Файл: Kurs_lektsiy_po_mikrobiologii_GGMU_2012.pdf

ВУЗ: Не указан

Категория: Не указан

Дисциплина: Не указана

Добавлен: 01.03.2019

Просмотров: 6564

Скачиваний: 2

ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
background image

 

196

фагоцитов,  а  также  скоплений  возбудителя).  При  гибели  листерий 
высвобождается токсин и развивается интоксикация. 
Заболевание  может  протекать  в  форме  ангины,  сепсиса,  конъюнктивита, 
менингита. 
Постинфекционный  иммунитет  непрочный,  обусловлен  в  основном 
клеточными факторами. 
Лабораторная диагностика 
Культуральный  метод.  Исследуемый  материал — кровь,  ликвор,  слизь  из 
зева, пунктат увеличенных лимфатических узлов. 
Серодиагностика. Антитела в сыворотке крови обнаруживают в РА, РНГА, 
РСК (методом парных сывороток). 
У  лиц  со  слабоположительными  серологическими  реакциями  выявляют 
ГЗТ (кожно-аллергическая проба). 
Специфическая профилактика листериоза не разработана. 
Лечение — антибиотики. 
 
КОРИНЕБАКТЕРИИ 
Дифтерия
 — острое  инфекционное  заболевание,  характеризующееся 
фибринозным  воспалением  слизистых  зева,  гортани,  трахеи,  реже  других 
органов,  явлениями  интоксикации,  с  преимущественным  поражением 
симпатико-адреналовой  системы  (надпочечники),  сердечно-сосудистой  и 
нервной систем. 

Таксономия 

Царство Procaryotae, отдел Firmicutes, род Corynebacterium. 
Виды: 
C. diphtheriae — возбудитель дифтерии. 
C. ulcerans — вызывает дифтериеподобные заболевания. 
C. pseudotuberculosis — вызывает  абсцессы  и  язвенно-некротические 
лимфадениты. 
C. cistidis — вызывает  образование  камней  в  мочевыводящих  путях, 
циститы, пиелонефриты. 
C. xerosis — сапрофит,  обитает  в  слезном  канале,  может  вызывать  вяло 
текущий коньюнктвит. 
Морфология 
Тонкие, длинные, булавовидные палочки, размер 1

−8 х 0,3−0,5мкм, спор и 

капсул  не  образуют,  неподвижны.  Содержат  включения — зерна 
волютина, расположенные полярно и придающие палочкам булавовидную 
форму.  В  мазках  из  культур  палочки  располагаются  под  углом  (римские 
цифры V или X), в  патологическом  материале — войлокообразно,  т.к.  в 
клеточной  стенке  бактерий  содержится  специфический  липид — корд-
фактор, склеивающий отдельные особи. 
Тинкториальные свойства 


background image

 

197

1.  Простая  окраска  метиленовым  синим — палочки  голубые, 

волютиновые зерна темно-синие. 

2.  Специальная окраска по методу Нейссера — палочки окрашиваются 

везувином  в  желтый  цвет,  волютиновые  зерна — темносиние 
(черные). 

3.  Окраска по Граму — грамположительны. 

Биологические свойства 
Хемоорганотрофы, факультативные анаэробы, ауксотрофы, требовательны 
к питательным средам. 
Культуральные свойства 
Для культивирования используют 2 группы питательных сред. 
I. Селективные среды. 
1) среда Ру (свернутая лошадиная сыворотка); 
2) среда Леффлера (3/4 бычьей сыворотки + 1/4 сахарного МПБ). 
На  сывороточных  средах  рост  через 18

