Файл: Методичн_ рекомендац_ї 2 частина.doc

ВУЗ: Не указан

Категория: Не указан

Дисциплина: Не указана

Добавлен: 05.07.2024

Просмотров: 180

Скачиваний: 0

ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.

СОДЕРЖАНИЕ

Міністерство охорони здоров’я україни

Практичне заняття №10 Тема: «Неспецифічні фактори захисту організму від мікроорганізмів»

Рекомендації для оформлення протоколу

5.1. Схема титрування лізоциму в слині

5.3. Вивчити явище незавершеного фагоцитозу на демонстраційних препаратах.

6. Питання для самоконтролю.

Практичне заняття №11 Тема: «Серологічні реакції (1 заняття)»

1. Актуальність теми:

2. Конкретні цілі:

4. Завдання для самостійної роботи під час підготовки до заняття

4.1. Перелік основних термінів, параметрів, характеристик, які повинен засвоїти студент на занятті:

4.2. Теоретичні питання до заняття:

4.3. Практичні завдання, які виконуються на занятті:

5. Зміст теми.

Рекомендації для оформлення протоколу.

5.1. Реакція аглютинації на склі

5.2. Розгорнута реакція аглютинації, яка поставлена з метою серологічної ідентифікації культури бактерій

5.4. Препарати імунних діагностичних сироваток.

6. Питання для самоконтролю.

Практичне заняття №12 Тема: «Серологічні реакції (2 заняття)»

4.1.Перелік основних термінів, параметрів, характеристик, які повинен засвоїти студент при підготовці до заняття:

4.2. Теоретичні питання до заняття:

4.3. Практичні завдання, які виконуються на занятті:

5. Зміст теми:

Рекомендації для оформлення протоколу.

5.1. Облік поставленої на попередньому занятті реакції аглютинації з метою серологічної ідентифікації культури бактерій.

5.2. Постановка реакції аглютинації з метою виявлення антитіл в сироватці хворого з підозрою на черевний тиф та паратифи а та в.

5.3. Принцип постановки та облік результатів реакції непрямої гемаглютинації (рнга), поставленої з метою серологічної діагностики.

5.4. Постановка реакції імунного гемолізу.

Практичне заняття №13 Тема: «Серологічні реакції з мітками»

1.Актуальність теми:

3. Базові знання, вміння, навички, необхідні для вивчення теми (міждисциплінарна інтеграція). Дивись практичне заняття №10.

5. Зміст теми:

Рекомендації для оформлення протоколу.

5.1.Проведення обліку реакції Відаля, що поставлена з метою визначення ат в сироватці крові хворого проти збудників черевного тифу та паратифів а і в.

5.2. Постановка реакції зв’язування комплементу (рзк) з метою виявлення антитіл в досліджуваній сироватці.

5.4. Провести облік іфа, що була поставлена з метою виявлення нВsAg у сироватці крові хворих з підозрою на вірусний гепатит в (демонстраційна робота).

2. Конкретні цілі:

3. Базові знання, вміння, навички, необхідні для вивчення теми (міждисциплінарна інтеграція). Дивись практичне заняття №10.

4.3. Практичні завдання, які виконуються на занятті:

Рекомендації для оформлення протоколу.

6. Питання для самоконтролю

Практичне заняття №15 Тема: «Сучасні методи мікробіологічної діагностики інфекційних захворювань»

1. Актуальність теми.

3. Базові знання, вміння, навички, необхідні для вивчення теми (міждисциплінарна інтеграція). Дивись практичне заняття №10.

4. Завдання для самостійної роботи під час підготовки до заняття.

4.1. Перелік основних термінів, параметрів, характеристик, які повинен засвоїти студент при підготовці до заняття.

4.2. Теоретичні питання до заняття:

4.3. Практичні завдання, які виконуються на занятті:

5. Зміст теми.

Рекомендації для оформлення протоколу

6. Питання для самоконтролю.

7. Рекомендована література

4.2. Теоретичні питання до заняття:

  • Філогенетичні особливості формування імунної системи тварин.

  • Центральні та периферичні органи імунної системи, їх функції

  • Імунокомпетентні клітини, їх функції.

