ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 10.11.2023
Просмотров: 75
Скачиваний: 1
ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
Коллоквиум по вирусам
1. Определение вирусов как особых форм организации живого. Принципы классификации и таксономии вирусов.
Морфология и структура вирусов.
Понятие о вирионе.
Типы симметрии нуклеокапсида.
Химический состав вирусов.
Ивановский 1892
Вирусы – неклеточные формы жизни, обладающие собственным геномом, способностью к репродукции в клетках живых организмов/клеточных культурах, адаптационными свойствами и изменчивостью.
Отличия: -нет клеточной структуры;
-обязательно содержат нуклеиновую к-ту (ДНК/РНК); + капсид
-не имеют собственных белоксинтезирующих/энергетических систем (облигатные паразиты).
-дизъюнктивный тип (разобщённый) способ репродукции, т.е. синтез белка и НК вируса происходит в разное время и в разных местах поражённой клетки).
-проходят через бактериальные фильтры.
Структурная единица – вирион. Это внеклеточная форма жизни вируса.
В центре – НК, покрытая капсидом, который состоит из капсомеров.
Простые вирусы включают только НК и капсид.
Сложные вирусы НК + капсид + суперкапсид (гликолипиды, гликопротеиды, полисахариды). + могут содержать ферменты ДНК-полимеразу/РНК-.
Функции:
НК – наследственность, изменчивость и инфекционность.
Капсид – защитная (от нуклеаз), рецепторная (адресная), проникновения, антигенная, первичная токсичность.
Формы существования:
-вирион- внеклеточная форма.
-вегетативный вирус – репродуктивная форма.
-провирус – в составе генома хозяина. Вирогения – вирогенная клетка!!
Типы симментрии вирусов:
-кубический- капсомеры располагаются так, что образуют многогранник – икосаедр, под микроскопом круглые, внутри всегда есть полость, где располагается НК,
-спиральный- капсомеры плотно прилегают к НК-палочковидные, нити.
-смешанный- характерен для бактериофагов – форма сперматозоида.
Классификация вирусов:
-тип и структура НК;
-строение, наличие суперкапсида;
-размеры;
-АГ структура;
-внутриядерная, цитоплазматическая локализация;
-резистентность к температуре, РН, эфиру;
-тропизм к тканям и органам;
-способность образовывать тельца, наличие ферментов.
Царство Vira
Подцарства ДНК и РНК
Семейства 14-РНК, 6-ДНК
Подсемейства
Роды
Виды
Подсемейства ДНК:
-аденовирусы (респираторные)
-гепаднавирусы (гепатит Б)
-Герпесвирусы
-паповавирусы
-парвовирусы
-поксвирусы (оспы)
Подсемейства РНК:
-пикорновирусы (гепатит А, полиомиелит)
-калицевирусы (гепатит Е)
-тоговирусы (трансмиссивно – геморрагические лихорадки, + краснуха)
-жёлтые вирусы (жёлтая лихорадка, клещевой энцефалит)
-коронавирусы
-рабдовирусы (бешенство)
-филовирусы (лихорадка Эбола)
-парамиксовирусы (свинки, кори)
-ортомиксовирусы (грипп)
-буньовирусы
-реовирусы (кишечные инфекции у детей)
-ретровирусы (ВИЧ, онкогенные)
2.
Фазы репродуктивного цикла вирусов:
1) адсорбция вируса за счёт взаимодействия с рецептором;
2) проникновение вируса в клетку путём рецепторного эндоцитоза. Только ГЕНОМ.
3) синтез ранних вирусных белков (ферменты репликации, синтеза структурных белков).
4) репликация вирусной НК, синтез поздних вирусных белков.
5) сборка вирусов.
6) выход вирусов из кл. (взрыв/почкования).
Особенности репродукции:
ДНК транскрипция, иРНК трансляция, белок.
У РНК-вируса геном РНК если представлен + нитевая, то после проникновения иРНК может сразу реплицироваться. Если – нитевая, то как на матрице иРНК строится + нитевая и идет репликация.
Типы взаимодействия вируса с клеткой:
-
автономный
вирус проникает в клетку, но не проникает в геном, плавает в цитоплазме
1) продуктивная инфекция – клетка погибает, вирус выходит новый. Острая вирусная инфекция.