−20  часов  в  виде  несливающихся, 

сосочковидных колоний («шагреневой кожи» или « булыжной мостовой»).  
II. Дифференциально-диагностические среды. 
1)  среда  Клауберга  (кровяно-теллуритовый  МПА  с  глицерином). 
Вырастает 2 типа  колоний: R-тип,  крупные,  серо-черные,  уплощенные,  с 
радиальной исчерченностью, без зоны гемолиза — биовар gravis; S-тип — 
черные,  блестящие,  мелкие,  с  зоной  гемолиза — биовар mitis; возможен 
промежуточный вариант intermedius (SR-колонии). 
2)  среда  Бучина  (кровяной  МПА  с  мальтозой  (глюкоза),  цистином  и 
хинозолином  и  индикатором  ВР) — синие  колонии S- или R-типа. 
Ферментация мальтозы до кислоты. 
3) среда Тинсдаля-Садыковой (цистин-теллуритовый сывороточный агар) — 
серо-черные колонии с коричневым ободком. 
Биохимические свойства 
Ферментирует глюкозу и мальтозу до кислоты, не ферментирует сахарозу. 
Биовар gravis разлагает крахмал, биовар mitis — не разлагает. Оба биовара 
дают  положительную  пробу  на  цистиназу  (Пизу)  и  отрицательную  на 
уреазу (Закса). Восстанавливают нитраты, кроме четвертого биотипа. 
Факторы патогенности 

1.  Экзотоксин. Состоит из фракций А и В. Фракция А — токсический 

полипептид, обладает некротическими свойствами. Блокирует синтез 
белка  на  рибосомах,  что  приводит  к  гибели  клеток.  Мишень 
действия: — надпочечники, миокард, нервные клетки. Фракция В — 
транспортный 

полипептид, 

обладает 

гиалуронидазной, 

нейраминидазной, протеазной активностью (см. ферменты инвазии). 

2.  Гемолизирующий фактор — развитие геморрагического синдрома.  
3.  Структурные компоненты:  


background image

 

198

•  корд-фактор  (димиколоат  трегалоза ) нарушает  процессы 

фосфорилирования  и дыхания в клетках, 

•  фимбрии (реснички) и поверхностные структуры клеточной 

стенки — адгезины, 

обуславливают 

адгезию 

и 

колонизацию. 

4.  Корицины — факторы микробного антагонизма. 

Биотипы C. diphtheriae 
В 1931 году  Андерсен  выделил 3 биотипа C. diphtheriae: S — mitis, R ― 
gravis, SR — intermedius (промежуточный). 
Различие биотипов: 

1.  рост на среде Клауберга — тип колоний (gravis — «маргаритки», mitis — 

S-тип);  

2.  гемолитическая активность: mitis — дает, gravis — нет. 
3.  рост  на  жидких  питательных  средах,  ферментация  крахмала: gravis 

— ферментирует, mitis не ферментирует. 

 

Дифференциальные признаки, отличающие C. diphtheriae от дифтероидов 

ферментация 

Виды 
корине-
бактерий 

глю-

коза 

маль-

тоза 

саха-

роза 

крах-

мал 

уреаза 

(проба 

Закса)

цистиназа 

(проба 

Пизу) 

гемо-

лиз 

токсино-

образо-

вание 

C. diphtheriae 

К+ 

К+ - +/-  - 

+  +/-  +/- 

C. xerosis 

К+ 

К+ 

К+ -  - 

C. pseudo-
diphtheriticum 

- - - -  + 

-  - 

 

Антигенная структура 
К-антиген,  О-антиген.  Недостатком  метода  серотипирования  являются 
частые реакции спонтанной агглютинации или полиагглютинабельность, в 
том числе и у нетоксигенных штаммов. 
Эпидемиология, патогенез и клиника заболевания (особенности) 
Источник  инфекции — больной  человек,  носитель.  Чаще  болеют  дети, 
однако  в  последнее  время  наблюдался  рост  заболеваемости  и  среди 
взрослых. 
Механизм передачи — воздушно-капельный, реже контактный. 
Патогенез  (особенности):  локализация  микроорганизма  у  входных  ворот 
инфекции  →  размножение  →  выделение  экзотоксина  →  токсемия  → 
некроз клеток надпочечников, миокарда, нервных клеток. 
Существуют  токсигенные  и  нетоксигенные  штаммы C. diphtheriae. 
Экзотоксин  синтезируется  лизогенными  культурами  в  виде  неактивного 
предшественника.  Активация  происходит  под  действием  собственной 
протеазы, которая разрезает его на 2 пептида А и В. Пептид В выполняет 


background image

 

