ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 06.11.2023
Просмотров: 437
Скачиваний: 3
ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.
СОДЕРЖАНИЕ
рибонуклеиновой кислотой и подвергается обратной транскрипции . ВИЧ поражает клетки крови человека, имеющие на своей поверхности CD4-рецепторы (CD4+ Т-лимфоциты , макрофаги и дендритные клетки ).
После того, как число CD4+ T-лимфоцитов становится ниже 200 в одном микролитре (µl) крови, система клеточного иммунитета перестает защищать организм. Острая инфекция со временем переходит в латентную форму, и ранним симптомом ВИЧ-инфекции и далее СПИД является число CD4+ T-лимфоцитов в крови.
В отсутствие антиретровирусной терапии средняя продолжительность жизни с ВИЧ-инфекцией составляет от девяти до десяти лет, средняя продолжительность жизни на стадии СПИД составляет около девяти месяцев
Скорость развития инфекции зависит от многих факторов, например, от статуса иммунной системы инфицированного. Пожилые люди имеют более слабую иммунную систему и поэтому имеют повышенный риск быстрого развития заболевания, в сравнении с молодыми людьми.
Недостаточный уровень медицинского ухода и наличие сопутствующих инфекционных заболеваний, например, туберкулёза, вызывает предрасположенность к скоротечному развитию заболевания.
В период острой фазы ВИЧ-инфекции отсутствие специфического иммунного ответа позволяет вирусу активно реплицироваться и достигать высоких концентраций в крови . Вирус заселяет органы лимфатической системы , CD4-лимфоциты, CD8-лимфоциты и макрофаги, также ВИЧ инфицирует и другие клетки: альвеолярные макрофаги лёгких, клетки Лангерганса , фолликулярные дендритные клетки лимфатических узлов , клетки олигодендроглии и астроциты мозга, эпителиальные клетки кишки. Основным резервуаром ВИЧ служат лимфатические узлы
Симптомы ВИЧ-инфекции и СПИД являются следствием развивающегося иммунодефицитного состояния. Большинство симптомов вызваны оппортунистическими инфекциями — бактериальными, вирусными, грибковыми или паразитическими инфекциями, которые не развиваются у лиц с полноценной иммунной системой и поражают практически все системы органов. ВИЧ-инфицированные и больные СПИД имеют повышенный уровень онкологических заболеваний, например, саркомы Капоши , ракa шейки матки , а также лимфом . Кроме того, ВИЧ-инфицированные часто имеют системные симптомы инфекций, например, лихорадка , повышенное потоотделение по ночам, опухание желез, озноб , слабость и потеря веса. Разные оппортунистические инфекции развиваются у ВИЧ-инфицированных в зависимости от географического положения больного.
В настоящее время существуют следующие методы диагностики ВИЧ:
1) Косвенные тесты — обнаружение специфических антител к ВИЧ. Обнаруживаются фактически у 100 % ВИЧ-инфицированных.
2) Прямые тесты — сам ВИЧ (в культуре клеток — выполняется только в специализированных лабораториях 3 уровня биологической безопасности), антигены ВИЧ (антиген p24 и др.), и нуклеиновые кислоты ВИЧ-тесты на РНК или ДНК ВИЧ или вирусная нагрузка.
Занятие № 21
тема: Иммунодиагностика инфекционных заболеваний
1 вопрос: Реакции иммунитета.
Реакции иммунитета, или иммунные реакции- это реакции между антигеном и антителом или между антигеном и сенсибилизированными лимфоцитами, которые происходят в живом организме и могут быть воспроизведены в лабораторных условиях.
Реакции иммунитета вошли в практику диагностики инфекционных болезней в конце 19- начале 20века. Реакции иммунитета обладают высокой чувствительностью- то есть улавливают антигены в очень больших разведениях и строгой специфичностью, что позволяет различать близкие по составу антигены. Благодаря этим свойствам реакции иммунитета нашли широкое применение в медицине и биологии.
Реакции антигена с антителом называются серологические (от лат. cerum- сыворотка) или гуморальные (от лат. humor- жидкость), потому что участвующие в них антитела всегда находятся в сыворотке крови.
Реакции антигена с сенсибилизированными лимфоцитами называются
клеточные.
2 вопрос: Серологические реакции.
Серологические реакции- это реакции между антигеном и антителом, протекающие в жидкой среде, которые происходят в живом организме и могут быть воспроизведены в лабораторных условиях.
