Файл: Kurs_lektsiy_po_mikrobiologii_GGMU_2012.pdf

146

3.  Откол  подозрительных  колоний  на  косячок  сывороточного  или 
сахарного МПА с целью накопления чистой культуры. 
4.  Проверка  чистоты  выделенной  культуры — микроскопия  мазков, 
окрашенных  по  Граму  (однородная  популяция  грамположительных 
кокков, расположенных короткими или длинными цепями). 
5. 

Постановка 

диагностических 

тестов 

на 

отличие 

семейств 

Streptococcaceae от Micrococcaceae: оксидаза (-), каталаза (-), коагулаза (-), 
лецитиназа (-), анаэробное сбраживание глюкозы и маннита. 
6. Дифференцировка видов 
7. Внутривидовая дифференцировка (табл. «Тесты отличия S. pyogenes от 
S. pneumoniae»). 
Определение  серогруппы  в  реакции  преципитации.  Определение 
антибиотикограммы. 
III. Серологический метод.  Постановка иммунологических реакций (РСК) 
для определения антител — антистрептолизина; антистрептодерназы и др. 
Иммунитет 
Антимикробный  и  антитоксический.  После  перенесенной  скарлатины,  в 
отличие  от  других  стрептококковых  инфекций,  остается  прочный 
антитоксический иммунитет. Его напряженность проверяется постановкой 
внутрикожной пробы с эритрогенным токсином (проба Дика). 
При  отсутствии  иммунитета  проба  Дика  положительная;  при  наличии 
антитоксина — отрицательная. 
Профилактика и лечение 
Специфическая профилактика стрептококковых инфекций не разработана. 
Для  предупреждения  хронических  инфекций  могут  быть  использованы 
аутовакцины.  Для  лечения  используют  антибиотики  пенициллинового 
ряда, сульфаниламидные препараты. 

Streptococcus pneumoniae 
Морфология и тинкториальные свойства 
Пневмококк  ланцетовидной  формы,  диплококк,  размер  около 1 мкм, 
аспорогенен,  неподвижен.  Имеет  полисахаридную  капсулу.  Хорошо 
окрашивается анилиновыми красителями, грамположительный.  
Биологические свойства 
Хемоорганотроф,  аэроб  (капнофил — лучше  растет  в  атмосфере 5-8 % 
СО

2

).  Культивируют  на  средах  с  белком  и  глюкозой:  кровяном  МПА, 

сывороточном  МПА  и  МПБ,  сахарном  МПА  и  МПБ.  На  кровяном  МПА 
образует  уплощенные  колонии  с  оливково-зеленой  зоной  α-гемолиза;  на 
жидких питательных средах — диффузное помутнение. 
Ферментативная  активность  умеренная  и  в  основном  не  отличается  от S. 
pyogenes. 
Антигены 

147

Пневмококки имеют три основных антигенных комплекса: 
1 — полисахаридный антиген клеточной стенки (субстанция S); 
2 — капсульный антиген (полисахарид); 
3 — М-белок. 
По капсульному полисахаридному антигену пневмококки разделяют на 83 
сероварианта, 56 из них разбиты на 19 групп, 27 представлены 
самостоятельно.  
Факторы патогенности 
I. Структурные: 

•  капсула — обладает  антифагоцитарной  и  антикомплементарной 

активностью; 

•  М-белок клеточной стенки — фактор адгезии. 

II. Ферменты агрессии: 

•  гиалуронидаза; 

•  экзопротеиназа; 

•  нейраминидаза.  

III. Токсины: 

•  пневмолизин — мембранотоксин,  идентичен  О-стрептолизину S. 

pyogenes; 

•  лейкоцидин. 

Экология и распространение 
Пневмококки являются условно-патогенными микроорганизмами и входят 
в  состав  нормальной  микрофлоры  верхних  дыхательных  путей  человека. 
При  наличии  предрасполагающих  факторов  (переохлаждение,  снижение 
активности  секреторного IgA, макрофагов)  может  возникнуть  эндогенная 
пневмококковая  инфекция.  Выделение  пневмококка  от  больного  или 
носителя  в  окружающую  среду  приводит  к  развитию  экзогенной 
инфекции:  острых  и  хронических  заболеваний  дыхательного  тракта, 
менингита,  сепсиса,  ползучей  язвы  роговицы,  отита  и  других  гнойно-
воспалительных заболеваний. 
Микробиологическая диагностика. 
Исследуемый  материал:  слизь,  мокрота,  гной,  ликвор,  кровь  (в 
зависимости от формы пневмококковой инфекции).  
I. Бактериоскопический метод. 
Микроскопия мазков окрашенных по Леффлеру, Граму и Бурри-Гинсу (на 
капсулу).  
II. Бактериологический метод. 
Этапы метода: 
1. Посев (не позднее 1

−2 часов с момента забора) на 5% кровяной МПА.  