199

акцепторную  функцию,  пепдит  А  реализует  биологическую  активность 
токсина. 
Выявление токсина — методы: 

•  заражение клеточных культур (цитопатическое действие); 

•  ИФА с меченым антитоксином; 

•  реакция преципитации по Оухтерлони. 

Клинические  формы:  дифтерия  зева,  гортани,  трахеи,  носа,  уха,  половых 
органов и др. Возможно микробоносительство. 
Наиболее  часты  формы  дифтерия  зева,  которая  может  протекать  как 
локализованная,  распространенная,  токсическая  и  гипертоксическая 
формы. 
Лабораторная диагностика 
Цели:  

•  диагностика  острых  воспалительных  процессов  зева,  носа, 

носоглотки; 

•  по эпидпоказаниям на микробоносительство; 

•  лиц,  впервые  поступивших  в  детские  дома,  ясли,  сады,  школы-

интернаты на выявление микробоносителей. 

Исследуемый  материал:  слизь  из  зева,  носоглотки,  других  очагов 
поражения (берется ватным тампоном). 
I. Бактериоскопический метод. 
Микроскопия 

мазков, 

окрашенных 

по 

Леффлеру, 

Нейссеру, 

люминесцентная  микроскопия.  При  люминесцентной  микроскопии  для 
зерен волютина характерно коричнево-красное свечение. 
Дифтероиды — нормальные 

обитатели 

слизистых 

оболочек, 

морфологически сходные с возбудителями дифтерии. 
Отличие дифтероидов от C. diphtheriae: 

•  дифтероиды более грубые палочки; 

•  дифтероиды  имеют  большее  количество  волютиновых  зерен, 

расположенных не полярно, а по всему телу; 

•  в мазках дифтероиды располагаются не под углом, а параллельными 

рядами — «частоколом». 

II. Бактериологический метод.  
Этапы метода: 
1. Посев на неселективные (роста нет); селективные сывороточные среды 
(рост  в  виде  «шагреневой  кожи»);  дифференциально-диагностические 
среды: Клауберга (серо-черные колонии R- и S-типа); Бучина (темносиние 
колонии); Тинсдаля-Садыковой (колонии с коричневым ободком). 
2. Идентификация выделенной чистой культуры, определение биовара. 
3. Определение токсигенности. 


background image

 

200

Постановка  реакции  преципитации  в  агаровом  геле - при  встречной 
диффузии  в  геле  токсина  и  антитоксина  в  месте  их  взаимодействия 
образуется четкая линия преципитации. 
Иммунитет 
Антитоксический  и  антимикробный.  Напряженность  антитоксического 
иммунитета ранее определялась в реакции Шика (внутрикожное введением 
дифтерийного  токсина — 1/40 Dlm для  морской  свинки).  При  наличии 
иммунитета  проба  Шика  отрицательная,  при  отсутствии — местная 
воспалительная  реакция.  В  настоящее  время  для  определения  титра 
антитоксических антител используются РНГА и ИФА. 
Специфическая профилактика 
Активная  иммунизация  проводится  вакциной  АКДС  или  АДС  (АДС-М) . 
Дифтерийный  компонент — анатоксин.  Вакцинация  плановая  в 3, 4 и 5 
месяцев.  Ревакцинации  в 18 месяцев,  в 6, 11 и 16 лет,  а  в  последующем 
каждые 10 лет до 66 лет. 
Лечение 
Серотерапия,  антибиотики.  Серотерапия  дифтерии  эффективна  только  в 
ранний 

период 

болезни. 

Проводится 

противодифтерийной 

антитоксической сывороткой.