ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 01.03.2019
Просмотров: 6384
Скачиваний: 2
151
2. Дифференциально-диагностические среды Эндо, Левина, Плоскирева —
плотные агаризованные среды, содержащие дифференцирующий углевод
лактозу и обесцвеченный индикатор.
Разлагающие лактозу кишечные палочки дают рост окрашенных колоний в
зависимости от типа среды: красный (среда Эндо), темно-синий (среда
Левина). Лактозонегативные энтеробактерии на средах Эндо, Левина,
Плоскирева дают бесцветные колонии.
3. Среды накопления чистой культуры ― двухсахарный агар Клиглера.
Среда состоит из столбика и скошенной части агаризованный среды с
лактозой и глюкозой, индикатором и реагентами для определения
сероводорода и уреазы.
Посев производят штрихом по поверхности скошенной части и уколом в
столбик. При росте микробов глюкоза лучше разлагается в столбике,
лактоза на скосе, в результате чего дифференцированно меняется цвет
среды.
• Ферментация лактозы — изменение цвета скоса.
• Ферментация глюкозы — изменение цвета столбика.
• При образовании газа — пузырьки и разрывы в среде.
• При продукции сероводорода — почернение по ходу укола.
• При ферментации мочевины — изменение цвета среды на
малиновый.
Идентификация
выделенных
чистых
культур
основана
на
морфологических, культуральных, биохимических признаках и антигенной
структуре:
а) грамотрицательные палочки (признак общий для семейства);
б) наличие капсулы (у клебсиелл);
в) цвет колоний на чашечных средах;
г) подвижность (сальмонеллы и эшерихии подвижны, шигеллы и
клебсиеллы неподвижны);
д) биохимические свойства (ферментация углеводов пестрого ряда Гисса,
продукция индола, сероводорода, аммиака и др.);
е) антигенная структура. Определяют в реакции агглютинации с
поливалентными и монорецепторными агглютинирующими сыворотками —
серотипирование до серогруппы и серовара.
ЭШЕРИХИИ
Таксономия
Царство: Procaryotae; Отдел: Gracilicutes; Семейство: Enterobacteriaceae;
Род: Escherichia; Вид: Escherichia coli.
В пределах вида по О-, Н- и К(В)- антигенам различают серогруппы и
серовары.
152
Морфология и тинкториальные свойства. Подобно большинству
энтеробактерий. Особенности: имеют жгутики (перитрихи), могут быть
атрихи.
Биологические свойства
Хемоорганотрофы, факультативные анаэробы. Не требовательны к
питательным средам и условиям культивирования. Для культивирования
используются следующие типы питательных сред:
1. Простые — МПБ, МПА. Рост на МПБ в виде помутнения, на МПА — S-
и R-типы колоний.
2. Дифференциально-диагностические — среды Эндо, Левина, Плоскирева
— плотные агаризованные среды, содержащие дифференцирующий
углевод лактозу и обесцвеченный индикатор. Разлагающие лактозу
кишечные палочки дают рост окрашенных колоний в зависимости от типа
среды: красные (среда Эндо), темно-синие (среда Левина).
3.Среды накопления чистой культуры — агар Клиглера. E.coli,
ферментирующая лактозу и глюкозу до кислоты и газа, дает пожелтение и
разрыв среды на скосе и в столбике.
Ферментативная активность высокая. В отличие от других
энтеробактерий, E.coli ферментирует лактозу и другие углеводы до
кислоты и газа.
Антигены
Антигенная структура эшерихий типична для всего семейства
энтеробактерий. Выделяют соматический (О-), жгутиковый (Н-) и
поверхностный (К-) антигены. Основным является липополисахаридный
О-антиген, специфичность которого положена в основу деления эшерихий
на серогруппы (известно более 170 О-серогрупп).
Экология и распространение
Непатогенные эшерихии обитают в толстом кишечнике — нормальная
микрофлора. Их относят к серогруппам О2, О7, О9 и др.
Физиологическая роль эшерихий кишечника.
Обеспечивают
антиинфекционную
защиту
(колонизационная
резистентность и стимуляция развития лимфоидной ткани).
С фекалиями эшерихии постоянно выделяются в окружающую среду,
длительно сохраняясь в воде и почве. Они являются санитарно-
показательными
микроорганизмами,
указывающими
на
степень
фекального загрязнения объектов внешней среды.
Диареегенные эшерихии принадлежат к определенным серогруппам.
153
Классификация патогенных эшерихий
Возбудители
диареи
Серогруппы
Заболевания
Механизм патогенного
действия
ЭПКП,
ЕРЕС (энтеро-
патогенные
эшерихии)
Более 20
серогрупп:
О18, О20, О25,
О26, О33, О44,
О55, O75, О86,
О91, О111,
О114, О119,
О125, О126,
О127, О128,
О142, О146,
О159 и др.
Колиэнтериты у
детей 1-го года
жизни
Адгезивность,
размножение на
поверхности энтероцитов,
инвазивность,
цитотоксическое действие
ЭИКП,
EIEC (энтеро-
инвазивные
эшерихии)
11
серологических
групп: О28,
О32, О112,
О124, О129,
О135, О136,
О143,О144,
О15а, О164,
О151, О301 и
др.
Дизентериеподобные
эшерихиозы у детей
и взрослых
Адгезивность, разрушение
микроворсинок,
инвазивность, размножение
в цитоплазме энтероцитов,
продукция энтеротоксинов,
заражение соседних
энтероцитов, разрушение
эпителия, воспаление
ЭТКП,
ЕТЕС (энтеро-
токсигенные
эшерихии)
О6, О8, О154,
О148, О149 и
др.
