ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 08.09.2021
Просмотров: 7171
Скачиваний: 267
|
Антибиотик Диаметр зоны задержки роста (мм) чувстви- промежу— устой -тельные точные чивые (S) (I) (R) Новые бета-лактамы Имипенем* <13 14—15 >16 Меропенем* <13 14—15 >16 Хинолоны Ципрофлоксацин <15 16—20 >21 Офлоксацин <12 13—16 >17 Налидиксовая кислота* <12 13—17 >18 Аминогликозиды Стрептомицин <16 17—19 >20 Канамицин <14 15—18 >19 Гентамицин <15 — >16 Сизомицин <15 — £16 Тобрамицин <14 — >15 Амикацин <14 15—16 >17 Нетилмицин <12 13—14 >15 Тетрациклины, макролиды, линкозамиды Тетрациклин <16 17—20 >22 Доксициклин <15 16—19 >20 Эритромицин <17 18—21 >22 Азитромицин <13 14—17 >18 Рокситромицин* <14 15—18 >19 Кларитромицин* <13 14—17 >18 Линкомицин <19 20—23 >24 Клиндамицин <14 15—20 >21 Олеандомицин <16 17—20 >21 Антибиотики других групп Хлорамфеникол <15 16—18 >19 Фузидиевая кислота <16 17—20 >21 Рифампицин <12 13—15 >16 Полимиксин <11 12—14 >15 Ванкомицин: • для стафилококков <11 — >12 • для энтерококков <14 15—16 >17 Ристомицин <9 10—11 >12 Фурадонин <15 16—18 >19 Фурагин <15 16—18 >19 |
|
Номер Разведение антибиотика Концентрация Рост бактерий пробирки антибиотика, (помутнение мкг/мл среды) 1 1:100 100 -2 1:200 50 -3 1:400 25 -4 1:800 12,5 -5 1:1600 6,25 + 6 1:3200 3,12 + 7 Среда без антибиоти- — + ка (контроль) |
Е-теста нанесена шкала значений МПК. При помещении полоски на поверхность агара регулируемый процесс диффузии обеспечивает создание в питательной среде вокруг полоски стабильного градиента концентрации препарата, соответствующего шкале. Процедура определения чувствительности с помощью Е-теста осуществляется аналогично тестированию методом дисков. После инкубации посева вокруг полоски образуется зона задержки роста, имеющая форму эллипса. Значение МПК соответствует месту пересечения эллипсовидной зоны с полоской Е-теста. Для интерпретации результатов (оценки клинической чувствительности) используют стандартные критерии (табл. 7.2.3).
Глава 8
ЭКОЛОГИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ
Введение. Экология микроорганизмов является разделом общей микробиологии и изучает взаимоотношения микро- и макроорганизмов, совместно обитающих в определенных биотопах. В естественных средах обитания (почве, воде, воздухе, живых организмах) микробы входят в состав различных биоценозов. Экология микробов, вызывающих заболевания человека, определяется их способностью выживать во внешней среде, менять хозяев, сохраняться в организме хозяина на фоне действия иммунной системы, а также связана со способами их распространения, передачи и рядом других факторов. Оценка ряда экологических условий является одной из главных задач санитарной микробиологии.
Санитарно-бактериологические исследования лежат в основе практической работы санитарных врачей и эпидемиологов при санитарно-гигиенической оценке объектов окружающей среды, пищевых продуктов, напитков и т.д. и играют ведущую роль в профилактике инфекционных болезней. Важным объектом изучения медицинской микробиологии является нормальная микрофлора организма человека, которая включает микробы, обитающие на кожных покровах, слизистых оболочках различных органов (полости рта, зева, носоглотки, верхних участков дыхательных путей, кишечника, особенно толстой кишки, и т.д.). Одни из них являются постоянными (облигат-ными) обитателями организма человека, другие — временными (факультативными или транзиторными). Нормальная микрофлора — это жизненно важная система организма, которая обеспечивает защиту от многих патогенных микробов, созревание и стимуляцию иммунной системы, продукцию ряда витаминов и ферментов, участвующих в пищеварении, и др.
Качественный и количественный состав микрофлоры человека меняется в течение жизни и зависит от пола, возраста, характера питания и др. Кроме того, колебания в составе микрофлоры человека могут быть обусловлены возникновением заболеваний и применением лекарственных препаратов, прежде всего антибиотиков и иммуномодуляторов. Оценка качественного и количественного состава микрофлоры организма человека по определенным показателям позволяет выявить его нарушение (дисбактериоз) и связанные с ним последствия.
