Файл: белорусский государственный технологический университет.docx

тометрический метод. Удельную активность (А) β–галактозидазы рас- считывали по формуле:

∆????


∆????????
А = ,

белка

где ∆???? – изменение показателя преломления; ∆???? – время, за которое

произошло изменение показателя преломления; ????_белка – масса белка. На первом этапе работы проводили анализ кинетики роста клеток


600
Гр+ и Гр- бактерий на подготовленной молочной сыворотке. В резутате чего получили, что оптическая плотность ????^????????????у E.coliбольше, чем

у B.subtilis,что свидетельствует о лучшей утилизации лактозы и накоп- лении биомассы клетками E.coli. Однако, начальная удельная скорость роста биомассы клеток у них была в 2–3 раза ниже, чем у B. subtilis. Следующим этапом было получение внутриклеточных ферментов. Для их выделения использовали метод прото- и сферопластирования кле- ток. В случае Гр+ бактерий получение протопластов с помощью лизо- цима 1 мг/мл и выделение из них ферментов не вызывало сложности. Контроль этапа протопластирования проводился с помощью спектро- фотометрии.

В случае сферопластирования Гр- бактерий E.coliнаряду с лизо- цимом требуется добавление ЭДТА для разрыхления клеточной стенки, в противном случае лизоцим слабо действует на клетки. При- сутствие ЭДТА увеличивает скорость сферопластирования Гр- клеток в 2 раза. В таблице приведены значения показателей, характеризующих эффективность получения β–галактозидаз из Гр+ и Гр- бактерий.

Таблица – Характеристика показателей для Гр+ и Гр-

---

бактерий

Показатели	Гр+	Гр-
	Bacillussubtilis	E.coli
Удельная скорость роста, ч-1	0,30	0,12
(D600)max	0,379	1,632
А, ед/мг	11, 0	5,6

Из таблицы видно, что несмотря на высокую биомассу клеток E.coli, активность ее фермента ниже, чем у микроорганизмов B.subtilis. Это связано с инактивацией ЭДТА β-галактозидазы, являющейся ме- талло-ферментом.

В результате проведенной работы установлено, что удельная ак- тивность фермента β-галактозидазы, выделенного из клеток B. subtilis(Гр+) выше, чем удельная активность фермента β-галактозидазы, выде- ленного из клеток E. coli (Гр-). Также для клеток B. subtilis было обна- ружено явление генетической адаптации и увеличение выхода био- массы.

ЛИТЕРАТУРА

1. 
   Храмцов А.Г. Феномен молочной сыворотки. – СПб.: Профес- сия. – 2011. – 804 с.
   
2. 
   Остроумов Л.А., Гаврилов В.Г. Биотрансформация лактозы ферментными препаратами β-галактозидазы // Техника и технология пищевых производств. – 2013. – № 1. С 1–3.
   

УДК 581.19:547.56

Студ. М.С. Мельникова, Е.Ю. Добрилко

Науч. рук.: доц. О.С. Игнатовец; зав. кафедрой В.Н. Леонтьев

(кафедра биотехнологии, БГТУ)

---

СКРИНИНГ ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ РЕСПУБЛИКИ УЗБЕКИСТАН ПО КОМПЛЕКСУ ФЛАВОНОИДОВ, ОБЛАДАЮЩИХ РЕГЕНЕРАТИВНЫМИ СВОЙСТВАМИ КОЖНЫХ ПОКРОВОВ

В настоящее время на мировом рынке каждый третий лечебный препарат является препаратом растительного происхождения. За по- следние 15–20 лет в области фармакогнозии произошли качественные изменения технических возможностей изучения химического состава лекарственных растений и лекарственных растительных средств. Этому способствовало обогащение данной науки современными спек- тральными и другими физико-химическими методами. Одним из пер- спективных источников фитопрепаратов считаются лекарственные растения, содержащие флавоноиды. Флавоноиды – наиболее многочис- ленный класс природных фенольных соединений, для которых харак- терно структурное многообразие, высокая и разносторонняя актив- ность и малая токсичность. Интерес к флавоноидам обусловлен их ан- тиоксидантными, ангиопротекторными, гепатопротекторными, желче- гонными, нейротропными и другими важнейшими фармакологиче- скими свойствами [1].

Цель работы – скрининг лекарственных растений Республики Уз- бекистан по комплексу флавоноидов (изокверцитрина и кемпферола), обладающих регенеративными свойствами кожных покровов. Сумму фенольных соединений определяли с помощью метода Фолина-Чо- кальтеу. В основе метода определения общего содержания флавонои- дов лежит реакция с AlCl₃ [2]. Результаты исследований представлены в таблице 1.

В ходе сравнительной характеристики с литературными значени- ями сделали вывод, что данные, полученные экспериментальным пу- тем, соответствую литературным.

С целью первичного качественного обнаружения флавоноидов в

---

растительном материале широко используется ТСХ [3]. В образце с экстрактом зверобоя найдена зона с характерной окраской и значением коэффициента подвижности R_f = 0,43, что соответствует стандартному образцу изокверцитрина. По совпадению окраски и величины коэффи- циента подвижности R_f = 0,59 со стандартным образцом в экстрактах цветков бессмертника песчаного идентифицирован кемпферол-3-β-D-

глюкопиранозид. В экстрактах душицы, сенны, череды и шалфея ука- занные флавоноиды не обнаружены.

Таблица 1 – Общие содержания внутриклеточных фенольных соединений и флавоноидов в растительном сырье

Название раститель- ного сырья	Место сбора	Содержание внутриклеточных фенольных соединений, мг-экв галловой кислоты / г абсолютно сухого сырья	Содержание флавоноидов, мг-экв рутина/ г абсолютно сухого сырья
Череда	Республика Узбекистан, Ташкентская область, Паркентский район	9,083	6,616
Душица		26,69	22,998
Сенна		14,467	53,32
Зверобой		28,645	37,96
Бессмертник		22,413	83,75
Шалфей		34,745	37,46

На следующем этапе научно-исследовательской работы разрабо- тана методика ВЭЖХ определения кемпферола-3-β-D-глюкопирано- зида и изокверцитрина в экстрактах лекарственных растений. Было установлено количественное содержание изокверцитрина в экстракте

---

травы зверобоя продырявленного и кемпферол-3-β-D-глюкопирано- зида в экстракте цветков бессмертника песчаного.

Таким образом, по результатам научно-исследовательской ра- боты, сделан вывод, что цветы бессмертника и сухая трава зверобоя продырявленного могут быть использованы для создания фитопрепа- ратов лечебно-профилактического назначения, обладающих регенера- тивными свойствами кожных покровов.

ЛИТЕРАТУРА

1. 
   Флавоноиды как биологически активные соединений лекар- ственных растений / В.А. Куркин [и др.] // Фундаментальные исследо- вания. – 2013. – № 11 – С. 1897–1901.
   
2. 
   Страх, Я. Л. Изучение содержания фенольных соединений и флавоноидов различных популяций морошки приземистой RubuschamaemorusL. / Я. Л. Страх, О. С. Игнатовец // Вестник Фонда фунда- ментальных исследований. – 2020. – № 4. – С. 69–78.
   
3. 
   Оценка антимикробной активности экстрактов цветков бес- смертника и листьев воробейника / Н. Ю. Адамцевич [и др.] // Наука и инновации. – 2021. – № 11. – С. 64–68.
   

---