2. Культивирование в капнофильных условиях 24 часа при температуре 37°С: 

•  учет культуральных свойств (колонии с α-гемолизом); 

148

•  микроскопия мазков из колоний с α-гемолизом (окраска по Граму и 

на капсулу); 

•  откол подозрительных колоний на сывороточный МПА (МПБ); 

•  подсчет колоний с α-гемолизом. 

3. Определение чистоты культуры.  
4.  Постановка  диагностических  тестов:  каталаза (-); коагулаза (-); среда  с 
оптохином (-); среда с желчью (лизис); ферментация инулина (+). 
5. Серотипирование с противопневмококковыми сыворотками. 
6. Определение антибиотикограммы. 
III. Экспресс-методы. 
1. Определение антигена капсулы в реакции «набухание капсулы». Учет с 
помощью фазово-контрастного микроскопа. 
2.  Обнаружение  антигена  в  сыворотке  или  ликворе  (РСК,  латекс-
агглютинация, встречный иммуноэлектрофорез). 
Иммунитет.  Типоспецифический,  нестойкий,  высокий  удельный  вес 
хронических заболеваний. 
Профилактика  и  лечение.  Для  специфической  профилактики  пневкокковых 
инфекций  используются  вакцины,  приготовленные  из  высокоочищенных 
капсульных  полисахаридов  сероваров,  пнемококков,  чаще  других 
вызывающих заболевания (1, 2, 3, 4, 6А, 7, 8, 9, 12, 14, 18С, 19, 25). 

149

Лекция 15 
Энтеробактерии — характеристика семейства. 
Эшерихии. Шигеллы. Сальмонеллы. Иерсинии. 

 
Семейство Enterobacteriaceae объединяет 

обширную 

группу 

факультативно-анаэробных, 

грамотрицательных, 

неспорообразующих 

палочек, для большинства из которых средой обитания является кишечник 
человека и животных. 
Энтеробактерии вызывают: 
1) кишечные инфекции: 

•  брюшной тиф 

•  дизентерия 
•  пищевые токсикоинфекции 

•  иерсиниоз 

•  колиэнтерит 

2) некишечные, оппортунистические инфекции: 

•  бактериемия 

•  менингит 

•  раневые инфекции 

•  заболевания мочеполовой системы 

•  заболевания дыхательной системы 

3) особо опасные инфекции 

•  чума 

Таксономия 
Царство: Procaryotae; 

Отдел: Gracilicutes; Семейство: Enterobacteriaceae 

Семейство насчитывает более 40 родов. Роды семейства Enterobacteriaceae, 
имеющие значение в медицине: 

•  Citrobacter 

•  Edwardsiella 

•  Enterobacter 

•  Erwinia 

•  Escherichia 

•  Hafnia 

•  Klebsiella 

•  Kluyvera 

•  Morganella 

•  Proteus 

•  Providencia 

•  Salmonella 

•  Serratia 

•  Shigella 

•  Yersinia 

 
Всем  представителям  семейства Enterobacteriaceae присущи  следующие 
признаки: 

150

•  единство  морфологии — короткие,  не  образующие  спор  палочки  с 

закругленными  концами,  имеют  размеры 0,3

−1,0 x 1,0−6,0  мкм, 

подвижны (перитрихи) или неподвижны; 

•  отрицательная окраска по Граму; 

•  факультативные анаэробы или аэробы; 

•  хемоорганотрофы; 

•  хорошо растут на простых питательных средах; 

•  оксидазоотрицательны; 

•  каталазоположительны; 

•  ферментация  глюкозы  (и  ряда  других  углеводов)  с  образованием 

кислоты и газа, или только кислоты; 

•  отсутствие протеолитических свойств; 

•  восстанавливают нитраты в нитриты; 

•  место обитания — кишечный тракт и дыхательные пути. 

 
Антигены энтеробактерий: 

•  соматический О-антиген (липополисахарид); 

•  капсульный К-антиген (протеин или полисахарид); 

•  жгутиковый Н-антиген (белок). 

 
Общие  принципы  диагностики  инфекций,  вызываемых  микробами 
семейства Enterobacteriaceae 
Микроскопический метод диагностики, как правило, не используется, так 
как  патогенные  и  непатогенные  энтеробактерии  имеют  общие 
морфологические свойства. 
Бактериологический метод 
Забор материала. Характер материала зависит от локализации микроба — 
возбудителя.  Чаще  всего  в  качестве  исследуемого  материала  служат 
испражнения.  Также  исследуется  моча,  мокрота,  раневое  отделяемое, 
кровь. 
 
Питательные среды, используемые для бактериологического исследования, 
подразделяются на три группы: 
1. Среды обогащения. Создают условия размножения выделяемого 
возбудителя и основаны либо на наличии в среде факторов активации 
роста данного микроба, либо подавлении роста сопутствующей 
микрофлоры. 
Первому  принципу  соответствует  среда  Раппопорт,  второму — 
селенитовый бульон, магниевая, Мюллера.