2) абортивная инфекция – вирус проникает, но не размножается, образование нового вируса не происходит; из-за защитных механизмов.
-
интегративный
встраивается в геном - вирогения, длительно существует. Персистенция вируса – длительное пребывание. Хронические, латентные инфекции (герпес, ВИЧ, +медленные вирусные инфекции).
3.
Культивирование вирусов:
1) заражение восприимчивых животных
2) заражение куриных эмбрионов (4-12 дневных)
3) заражение культур клеток.
-цитопатогенное действие: появление синцития, изменение формы клеток, потеря цитоплазмы
, ядер, отростков.
-бляшкообразование;
-феномен гемагглютинации, на вирусной клетке содержится Гемагглютинин (берётся капля культуры клетки, капля эритроцитов).
-феномен гемадсобции (адсорбция эритроцитов на заражённых клетках).
-цветная проба (питательная среда содержит Феноловый красный – цвет среды красный, при жизнедеятельности клеток pH сдвигается в кислую сторону, цвет среды меняется на жёлтый. При заражении вирусом метаболизм клетки подавляется, цвет не меняется).
Методы лабораторной диагностики вирусных инфекций:
-вирусоскопический - обнаружение телец/включений путём световой/электронной микроскопии. Применяется редко, т.к. мелкие, сходны по форме. НО обнаружение специфических телец/включений: бешенство – срезы мозга - тельца Бабиша-Негри (кладбище вирусов). Совиный глаз при цитомегаловирусной инфекции.
Вирусологический метод диагностики: этапы и цели.
-вирусологический -
Этапы:
а) накопление вирусов при культивировании их на одной из 3х моделей;
1) заражение восприимчивых животных
2) заражение куриных эмбрионов (4-12 дневных)
3) заражение культур клеток.
-цитопатогенное действие: появление синцития, изменение формы клеток, потеря цитоплазмы, ядер, отростков.
-бляшкообразование;
-феномен гемагглютинации, на вирусной клетке содержится Гемагглютинин
-феномен гемадсобции (адсорбция эритроцитов на заражённых клетках).
-цветная проба (питательная среда содержит Феноловый красный – цвет среды красный, при жизнедеятельности клеток pH сдвигается в кислую сторону, цвет среды меняется на жёлтый. При заражении вирусом метаболизм клетки подавляется, цвет не меняется).
При выявлении: гибель животного, проявление клинических симптомов, обнаружение телец включений.
Гибель эмбриона, появление бляшек на хорион-алантоисной оболочке, р-ция гемагглютинации.
б) индикация и титрование вирусов;
в) идентификация (по АГ структуре с использованием диагностических противовирусных сывороток).
Цели: выделение и идентификация вирусов.
РН по ЦПД/по цветной пробе/по биопробе на животном
РТГАгглютинации
РТГАдсобции
РСК
ИФА
РИФ
Применяется при диагностике почти всех вирусных инфекций: слизь из носоглотки при кори (культивирование в культуре ткани (обнаружение по ЦПД – симпласты), идентификация в РТГА, РН).
- при оспе материалом больного (кровь, отделяемое носоглотки, элементы сыпи, секционный материал) заражают хорион-алантоисную оболочку куриных эмбрионов
-аденовирусная инф-ция: культивирование в культуре клеток, индикация по ЦП, идентификация в РСК и РН.
-паротит слюна, СМЖ, моча, культура клеток/куриный эмбрион, обнаружение в РГА, ЦПД, идентификация в РТГА, РТГадс, РСК, РН.
При гепатите сложное культивирование в культуре клеток почек зеленых мартышек, поэтому используются методы ПЦР, серологический, собственно-иммунный.
-биологический- заражение восприимчивых животных.
-собственно-иммунный- выявление АГ- экспресс диагностика. ИФА, РИФ.
-серологический- выявление АТ. РСК, РТГА, РН, ИФА, +IgM.
-ПЦР
4. Поксвирусы: вирус натуральной оспы и осповакцины. Характеристика биологических свойств, патогенез оспы, специфическая профилактика.