  • Дати визначення поняттям: антигени, антигенність

  • Антигенна будова бактеріальної клітини на прикладі E.coli

  • Будова та функції імуноглобулінів

  • Особливості взаємодії антигенів та антитіл

  • Серологічні реакції, відмінності простих та складних СР.

  • Цілі серологічних реакцій

  • Компоненти серологічної реакції, поставленої з метою сероідентифікації

  • Реакція аглютинації - визначення

  • Реакція преципітації - визначення

  • Імунні діагностичні сироватки, використання та етапи їх отримання.


4.3. Практичні завдання, які виконуються на занятті:

  • Здійснити постановку реакції аглютинації на склі із адсорбованими сироватками, провести її облік.

  • Здійснити постановку реакції преципітації в рідкій фазі, провести її облік.

  • Поставити розгорнуту реакцію аглютинації з метою сероідентифікації культури бактерій.

  • Вивчити зразки імунних діагностичних сироваток.

5. Зміст теми.

На практичному занятті студенти мають ознайомитися із поняттям серологічних реакцій, визначити мету постановки та компоненти СР, ознайомитись із особливостями реакцій аглютинації та преципітації. Студенти проводять постановку реакцій аглютинації на склі із адсорбованими сироватками та преципітації в рідкій фазі, здійснюють облік. Розбирають особливості обліку розгорнутої реакції аглютинації, проводять постановку розгорнутої РА з метою серологічної ідентифікації. Виконані завдання студенти заносять в протокол та підписують його у викладача.

Рекомендації для оформлення протоколу.

5.1. Реакція аглютинації на склі

Матеріали:

  • Культура бактерій

  • Адсорбована імунна діагностична сироватка для РА на склі

  • 0,5% розчин NaCl

  • Предметне скло, бак. петля

Хід роботи:

Облік результаті: Позитивна реакція – утворення аглютинату.

5.2. Розгорнута реакція аглютинації, яка поставлена з метою серологічної ідентифікації культури бактерій

Матеріали:

  • Культура бактерій (суспензія)

  • Імунна діагностична сироватка в робочому розведенні (1:50), титр - 1:3200

  • 0,5% розчин NaCl

  • Пробірки, піпетки

Хід роботи:

Облік результатів. Позитивний результат – утворення аглютинату;

Попередній облік проводиться через 2 години, остаточний – через 18-24 години.


5.3. Реакція преципітації в рідкій фазі.

Матеріали: Антиген (преципітиноген);

Сироватка (преципітин) - №1, №2, контрольна (№3);

Піпетки;

Хід роботи:

Облік результатів.

Позитивна реакція – утворення кільця преципітація (помутніння).

5.4. Препарати імунних діагностичних сироваток.

6. Питання для самоконтролю.

  • Які органи імунної системи відносяться до центральних та периферичних, їх функції?

  • Які клітини відносяться до імунокомпетентних, їх функції?

  • Які клітини приймають участь у синтезі антитіл, характер їх кооперації?

  • Дати визначення поняттям: антигени, антигенність.

  • Які антигени має бактерія (на прикладі E.coli)?

  • Будова та функції імуноглобулінів.

  • Що таке серологічні реакції, відмінності простих та складних СР?

  • З якою метою може бути поставлена серологічна реакція?

  • Реакція аглютинації – визначення.

  • Реакція преципітації – визначення.

  • Які складові простих СР?

  • Які етапи включає в себе отримання імунних діагностичних сироваток?

Практичне заняття №12 Тема: «Серологічні реакції (2 заняття)»

  1. Актуальність теми:

