

на 

машині 

М6‐МНС 

і 

простерилізовані 

соломинки, які закупорюють з обох боків скляними кульками за 
допомогою автоматичного пристрою М6‐МУ

2

‐С й охолоджують 

протягом 3–4 год при +4 +5 °С. Заморожування проводять у два 
етапи: витримуванням при температурі –150–180 °С протягом 7 
хвилин  та  наступним  зануренням  у  рідкий  азот.  Зберігають 
пайєти у спеціальних стаканах. 

Компанії  IMV  та  MiniTube  пропонують  широкий  вибір 

обладнання  для  атоматичного,  напівавтоматичного  фасування, 
маркування, охолодження та заморожування сперми. 

Для  заморожування  і  зберігання  сперму  жеребця  розбав‐

ляють середовищами ЛХЦЖ із додаванням гліцерину, Eqcellsire, 
Eq’cellfreeze qsp. 

Розріджують  еякулят  одномоментно  у  співвідношенні  1:3. 

Заморожують  сперму  жеребця  у  формі  відкритих  гранул  або 
пайєт об’ємом 0,25 – 0,5 мл.  

Технологічний  процес  заморожування  сперми  жеребців 

не відрізняється від такого у бугаїв. 

99

Заморожування  сперми  барана  практикують  рідше,  аніж 

бугая.  Це  пов’язано  з  низькою  заплідненістю  маток  внаслідок 
осіменіння  кріоконсервованою  спермою  та  особливостями 
технології осіменіння у вівчарстві і строками її застосування. 

Таблиця 10 

Методи зберігання сперми плідників 

Метод зберігання 

Вид 

плідників 

Умови 

зберігання 

Термін 

зберігання

Короткотривале збері‐
гання за температури +2 
+4 °С 

Бугай, баран, 

жеребець 

Лід, що 

розтає 

2–3 доби 

Короткотривале збері‐
гання за температури +5 
+20 °С 

Кнур 

Клімат‐бокс

3–10 діб 

Глибоке заморожування 
(кріоконсервація) 

Бугай, баран, 

жеребець, 

кнур 

Рідкий азот

місяці,  

роки 

Для  розрідження  і  заморожування  доцільно  використо‐

вувати синтетичні середовища ВІКА (з антиоксидантом), ГЖЦК‐
трисбуферну  (з  декстрином)  та  ЛЖГТЦГ  (з  полісахаридом 
гуміарабіком). 

Методи  заморожування  сперми  кнурів  і  тривалого  її 

зберігання  розроблені,  але  практичного  застосування  в  країнах 
СНД не мають; у 2008–2009 рр. на декількох племпідприємствах 
України установлено сучасне обладнання і розпочалась робота з 
апробації і впровадження кріоконсервації сперми кнурів. 

На  пунктах  штучного  осіменіння  сперму  плідників 

зберігають  у  посудинах  Дьюара  СДС‐50,  СДС‐20,  “Харків‐34  А” 
та ін. У них же і транспортують сперму. 

100

2.17. ТРАНСПОРТУВАННЯ СПЕРМИ 

 
Для  транспортування  сперми,  яка  не  підлягає  заморожу‐

ванню, використовують харчові або спеціальні термоси.  

Під  час  транспортування  сперми  слід  дотримуватися 

таких вимог:  

• необхідно  попереджати  струси  термосів  та  слідкувати, 

щоб  мішечки  зі  спермою  були  розміщені  між  шматочками 
льоду; 

• запобігати  пошкодженню  термосів  та  посудин  зі 

спермою; підтримувати необхідну температуру у термосах; 

• забезпечити  швидкість  доставки  сперми  до  місця 

призначенця.  

У  зимову  пору  року  за  низької  температури  навколиш‐

нього  середовища  термоси  поміщають  у  ватні  або  тканинні 
чохли для попередження замерзання сперми. 

Сперму, яка зберігається за температури +18 +20 °С, тран‐

спортують у спеціальних термосах (переносних клімат‐боксах). 

2.18. ВИЗНАЧЕННЯ СТАТЕВОЇ ОХОТИ І  

ОПТИМАЛЬНОГО ЧАСУ ОСІМЕНІННЯ САМОК 

 
Оптимальним  часом  для  введення  сперми  самкам 

сільськогосподарських  тварин  є  феномен  стадії  збудження  – 
статева  охота.  Під  час  статевої  охоти  самки  проявляють 
позитивну  реакцію  на  самців  –  допускають  плигання  на  себе  і 
статевий акт.  

Під  час  організації  штучного  осіменіння  вибір  статевої 

охоти  або  оптимального  часу  для  введення  сперми  має 
надзвичайно  велике  значення  для  забезпечення  заплідненості. 
Несвоєчасне (раннє або пізнє до часу овуляції) введення сперми, 
осіменіння  самок  поза  статевою  охотою  та  вже  вагітних  є 
поширеними  помилками  під  час  використання  недосконалих