Это самые крупные и самые высокоорганизованные вирусы среди всех ]звестных вирусов животных. Имеют форму кирпича с закругленными углами, размер 250-450нм, геном в виде двунитевой линейной ДНК, белковый капсид. По обе стороны от сердцевины вируса имеются два белковых тела. Имеется наружняя липидная оболочка с трубчатыми белковыми структурами.
Вирус имеет химический состав, напоминающий бактериальный: он содержит нейтральные жиры, углеводы, фосфолипиды.
Поксвирусы, единственные из ДНК- содержащих вирусов размножается в цитоплазме клеток.
Культивируются в культуре клеток, где вызывают круглоклеточковую дегенерацию (ЦПД); в курином эмбрионе на хорионалантоисной оболочке, на которой образуются белые бляшки.
Эпидемиология и патогенез.
Источник инфекции – больной человек. Передается воздушно-капельным и контактным путем (через полотенца, постель, предметы обихода).
Размножается в лимфоидной ткани глоточного кольца, затем проникает в кровь, возникает вирусемия откуда вирус проникает в эпидермис, вызывая пролиферацию шиповидных клеток и дегенерацию клеток мальпигиевого слоя. Инкубация составляет в среднем 2 недели.
Болезнь начинается остро с головными болями, миалгиями, лихорадкой. На коже появляется сыпь в стадии макулы, папулы, пузырьков и пустул, затем появляется корочка, которая отпадает, после чего остается рубец. Течение инфекции тяжелое, летальность может достигать 40%. После перенесенного заболевания иммунитет сохраняется пожизненно.
Лабораторная диагностика:
- вирусоскопическим методом с использованием электронной и световой микроскопии. При световой микроскопии в препаратах и пустул обнаруживаются клетки с тельцами Гварниери. В препаратах из содержимого оспенных пузырьков при окраске по Морозову выявляются тельца Пашена.
- при серологическом методе обнаруживают комплементсвязывающие антитела уже после первой недели заболевания. Специфический АГ вируса оспы может быть обнаружен из элементов сыпи с помощью ИФА или РИФ.
- при вирусологическом методе материалом больного ( кровь, отделяемое носоглотки, элементы сыпи, секционный материал) заражают хорион-алантоисную оболочку куриных эмбрионов.
Специфическая профилактика осуществляется осповакциной, которая содержит живой вирус осповакцины. Предполагают, что вирус осповакцины произошел от вируса коровьей оспы или натуральной оспы и адаптировался к человеку. Впервые этот вирус для профилактики оспы применил Дженер в 1796 году. Благодаря широкомасштабным профилактическим мероприятиям во всем мире проводимым ВОЗ с 1967 года по 1980 год натуральная оспа полностью ликвидирована.
5. Герпес вирусы, их классификация. Виды герпесвирусов, патогенных для человека. Характеристика биологических свойств, патогенез герпесвирусной инфекции. Онкогенные функции генома герпесвирусов. Специфическая профилактика.
Семейство герпесвирусов включает 72 вируса, из них для человека патогенны 8 типов: вирусы простого герпеса 1 и 2 типов, вирус ветряной оспы и опоясывающего лишая, цитомегаловирусы, вирус Эпштейна-Барр, лимфотропные вирусы 6, 7 и 8 типов.
Все они отличаются друг от друга по антигенным свойствам. Это крупные вирусы 150-210 нм. Геном представлен двунитевой линейной ДНК, покрытой капсидной оболочкой в форме икосаэдра. Имеют суперкапсидную оболочку. Термолабильны, чувствительны к УФЛ. Это самые распространенные и неконтролируемые вирусы. Проникают в организм человека разнообразными путями: воздушно-капельным, контактно-бытовым, трансплацентарным, трансфузионным, половым. Чаще поражает кожу и слизистые, вызывает тяжелые поражения глаз, гениталий и ЦНС.
Вирус простого герпеса инфицирует организм человека в раннем возрасте. У 80% людей имеет бессимптомное течение. У остальных протекает в виде стоматита, кератита, менингоэнцефалита, генитального герпеса, герпеса новорожденных. Вирус сохраняется в ганглиях тройничного(1тип) и крестцовых нервов (2тип) на протяжении всей жизни человека, периодически вызывая обострения, которые могут быть спровоцированы лихорадкой, УФЛ, стрессами и т.д.)