Файл: Хозяйства российской федерации федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования.docx

Денитрификация

Методическиеуказания:для получения культуры денитрифици- рующих бактерий готовят непитательную среду следующего состава:

Вода водопроводная… 100 мл

Сахароза… 2,0 г

Натрий азотнокислый 0,2 г

Калий кислый фосфорнокислый 0,2 г

Среду разлить по колбам и стерилизовать. Для заражения де- нитрифицирующими бактериями в среду внести 0,5 г почвы с необра- батываемого сильно увлажнённого участка. Колбу закрыть резиновой пробкой и поместить в термостат с температурой 35°С на 2-3 недели.

По окончании инкубации визуально оценить накопление газо- образных продуктов под каучуковой пробкой. Провести качественные реакции нитраты, нитриты и аммиак в среде для денитрификаторов. Результаты внести в таблицу 3.


Таблица 3

Исходный продукт	Реактивы для качественной реакции	Окрашивание	Результат реакции (+, -)
Нитраты
Нитриты
Аммиак

Приготовить и промикроскопировать фиксированный препарат денитрифицирующих бактерий.
г) Азотфиксация свободноживущими бактериями

Методические указания: минеральную среду Эшби, не содержа- щую солей азота разлить по колбам ёмкостью 100-150 мл слоем 1-1,5 см и простерилизовать. Внести в среду небольшое количество (0,5г) почвы. Колбу закрыть ватным тампоном и поместить в термостат с температурой 22-25°С на 10-14 дней.

Из плёнки, образовавшейся на поверхности среды приготовить и промикроскопировать препарат аэробных азотофиксирующих бакте- рий.

Из придонного слоя питательной среды приготовить и промик-

---

роскопировать препарат аэробных азотфиксирующих бактерий в раз- давленной капле. Окраску произвести раствором Люголя.

д) Азотфиксация клубеньковыми (симбиотическими) бактериями

Методические указания: для ознакомления с формой клубень- ков рассмотреть корни различных бобовых растений, зарисовать фор- му клубеньков и их расположение на корнях.

Для изучения бактерий, содержащихся в клубеньках, готовят гисторезы или мазки.

При изготовлении гистопрепарата срез клубенька помещают в каплю воды на предметное стекло, покрывают покровным стеклом и исследуют под микроскопом при малом и большом увеличении. Для лучшей видимости бактерий препарат можно подкрашивать фуксином или метиленовым синим.

Для приготовления мазка разрезать клубенёк на две части. Для раз- рушения клеток клубенька место разреза многократно проткнуть пре-

паровальной иглой. Из разрушенного клубенька отжать каплю жидко- сти на предметное стекло, разбавить каплей стерильной воды. Приго- товить и промикроскопировать фиксированный препарат.

Длядополнительныхзаписей

---

Опишите процессы превращения азота и их возбудителей

Процессы	Возбудители		Химизм процесса		Условия, благоприятст- вующие процессу	Значение
	название и ха- рактеристика	рисунок	исходные соединения	конечные со- единения
Минерализация азота
Нитрификация 1 этап 2 этап
Денитрификация
Азотфиксация а)свободноживущие аэробные анаэробные б)симбиотические

Вопросы для самостоятельной подготовки
Микроорганизмы, участвующие в минерализации органических азот- содержащих веществ
аэробные




анаэробные




Сущность процесса минерализации азота


Значение минерализации азота в почве, при хранении навоза, продук- тов сельского хозяйства



Что понимают под нитрификацией?



Возбудители этого процесса и их характеристика


Тип питания и дыхания возбудителей

---

нитрификации




Что понимается под денитрификацией?




Возбудители этого процесса и их характеристика


Значение денитрификации для земледелия. Методы регулирования этого процесса_



Сущность процесса азотфиксации



Характерные особенности возбудителей свободноживущих фиксации азота атмосферы


Характерные особенности симбиотических фиксаторов азота

---

Тема 11. Превращение микроорганизмами соединений фосфора, серы, железа и других элементов

Содержание задания: Биологические циклы превращения фосфора, серы, железа и других элементов. Характеристика основных предста- вителей микроорганизмов участвующих в превращениях этих элемен- тов.

Порядоквыполнениязадания

1. 
   Изучить микробиологические превращения соединений фосфора, серы, железа и других элементов.
   
2. 
   Выявить, промикроскопировать и изучить микроорганизмы расще- пляющие фосфорорганические соединения (Bacillus megaterium var. рhosphaticum), серобактерии и железобактерии.
   
3. 
   Ответить на вопросы для самостоятельной подготовки.
   

Лабораторно-практическоезанятие

1. 
   Используя среду Р.А. Менкина пронаблюдать процесс мобилиза- ции фосфора из органических фосфатов. Промикроскопировать и зарисовать Bacillus megaterium var. phosphaticum).
   
2. 
   Получить, промикроскопировать и зарисовать культуру серобакте- рий.
   
3. 
   Получить, промикроскопировать и зарисовать культуру железобак- терий.
   

Опишите микробиологические превращения соединений серы, фосфора, железа

Процессы	Возбудители			Химизм процесса		Условия, благоприят- ствующие процессу	Значение
	название и характеристика	рисунок	исходные соединения		конечные со- единения
1	2	3	4		5	6	7
Минерализация органических соединений серы
Сульфофикация
Десульфофиксация
1	2	3	4		5	6	7

---