У захисті організму від чужорідних агентів вирішальну роль відіграють імунологічні механізми, які здійснюються антитілами (імуноглобулінами) та імунокомпетентними клітинами (лімфоцитами). В основі імунологічних механізмів є специфічна взаємодія антигену, що потрапив в організм, та антитіла, що утворилось у відповідь на потрапляння антигену. На використанні принципу взаємодії антигену та антитіла базуються всі імунологічні діагностичні реакції, які названі серологічними, оскільки антитіла знаходяться в сироватці крові. Застосування серологічних реакцій з метою серодіагностики інфекційного захворювання та з метою сероідентифікації збудників, що виділені від хворого, є необхідним для встановлення заключного діагнозу інфекційного захворювання. На занятті студентам надається можливість оволодіти методикою постановки основних серологічних реакцій (реакція аглютинації, реакція пасивної гемаглютинації, реакція гемолізу). Розуміння ролі антитілоутворення у формуванні імунної відповіді є необхідним підгрунтям для формування уявлення про складний механізм функціонування імунної системи та її ролі у розвитку імунозалежних патологій. Вміння обирати потрібні для діагностики інфекційного захворювання серологічні реакції, ставити їх та інтерпретувати отримані результати є важливим для формування у студентів клінічного мислення і розуміння суті патологічного процесу при інфекційних хворобах.


  1. Конкретні цілі:

  • Аналізувати механізм взаємодії антитіл з антигенами

  • Знати закономірності серологічних реакцій

  • Інтерпретувати участь клітин імунної системи в імунній відповіді і фази імунної відповіді

  • Вміти проводити облік результатів розгорнутої реакції аглютинації, поставленої з метою серологічної ідентифікації

  • Оволодіти методикою постановки реакції аглютинації, поставленої з метою серологічної діагностики (реакція Відаля)

  • Оволодіти методикою постановки реакції імунного гемолізу

  • Засвоїти методику постановки реакції непрямої гемаглютинації

  1. Базові знання, вміння, навички, необхідні для вивчення теми (міждисциплінарна інтеграція). Дивись практичне заняття №10.

  1. Завдання для самостійної роботи під час підготовки до заняття.


4.1.Перелік основних термінів, параметрів, характеристик, які повинен засвоїти студент при підготовці до заняття:

Термін

Визначення

1

2

Реакції лізису

Реакцією лізису називають розчинення антигену під дією антитіла у присутності комплементу. Свіжевиділена з організму людини імунна сироватка здатна до лізису, бо містить антитіла та комплемент. Якщо ж сироватка прогрівалась чи довго зберігалась, то лізис відбувається лише за умови додавання комплементу.

Реакція імунного гемолізу

Реакція імунного гемолізу базується на тому, що при імунізації тварин (частіше кролів еритроцитами барана) в сироватці крові з’являються специфічні захисні антитіла – гемолізини, які здатні в присутності комплементу порушувати зв’язок гемоглобіну зі стромою еритроцитів та викликати гемоліз (вихід гемоглобіну назовні еритроцита). Імунна сироватка, яка містить гемолізини, має назву гемолітичної сироватки. Такі сироватки випускають Інститути бактеріальних препаратів.

Сила гемолітичної сироватки

Сила гемолітичної сироватки визначається в титрах – це максимальне її розведення в об’ємі 0,5 мл, при якому спостерігається повний гемоліз 0,5 мл 3% зависі баранячих еритроцитів у присутності 0,5 мл комплементу, розведеного 1:10 та витримуванні пробірок впродовж години при 370 С.

Реакція непрямої гемаглютинації

Реакція непрямої гемаглютинації (РНГА) полягає в тому, що еритроцити барана чи іншого виду тварин, маючи здатність адсорбувати на собі антигени, стають “чутливими” (сенсибілізованими) до відповідної імуної сироватки. Під впливом специфічних антитіл сенсибілізовані еритроцити склеюються та випадають в осад, утворюючи на дні пробірки (або лунки) гемаглютинат. Відрізняючись високою специфічністю та чутливістю, РНГА дозволяє виявляти мінімальну кількість антитіл.

Система комплементу

Група сироваткових білків, які в процесі їх активації перетворюються в ефекторні молекули, що призводять до розвитку запалення (С3а, С5а, С4а), фагоцитозу (С3b)та руйнуванню клітин (С6-9). Таким чином, білки комплементу приймають участь у розвитку запальних реакцій, реакцій опсонізації та лізису клітинних мембран.

1

2

Діагностикуми

Діагностикуми – стандартні антигени, в ролі яких можуть бути суспензії інактивованих, рідше живих, бактерій, вірусів або їх антигенів у ізотонічному розчині. Діагностикуми застосовуються при серологічній діагностиці інфекційних захворювань.