Серологические реакции протекают в две фазы:
1)Специфическая- образование комплекса антигена и соответствующего ему антитела. Видимых изменений в этой фазе не происходит, но образовавшийся комплекс антиген- антитело становится чувствительным к неспецифическим факторам, находящимся в среде: электролитам, комплементу или фагоцитам. Чаще всего в качестве неспецифического компонента среды используется раствор электролита- физраствор или изотонический раствор, то есть 0,9% раствор натрия хлорида.
2) Неспецифическая- специфический комплекс антиген- антитело взаимодействует с неспецифическими факторами среды. Результат их взаимодействия может быть видимым- выпадение осадка, растворение, склеивание и т.д.
В зависимости от антигена и неспецифического фактора среды серологические реакции делят на группы: реакция агглютинации (РА), реакция гемагглютинации, преципитации, нейтрализации, связывания комплемента, иммунного лизиса и т.д.
Серологические реакции применяют для лабораторной диагностики инфекционных и инвазионных болезней. При этом по известному компоненту- антигену или антителу- определяют неизвестный.
Если от больного получена сыворотка крови, в которой нужно обнаружить антитела, то ставят реакцию серодиагностики. При этом в качестве антигена используют диагностикум.
Диагностикум- это взвесь убитых микробов известного вида.
Если результат реакции серодиагностики положительный, то есть реакция прошла, значит, в крови больного есть антитела против данного возбудителя, первоначальный диагноз верен и данный микроб является возбудителем заболевания у данного больного.
Для получения сыворотки больного кровь берут на 2-й неделе болезни (10-12 день) в количестве 3-5 мл из пальца, вены, мочки уха, у новорожденных- из У-образного разреза на пятке.
Если из организма больного выделен возбудитель, то ставят реакцию идентификации. При этом антиген- выделенный микроб- неизвестен, а в качестве известного антитела используют иммунную сыворотку.
Иммунная сыворотка- это сыворотка, содержащая повышенное количество известных антител.
Если реакция прошла, значит, первоначальная идентификация верна, и возбудитель, против которого направлена иммунная сыворотка, является возбудителем болезни у данного больного.
3 вопрос: Реакция агглютинации (РА).
Реакция агглютинации (РА)_ это склеивание и выпадение в осадок микробов или других клеток под действием антител в присутствии электролита (0,9% раствор натрия хлорида).
Образовавшийся осадок называется агглютинат.
Реакция агглютинации проявляется образованием хлопьев или осадка. Ее используют для определения антител в сыворотке крови больных при бруцеллезе, брюшном тифе, паратифах и других инфекционных болезнях, а также для определения возбудителя, выделенного от больного. Эту же реакцию применяют для определения групп крови и резус- фактора.
Применяются различные варианты реакции агглютинации: развернутая, ориентировочная (на стекле), непрямая, реакция коагглютинации.
Положительный результат развернутой РА- выпадение осадка в виде «зонтика», ориентировочной- появление хлопьев осадка на фоне прозрачной жидкости., непрямой (пассивной) гемагглютинации- появление осадка в виде «зонтика»
Реакция коагглютинации- разновидность РА: клетки возбудителя определяют при помощи стафилококков, предварительно обработанных иммунной диагностической сывороткой. В результате коагглютинации образуются хлопья, состоящие из стафилококков, антител диагностической сыворотки и определяемого микроба.
Компоненты реакции:
1) Антитела (агглютинины)- находятся в сыворотке больного или в имммнной сыворотке.
2) Антигены- взвесь живых или убитых м/о, эритроцитов или других клеток.
3) изотонический раствор.
4 вопрос: Реакция преципитации (РП).
Реакция преципитации (РП)- это выпадение в осадок специфического иммунного комплекса, состоящего из растворимого антигена и специфического антитела в присутствии электролита.
Образующееся в результате реакции мутное кольцо или осадок называется преципитат.
РП применяют для определения антигена при диагностике сибирской язвы, менингита и других инфекций, в судебной медицине и санитарно- гигиенических исследованиях.
Есть два основных метода РП: реакция кольцепреципитации и ПР в агаре.
При реакции кольцепреципитации наслаивают в пробирке растворимый антиген на иммунную сыворотку.
Положительный результат реакции кольцепреципитации- мутное кольцо на границе между антигеном и антителом.