Тема 8.1. МИКРОФЛОРА ВОДЫ, ВОЗДУХА И ПОЧВЫ. МЕТОДЫ САНИТАРНО-БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ВОДЫ, ВОЗДУХА И ПОЧВЫ
План
Программа
Микрофлора воды, воздуха и почвы.
Санитарно-показательные микроорганизмы и их значение.
Методы определения коли-индекса, коли-титра и микробного числа воды.
Методы определения микробного числа воздуха.
Методы определения перфрингенс-титра, коли-титра и микробного числа почвы.
Демонстрация
Санитарно-бактериологическое исследование воды методом мембранных фильтров.
Санитарно-бактериологическое исследование воздуха.
Аппарат Кротова. Рост микроорганизмов на МПА в чашке Петри. Рост гемолитических стрептококков на кровяном агаре.
Санитарно-бактериологическое исследование почвы.
Рост Proteus vulgaris (по Шукевичу).
Задание студентам
Провести оценку санитарно-бактериологического со стояния воды по результатам определения микробного числа, коли-индекса и коли-титра.
Провести оценку санитарно-бактериологического со стояния воздуха по результатам определения микробного числа.
Провести оценку санитарно-бактериологического состояния почвы по результатам определения микробного числа, коли-титра, перфрингенс-титра и титра термофильных бактерий.
|
Объект Характер загрязнения Санитарно-показательные бактерии Вода Фекальное Бактерии группы кишечных палочек Escherichia coli, Citrobacter freundii, Enterobacter aerogenes, Enterococ-cus faecalis Почва То же Те же бактерии и клостридии ( Clostridium perfringens, С/, sporo-genes и др.) Промышленно-быто- Термофильные бактерии, Proteus вые (разлагающиеся vulgaris отбросы) Пищевые Фекальное Бактерии группы кишечных па-продукты лочек S. faecalis, P. vulgaris Орально-капельное Staphylococcus aureus Предметы Фекальное Бактерии группы кишечных па-обихода лочек, P. vulgaris, E. faecalis Орально-капельное S. aureus Воздух То же S. aureus, S. pyogenes Вода, Промышленное Производственные штаммы мик-почва, робов воздух |
О микробной обсемененности судят по микробному числу — общему количеству микробов, содержащихся в единице объема или массы исследуемого объекта (1 мл воды, 1 г почвы, 1 м3 воздуха). Содержание санитарно-показательных бактерий оценивают по двум показателям — титру и индексу. За титр принимают тот минимальный объем или массу исследуемого материала, в которых обнаруживают санитарно-показательные бактерии; индекс показывает количество санитарно-показательных бактерий, содержащихся в 1 л жидкости, 1 г плотных веществ, 1 м3 воздуха. К санитарно-показательным бактериям относятся представители облигатной микрофлоры организма человека и теплокровных животных, для которых средой обитания являются кишечник или респираторный тракт. Они обладают следующими свойствами: 1) постоянно выделяются в большом количестве из организма во внешнюю среду; 2) не имеют других мест обитания; 3) способны сохраняться в окружающей среде в течение тех же сроков, что и патогенные бактерии, паразитирующие в кишечнике или респираторном тракте; 4) не способны интенсивно размножаться на каких-либо объектах вне организма хозяина и изменять свои свойства. Перечисленные признаки присущи ряду бактерий, которые признаны санитарно-показательными для различных объектов окружающей среды (см. табл. 8.1.1).
Санитарно-показательными микробами, свидетельствующими о фекальном загрязнении окружающей среды, являются бактерии группы кишечной палочки (БГКП). Они принадлежат к разным родам семейства Enterobacteriaceae. Дифференциально-диагностические признаки БГКП представлены в табл. 8.1.2. Обнаружение E.coli в каких-либо объектах окружающей среды или пищевых продуктах считается наиболее достоверным показателем свежего фекального загрязнения. Наличие бактерий родов Citrobacter и Enterobacter указывает на относительно давнее фекальное загрязнение. Присутствие Clostridium perfrin-gens, С. sporogens и других клостридий в почве свидетельствует о ее фекальном загрязнении, причем как свежем, так и давнем, поскольку эти бактерии образуют споры, что позволяет им длительно сохраняться в окружающей среде (в частности, в почве). Обнаружение в объектах окружающей среды Enterococ-cusfaecalis также свидетельствует об их фекальном загрязнении. К группе термофильных бактерий относятся неродственные бактерии, представители различных семейств, способных размножаться при температуре 60 °С и выше (Lactobacillus lactis, Streptococcus thermophilus и др.). Они не являются постоянными обитателями кишечника человека и не служат критериями фекального загрязнения окружающей среды. Резкое увеличение количества этих бактерий может свидетельствовать о загрязнении почвы разлагающимися отбросами, поскольку они размножаются в саморазогревающемся навозе и компостах.
