ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 31.10.2019
Просмотров: 2986
Скачиваний: 1
81
Дата: ________________
ЗАНЯТИЕ № 34
РАБОТА:
БИОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ МОЧИ
ОБОСНОВАНИЕ ВЫПОЛНЕНИЯ РАБОТЫ. К компонентам мо-
чи, которые у здорового человека не обнаруживаются обычными ка-
чественными реакциями, относятся: белок, сахар, кетоновые тела,
желчные пигменты, кровь. Они появляются в моче при нарушениях
обмена веществ или нарушении функции органов. Поэтому их опре-
деление в моче используют для диагностики заболеваний и контроля
за ходом лечения.
1.
КАЧЕСТВЕННАЯ РЕАКЦИЯ НА БЕЛОК
ПРИНЦИП МЕТОДА: с помощью азотной (или сульфосалицило-
вой) кислоты при наличии белка в моче образуется белый осадок (де-
натурированный белок).
ХОД РАБОТЫ: взять две пробирки - контроль и опыт.
ОТМЕРИТЬ
КОНТРОЛЬ
О П Ы Т
М О Ч А
Н
2
О
Сульфосалицилат 20%
(или наслоение на кон-
центрированную азотную
кислоту - НNО
3
)
-
1,0 мл
3 капли
1,0 мл
-
3 капли
РЕЗУЛЬТАТ:
КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
Белок появляется в моче при нефрите, сердечной декомпенсации,
воспалении мочевыводящих путей (цистите), повышении артериаль-
ного давления, иногда при беременности, нефрозах.
В Ы В О Д
:
82
2. ПОЛУКОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ БЕЛКА
ПРИНЦИП МЕТОДА: метод основан на реакции Геллера с кон-
центрированной азотной кислотой. Путем последовательного разве-
дения мочи достигают такого максимального разведения, при кото-
ром еще появляется кольцо между 2-й и 3-й минутой.
ХОД РАБОТЫ:
1)
отмерить в 4 пробирки по 1 мл HNO
3
;
2)
в других 4-х пробирках приготовить разведения мочи по
схеме:
ОТМЕРИТЬ
ОПЫТ 1
ОПЫТ 2
ОПЫТ 3
ОПЫТ 4 и т.д.
Разведение
Моча
Н
2
О
неразвед.
1,0 мл
-
1 : 10
0,1 мл
0,9 мл
1 : 20
0,1 мл
1,9 мл
1 :30
0,1 мл
2,9 мл
Наслоить с помощью пипетки разведенную мочу (1мл) на азот-
ную кислоту
HNO
3
конц.,
1,0 мл
1,0 мл
1,0 мл
1,0 мл
РЕЗУЛЬТАТ:
КОНЕЧНЫЙ РЕЗУЛЬТАТ: Умножают разведение на 0,033, по-
лучают содержание белка в моче в г/л.
КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ: то же, что и в
работе “Качественная реакция на белок”.
В Ы В О Д:
83
3. КАЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГЛЮКОЗЫ В МОЧЕ
(проба Гайнеса)
ПРИНЦИП МЕТОДА: метод основан на способности глюкозы
восстанавливать при нагревании в щелочной среде гидроксид меди в
оксид меди красного цвета.
ХОД РАБОТЫ: взять пробирку: опыт
ОТМЕРИТЬ
ОПЫТ
Реактив Гайнеса
Моча
9 капель
2 капли
Перемешать, нагреть до начала кипения.
РЕЗУЛЬТАТ:
КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ: Присутствие
глюкозы в моче – глюкозурия - наблюдается при сахарном диабете,
при поражении почек, отравлении оксидом углерода, эфиром, хлоро-
формом и т.д.
В Ы В О Д:
4.
ЭКСПРЕСС-МЕТОДЫ
84
85
Дата: ______________
ЗАНЯТИЕ № 35
РАБОТА № 1: ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩЕГО БЕЛКА В
СПИННОМОЗГОВОЙ ЖИДКОСТИ БИУРЕТОВЫМ
МЕТОДОМ
ОБОСНОВАНИЕ ВЫПОЛНЕНИЯ РАБОТЫ. Содержание белка
в спинномозговой жидкости, в отличие от сыворотки крови, незначи-
тельно. Определение общего белка в спинномозговой жидкости име-
ет важное значение для диагностики опухолей мозга и воспалитель-
ных заболеваний центральной нервной системы.
ХИМИЧЕСКИЙ МЕХАНИЗМ МЕТОДА. Раствор белка в щелоч-
ной среде в присутствии сульфата меди (NaOH/CuSO
4
) окрашивается
в сине-фиолетовый цвет. Интенсивность окраски прямо пропорцио-
нальна концентрации белка в сыворотке крови и определяется фото-
метрически.
ХОД РАБОТЫ: взять опытную и контрольную пробирки.
ОТМЕРИТЬ
ОПЫТ
КОНТРОЛЬ
РЕАКТИВ ГОРНАЛА
СПИННОМОЗГОВАЯ
ЖИДКОСТЬ
NaCl 0,9%
4,0 мл
0,1 мл
-
4,0 мл
-
0,1 мл
Перемешать, фотометрия через 20 минут.
Кювета 1 см, λ=540 нм (зеленый светофильтр)
РЕЗУЛЬТАТ:
Е оп =
С общего белка
=