Холероподобные
эшерихиозы у детей
и взрослых
(диарейные
заболевания с
обезвоживанием
организма)
Адгезивность,
размножение на
поверхности энтероцитов,
продукция энтеротоксина
(холерогена), который
активирует
аденилатциклазу, что ведет
к увеличению ц-АМФ и
соответственно к
гиперсекреции солей,
выходу из клеток воды и
развитию диареи
ЭГКП,
ЕНЕС (энтеро-
геморрагические
эшерихии)
О26, О111,
О145, О157
Кратковременный
водянистый стул,
быстро
сменяющийся
гемодиареей
(кровавый понос),
болеют дети и
взрослые
Продуцируют
шигаподобные токсины,
которые разрушают клетки
эндотелия капилляров
толстого кишечника
(развитие кровотечения)
ШИГЕЛЛЫ
Бактериальная дизентерия (шигеллез) — кишечная антропонозная
инфекция, вызываемая бактериями рода шигелла, протекающая с
154
преимущественным поражением слизистой оболочки толстого кишечника,
частым жидким стулом с примесью слизи и крови, общей интоксикацией.
Таксономия
Царство: Procaryotae; Отдел: Gracilicutes; Семейство: Enterobacteriaceae;
Род: Schigella; Виды: S. dysenteriae; S. flexneri; S. boydii; S. sonnei.
Морфология и тинкториальные свойства (особенности)
Короткие, относительно толстые, с закругленными концами палочки.
Атрихи.
Биологические свойства
Хемоорганотрофы, факультативные анаэробы, не требовательны к
питательным средам и условиям культивирования.
Дифференциально-диагностические среды Плоскирева, Левина, Эндо. Не
разлагающие лактозу шигеллы дают рост неокрашенных колоний.
Элективно-дифференциальной для шигелл является среда Плоскирева.
Содержит соли желчных кислот, угнетающих рост эшерихий.
Среда накопления чистой культуры — агар Клиглера. Ферментирующие
глюкозу и не ферментирующие лактозу шигеллы изменяют цвет среды
только в столбике. Нет газообразования.
Ферментативная активность
1. Шигеллы ферментируют углеводы с образованием кислоты без газа.
2. Все шигеллы лактозонегативны, за исключением S. sonnei,
ферментирующей лактозу через 24
−48 часов.
3. Все шигеллы не образуют H
2
S, не обладают уреазной активностью.
Антигены
Выделяют общие для семейства Enterobacteriaceae, родовые, видовые,
групповые и типоспецифические О-антигены, а также К-антигены. Н-
антигенов у них нет.
Факторы патогенности
1. Адгезия и колонизация слизистых оболочек желудочно-кишечного
тракта. Функцию адгезинов выполняют пили, белки наружной мембраны и
ЛПС.
2. Факторы инвазии. Обеспечивают проникновение шигелл в энтероциты и
размножение в них с одновременным проявлением цитотоксического
действия.
3. Эндотоксин. Обладает энтеротропным, нейротропным и пирогенным
действием.
4. Экзотоксин Шига — нейротоксин, цитотоксические свойства которого
наиболее сильно выражены у S. dysenteriae.
5. Шигоподобные токсины (SLT-I, SLT-II). Синтез кодируется
плазмидными генами. Взаимодействуют с аденилатциклазной системой,
обладают диареегенным действием.
Эпидемиология, патогенез и клиника заболевания (особенности)
155
Источник инфекции — больной человек, носитель. Механизм передачи —
фекально-оральный.
Патогенез (особенности): фекально-оральный путь поступления микроба в
организм Æ адгезия, инвазия, внутриклеточное размножение в
эпителиоцитах Æ разрушение клеток Æ выход шигелл в просвет
кишечника Æ повторение цикла Æ развитие клинической картины
заболевания.
Клиника заболевания определяется видом возбудителя. При шигеллезе
Зонне преобладают симптомы гастроэнтерита; шигеллезе Флекснера —
колитический синдром; шигеллезе Григорьева-Шиги — колит с
нейротоксикозом (тяжелая форма инфекции).
Лабораторная диагностика
1. Бактериологический метод (основной).
Фекалии Æ посев на среды Плоскирева, Левина, Эндо Æ постановка РА на
стекле бесцветных колоний со смесью шигеллезных сывороток Æ откол
агглютинабельных колоний на среду Олькеницкого (изменение цвета
среды в столбике) Æ определение серогруппы (серовара) в РА с группо- и
типоспецифическими шигеллезными сыворотками на стекле и при
положительном результате в пробирках Æ проба на подвижность (-) Æ
определение биохимической активности Æ антибиотикограмма Æ
циногенотипирование.
2. Серологический метод. Со второй недели заболевания постановка РА,
РНГА с сывороткой больного — определение титра антител или динамики
нарастания титра антител при повторной постановке реакций.
3. Экспресс-диагностика. Для выявления шигеллезных антигенов в
исследуемом материале могут быть использованы РИФ, ИФА.
САЛЬМОНЕЛЛЫ
Сальмонеллез — острая кишечная инфекция, вызываемая различными
серотипами бактерий рода Salmonella, характеризуется разнообразными
клиническими проявлениями от бессимптомного носительства до тяжелых
септических форм. В большинстве случаев протекает с поражением
органов пищеварительного тракта (гастроэнтериты, колиты). Возможны
генерализованные формы инфекции.
Брюшной тиф — тяжелое острое инфекционное заболевание,
характеризующееся глубокой общей интоксикацией, бактериемией,
увеличением печени и селезенки, энтеритом и специфическим поражением
лимфатического аппарата тонкого кишечника.
В Беларуси сальмонеллезы занимают первое место в структуре острых
кишечных инфекций бактериальной этиологии.
Таксономия