Если реакция преципитации проводится в полужидком геле агара: двойная иммунодиффузия по Оухтерлони, радиальная иммунодиффузия, то положительный результат мутная полоса на границе между антигеном и антителом.
Иммуноэлектрофорез- сочетание метода электрофореза и иммунопреципитации: смесь антигенов разделяется в геле с помощью электрофореза, затем параллельно зонам электрофореза вносят иммунную сыворотку, антитела которой диффундируют в гель и образуют в месте «встречи» с антигеном линии преципитации.
Разновидностью преципитации является реакция флоккуляции (по Рамону)- появление опалесценции или хлопьевидной массы (иммунопреципитации) при реакции токсин- антитоксин или анатоксин- антитоксин. Ее применяют для определения активности анатоксина или антитоксической сыворотки.
Компоненты реакции:
1) Антитела- иммунная сыворотка
2) Антигены- растворенные вещества (полноценные антигены или гаптены)
3) изотонический раствор.
5 вопрос: Реакция нейтрализации.
Антитела иммунной сыворотки способны нейтрализовать повреждающее действие микробов или их токсинов на чувствительные клетки и ткани, что связано с блокадой микробных антигенов антителами, т.е. их нейтрализацией. Реакцию нейтрализации (РН) проводят путем введения смеси антиген- антитело животным или в чувствительные тест- объекты (культуру клеток, эмбрионы). При отсутствии у животных и тест- объектов повреждающего действия м/о или их антигенов и токсинов говорят о нейтрализующем действии иммунной сыворотки и, следовательно, о специфичности взаимодействия комплекса антиген- антитело.
6 вопрос: Реакции с участием комплемента.
Реакции с участием комплемента основаны на активации комплемента комплексом антиген- антитело.
К реакциям с участием комплемента относятся: реакция связывания комплемента (РСК), радиального гемолиза, иммунного прилипания.
Реакция связывания комплемента (РСК)
Эту реакцию часто применяют при диагностике инфекций, вызванных спирохетами, риккетсиями и вирусами.
Компоненты реакции:
1) Основная система- антиген, антитело, комплемент.
2) Индикаторная система- эритроциты барана, гемолитическая сыворотка.
Если антиген и антитело подходят друг другу, то образуется комплекс антиген- антитело, который связывает комплемент. Если же антиген и антитело не подходят друг другу, то комплемент остается свободным и связывается с гемолитической сывороткой, вызывая гемолиз эритроцитов.
После того, как число CD4+ T-лимфоцитов становится ниже 200 в одном микролитре (µl) крови, система клеточного иммунитета перестает защищать организм. Острая инфекция со временем переходит в латентную форму, и ранним симптомом ВИЧ-инфекции и далее СПИД является число CD4+ T-лимфоцитов в крови.
В отсутствие антиретровирусной терапии средняя продолжительность жизни с ВИЧ-инфекцией составляет от девяти до десяти лет, средняя продолжительность жизни на стадии СПИД составляет около девяти месяцев
Скорость развития инфекции зависит от многих факторов, например, от статуса иммунной системы инфицированного. Пожилые люди имеют более слабую иммунную систему и поэтому имеют повышенный риск быстрого развития заболевания, в сравнении с молодыми людьми.
Недостаточный уровень медицинского ухода и наличие сопутствующих инфекционных заболеваний, например, туберкулёза, вызывает предрасположенность к скоротечному развитию заболевания.
В период острой фазы ВИЧ-инфекции отсутствие специфического иммунного ответа позволяет вирусу активно реплицироваться и достигать высоких концентраций в крови . Вирус заселяет органы лимфатической системы , CD4-лимфоциты, CD8-лимфоциты и макрофаги, также ВИЧ инфицирует и другие клетки: альвеолярные макрофаги лёгких, клетки Лангерганса , фолликулярные дендритные клетки лимфатических узлов , клетки олигодендроглии и астроциты мозга, эпителиальные клетки кишки. Основным резервуаром ВИЧ служат лимфатические узлы
Симптомы
Симптомы ВИЧ-инфекции и СПИД являются следствием развивающегося иммунодефицитного состояния. Большинство симптомов вызваны оппортунистическими инфекциями — бактериальными, вирусными, грибковыми или паразитическими инфекциями, которые не развиваются у лиц с полноценной иммунной системой и поражают практически все системы органов. ВИЧ-инфицированные и больные СПИД имеют повышенный уровень онкологических заболеваний, например, саркомы Капоши , ракa шейки матки , а также лимфом . Кроме того, ВИЧ-инфицированные часто имеют системные симптомы инфекций, например, лихорадка , повышенное потоотделение по ночам, опухание желез, озноб , слабость и потеря веса. Разные оппортунистические инфекции развиваются у ВИЧ-инфицированных в зависимости от географического положения больного.
