ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 31.10.2019
Просмотров: 2996
Скачиваний: 1
36
КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
У взрослых здоровых людей с мочой выделяется 1,6-6,4
ммоль/сутки мочевой кислоты. В сыворотке крови – 0,19-0,4
мммоль/л.
Повышенная экскреция мочевой кислоты (
гиперурикурия
) на-
блюдается при заболеваниях, сопровождающихся ускоренной гибе-
лью клеток (терапия раковых и лейкозных больных цитостатиками,
гемобластозы, гемолитические процессы, псориаз, синдром длитель-
ного сдавления), токсикозах беременности, алкоголизации, потребле-
нии богатых пуринами продуктов (печень, почки, икра рыб).
Пониженное выведение мочевой кислоты (
гипоурикурия
) отме-
чается при почечной недостаточности, подагре, нефритах, отравлени-
ях свинцом и бериллием, синдроме Дауна.
ВЫВОД:
37
Дата_______________
ЗАНЯТИЕ № 11
САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ АУДИТОРНАЯ РАБОТА
ПО ТЕМЕ «БИОСИНТЕЗ БЕЛКОВ»
Задания для самостоятельной работы:
1.
Написать реакции образования и строение валил-тРНК.
2.
Составить схему биосинтеза дипептида метионилглутамата (ста-
дии инициации и элонгации трансляции).
3.
Рассмотреть роль генной инженерии в получении белков человека.
Записать схему процесса.
4.
Рассмотреть роль полимеразной цепной реакции (ПЦР) в диагно-
стике. Записать схему ПЦР.
5.
Выполнить индивидуальные задания по теме.
38
39
Дата: _______________
ЗАНЯТИЕ № 12
РАБОТА № 1. КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
МАКРОЭРГИЧЕСКИХ СОЕДИНЕНИЙ МЫШЦ
ОБОСНОВАНИЕ ВЫПОЛНЕНИЯ РАБОТЫ. Главный макроэрг
клеток человека и животных – АТФ – образуется в реакциях окисли-
тельного и субстратного фосфорилирования АДФ. В мышцах содер-
жится креатинфосфат – макроэрг, образующийся с участием АТФ.
Оба вещества обеспечивают энергией мышцы при их сокращении.
ПРИНЦИП МЕТОДА. Богатые энергией два остатка фосфорной
кислоты АТФ и фосфорный остаток креатинфосфата быстро отщеп-
ляются при гидролизе в кислой среде (лабильно связанный фосфор).
Сравнение содержания неорганического фосфора, определяемого по
цветной реакции с молибдатом аммония и аскорбиновой кислотой до
и после гидролиза, указывает на количество лабильно связанного
фосфора макроэргов, что отражает количество макроэргических со-
единений в мышцах.
ХОД РАБОТЫ:
А.
Выделение макроэргов из мышц
0,5 г мышцы гомогенизируют в 5 мл охлажденной 2,5 % ТХУ во
льду. Фильтруют в мерную пробирку, осадок на фильтре промывают
5 мл холодной Н
2
О. Объем доводят до 10 мл.
Б.
Определение лабильно связанного фосфора
Взять две пробирки: контроль и опыт.
ОТМЕРИТЬ
КОНТРОЛЬ
ОПЫТ
Безбелковый фильтрат
НСl, 1 М
0,5 мл
1 мл
0,5 мл
1 мл
Кипятить
10 минут,
охладить
40
NaOH, 1 M
H
2
O
Молибдат аммония, 1 %
Аскорбиновая кислота, 1 %
1 мл
2,5 мл
0,5 мл
0,5 мл
1 мл
2,5 мл
0,5 мл
0,5 мл
Перемешать, инкубация
10 минут, при 18
о
С.
Колориметрия, λ = 640 нм,
d = 1 cм, против контроля
РЕЗУЛЬТАТ:
Ех =
Расчеты:
зная Ех, найти концентрацию фосфора в пробе по калибровочно-
му графику (А). Конечный результат рассчитать по формуле:
содержание макроэргов в мг АТФ/ г ткани = А 3,3 40.
Найти количество АТФ в 1 г мышечной ткани:
количество АТФ = масса АТФ (в граммах)/молекулярная масса АТФ
ВЫВОД:
Содержание АТФ в мышцах: 5 мкмоль АТФ в 1 г мышечной
ткани в состоянии покоя (молекулярная масса АТФ равна 507,2
г/моль).
Дата________________