|
Вид бактерий Признак продук- метило- реак- индоло- рост на рост в ты сбра- вый ция Фо- образо- цитрат- присут-живания красный геса— вание ной ствии Проска- среде KCN уэра Escherichia Смесь + — + — — coli кислот Citrobacter То же + — р + + freundii Enterobacter Бутан- — + — + + aerogenes диол |
тельно перемешивают с водой. Посевы инкубируют при 37 "С в течение 1—2 сут. Воду из открытых водоемов засевают параллельно на две серии чашек, одну из которых инкубируют при 37 °С в течение 1 сут, а другую — 2 сут при 20 "С. Затем подсчитывают количество выросших на поверхности и в глубине среды колоний и вычисляют микробное число воды — количество микроорганизмов в 1 мл.
Определение коли-титра и коли-индекса воды. Коли-mump воды — минимальное количество воды (мл), в котором обнаруживаются БГКП. Коли-индекс — количество БГКП в 1 л воды. Эти показатели определяют титрационным (бродильным) методом или методом мембранных фильтров.
Метод титрования. Производят посев различных объемов воды в глюкозопептонную среду (1 % пептонная вода, 0,5 % раствор глюкозы, 0,5 % раствор хлорида натрия, индикатор Андреде и поплавок), причем для посевов больших количеств (100 и 10 мл) используют концентрированную среду, содержащую 10-кратные количества указанных веществ.
Воду открытых поверхностных водоемов исследуют в объемах 100; 10; 1,0 и 0,1 мл. Для исследования водопроводной воды делают посевы трех объемов по 100 мл, трех объемов по 10 мл и трех объемов по 1 мл. Посевы инкубируют в течение 1 сут при 37 "С. О брожении судят по наличию пузырьков газа в поплавке. Из забродивших или помутневших проб производят посевы на среду Эндо. Из выросших колоний делают мазки, окрашивают по методу Грама и ставят оксидазный тест, позволяющий дифференцировать бактерии родов Escherichia., Citrobacter и Enterobacter от грамотрицательных бактерий семейства Pseudomonadaceae и других оксидазоположительных бактерий, обитающих в воде. С этой целью стеклянной палочкой снимают 2—3 изолированные колонии с поверхности среды, наносят штрихом на фильтровальную бумагу, смоченную ди-метил-п-фенилендиамином. При отрицательном оксидазном тесте цвет бумаги не изменяется, при положительном она окрашивается в синий цвет в течение 1 мин. Грамотрицатель-ные палочки, не образующие оксидазу, вновь исследуют в бродильном тесте — вносят в полужидкий питательный агар с 0,5 % раствором глюкозы и инкубируют при 37 "С в течение 1 сут. При положительном результате определяют коли-титр и коли-индекс по статистической табл. 8.1.3.
Метод мембранных фильтров. Мембранный фильтр № 3 помещают в воронку Зейтца, вмонтированную в колбу Бунзена, которая присоединяется к вакуумному насосу. Мембранные фильтры предварительно стерилизуют кипячением в дистиллированной воде. Воду из водопроводной сети и воду артезианских скважин фильтруют в объеме 333 мл. Чистую воду открытого водоема фильтруют в объеме 100, 10, 1,0 и 0,1 мл, более загрязненную перед фильтрованием разводят стерильной
|
Количество положительных Коли Пределы индекса Коли -титр результатов индекс из 3 объ- из 3 объ- из 3 объ- нижний верхний емов по емов по емов по 100 мл 10 мл 1 мл 000 Менее 3 — — Более 3300 001 3 0,5 9 333 010 3 0,5 13 333 1 00 4 0,5 20 250 101 7 1 21 143 3 3 2 1100 150 4800 0,9 333 Более! 100 - — Менее 0,9 |
|
Показатель Норматив Число микробов в 1 мл воды, не более 100 Число бактерий группы кишечных палочек в 1 л воды 3 (коли-индекс), не более |
миксиновая и др.), инкубируют при 37 °С в течение 2 сут, через I 24 и 48 ч производят высевы на плотные элективно-дифференциальные среды: агар КФ, агар ТТХ (среда с трифенилтетра-золий-хлоридом), полимиксинтеллуритный агар. Идентифицируют стрептококки по виду колоний, морфологии клеток и окраске по методу Грама. На среде с ТТХ стрептококки образуют колонии темно-красного цвета, на агаре с теллуритом — черного цвета.