Диагноз ВИЧ-инфекции
В настоящее время существуют следующие методы диагностики ВИЧ:
1) Косвенные тесты — обнаружение специфических антител к ВИЧ. Обнаруживаются фактически у 100 % ВИЧ-инфицированных.
2) Прямые тесты — сам ВИЧ (в культуре клеток — выполняется только в специализированных лабораториях 3 уровня биологической безопасности), антигены ВИЧ (антиген p24 и др.), и нуклеиновые кислоты ВИЧ-тесты на РНК или ДНК ВИЧ или вирусная нагрузка.
Занятие № 21
тема: Иммунодиагностика инфекционных заболеваний
1 вопрос: Реакции иммунитета.
Реакции иммунитета, или иммунные реакции- это реакции между антигеном и антителом или между антигеном и сенсибилизированными лимфоцитами, которые происходят в живом организме и могут быть воспроизведены в лабораторных условиях.
Реакции иммунитета вошли в практику диагностики инфекционных болезней в конце 19- начале 20века. Реакции иммунитета обладают высокой чувствительностью- то есть улавливают антигены в очень больших разведениях и строгой специфичностью, что позволяет различать близкие по составу антигены. Благодаря этим свойствам реакции иммунитета нашли широкое применение в медицине и биологии.
Реакции антигена с антителом называются серологические (от лат. cerum- сыворотка) или гуморальные (от лат. humor- жидкость), потому что участвующие в них антитела всегда находятся в сыворотке крови.
Реакции антигена с сенсибилизированными лимфоцитами называются
клеточные.
2 вопрос: Серологические реакции.
Серологические реакции- это реакции между антигеном и антителом, протекающие в жидкой среде, которые происходят в живом организме и могут быть воспроизведены в лабораторных условиях.
Серологические реакции протекают в две фазы:
1)Специфическая- образование комплекса антигена и соответствующего ему антитела. Видимых изменений в этой фазе не происходит, но образовавшийся комплекс антиген- антитело становится чувствительным к неспецифическим факторам, находящимся в среде: электролитам, комплементу или фагоцитам. Чаще всего в качестве неспецифического компонента среды используется раствор электролита- физраствор или изотонический раствор, то есть 0,9% раствор натрия хлорида.
2) Неспецифическая- специфический комплекс антиген- антитело взаимодействует с неспецифическими факторами среды. Результат их взаимодействия может быть видимым- выпадение осадка, растворение, склеивание и т.д.
В зависимости от антигена и неспецифического фактора среды серологические реакции делят на группы: реакция агглютинации (РА), реакция гемагглютинации, преципитации, нейтрализации, связывания комплемента, иммунного лизиса и т.д.
Серологические реакции применяют для лабораторной диагностики инфекционных и инвазионных болезней. При этом по известному компоненту- антигену или антителу- определяют неизвестный.
Если от больного получена сыворотка крови, в которой нужно обнаружить антитела, то ставят реакцию серодиагностики. При этом в качестве антигена используют диагностикум.
Диагностикум- это взвесь убитых микробов известного вида.
Если результат реакции серодиагностики положительный, то есть реакция прошла, значит, в крови больного есть антитела против данного возбудителя, первоначальный диагноз верен и данный микроб является возбудителем заболевания у данного больного.
Для получения сыворотки больного кровь берут на 2-й неделе болезни (10-12 день) в количестве 3-5 мл из пальца, вены, мочки уха, у новорожденных- из У-образного разреза на пятке.
Если из организма больного выделен возбудитель, то ставят реакцию идентификации. При этом антиген- выделенный микроб- неизвестен, а в качестве известного антитела используют иммунную сыворотку.
Иммунная сыворотка- это сыворотка, содержащая повышенное количество известных антител.
Если реакция прошла, значит, первоначальная идентификация верна, и возбудитель, против которого направлена иммунная сыворотка, является возбудителем болезни у данного больного.
3 вопрос: Реакция агглютинации (РА).
Реакция агглютинации (РА)_ это склеивание и выпадение в осадок микробов или других клеток под действием антител в присутствии электролита (0,9% раствор натрия хлорида).
Образовавшийся осадок называется агглютинат.
Реакция агглютинации проявляется образованием хлопьев или осадка. Ее используют для определения антител в сыворотке крови больных при бруцеллезе, брюшном тифе, паратифах и других инфекционных болезнях, а также для определения возбудителя, выделенного от больного. Эту же реакцию применяют для определения групп крови и резус- фактора.
Применяются различные варианты реакции агглютинации: развернутая, ориентировочная (на стекле), непрямая, реакция коагглютинации.
Положительный результат развернутой РА- выпадение осадка в виде «зонтика», ориентировочной- появление хлопьев осадка на фоне прозрачной жидкости., непрямой (пассивной) гемагглютинации- появление осадка в виде «зонтика»
Реакция коагглютинации- разновидность РА: клетки возбудителя определяют при помощи стафилококков, предварительно обработанных иммунной диагностической сывороткой. В результате коагглютинации образуются хлопья, состоящие из стафилококков, антител диагностической сыворотки и определяемого микроба.
Компоненты реакции:
1) Антитела (агглютинины)- находятся в сыворотке больного или в имммнной сыворотке.
2) Антигены- взвесь живых или убитых м/о, эритроцитов или других клеток.
3) изотонический раствор.
4 вопрос: Реакция преципитации (РП).
Реакция преципитации (РП)- это выпадение в осадок специфического иммунного комплекса, состоящего из растворимого антигена и специфического антитела в присутствии электролита.
Образующееся в результате реакции мутное кольцо или осадок называется преципитат.
РП применяют для определения антигена при диагностике сибирской язвы, менингита и других инфекций, в судебной медицине и санитарно- гигиенических исследованиях.
Есть два основных метода РП: реакция кольцепреципитации и ПР в агаре.
При реакции кольцепреципитации наслаивают в пробирке растворимый антиген на иммунную сыворотку.
Положительный результат реакции кольцепреципитации- мутное кольцо на границе между антигеном и антителом.
Если реакция преципитации проводится в полужидком геле агара: двойная иммунодиффузия по Оухтерлони, радиальная иммунодиффузия, то положительный результат мутная полоса на границе между антигеном и антителом.
Иммуноэлектрофорез- сочетание метода электрофореза и иммунопреципитации: смесь антигенов разделяется в геле с помощью электрофореза, затем параллельно зонам электрофореза вносят иммунную сыворотку, антитела которой диффундируют в гель и образуют в месте «встречи» с антигеном линии преципитации.
Разновидностью преципитации является реакция флоккуляции (по Рамону)- появление опалесценции или хлопьевидной массы (иммунопреципитации) при реакции токсин- антитоксин или анатоксин- антитоксин. Ее применяют для определения активности анатоксина или антитоксической сыворотки.
Компоненты реакции:
1) Антитела- иммунная сыворотка
2) Антигены- растворенные вещества (полноценные антигены или гаптены)
3) изотонический раствор.
5 вопрос: Реакция нейтрализации.
Антитела иммунной сыворотки способны нейтрализовать повреждающее действие микробов или их токсинов на чувствительные клетки и ткани, что связано с блокадой микробных антигенов антителами, т.е. их нейтрализацией. Реакцию нейтрализации (РН) проводят путем введения смеси антиген- антитело животным или в чувствительные тест- объекты (культуру клеток, эмбрионы). При отсутствии у животных и тест- объектов повреждающего действия м/о или их антигенов и токсинов говорят о нейтрализующем действии иммунной сыворотки и, следовательно, о специфичности взаимодействия комплекса антиген- антитело.
6 вопрос: Реакции с участием комплемента.
Реакции с участием комплемента основаны на активации комплемента комплексом антиген- антитело.
К реакциям с участием комплемента относятся: реакция связывания комплемента (РСК), радиального гемолиза, иммунного прилипания.
Реакция связывания комплемента (РСК)
Эту реакцию часто применяют при диагностике инфекций, вызванных спирохетами, риккетсиями и вирусами.
Компоненты реакции:
1) Основная система- антиген, антитело, комплемент.
2) Индикаторная система- эритроциты барана, гемолитическая сыворотка.
Если антиген и антитело подходят друг другу, то образуется комплекс антиген- антитело, который связывает комплемент. Если же антиген и антитело не подходят друг другу, то комплемент остается свободным и связывается с гемолитической сывороткой, вызывая гемолиз эритроцитов.