ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 08.09.2021
Просмотров: 7166
Скачиваний: 267
Биохимические и молекулярно-биологические исследования. Исследуемый материал, полученный из очага инфекции, используют для обнаружения ДНК возбудителя с помощью ПЦР. В случае обнаружения соответствующих молекул можно поставить предварительный диагноз.
Серодиагностика. Основана на определении антител к хла-мидиям в сыворотке крови методами ИФА, РСК, РИГА. В качестве антигенов используют родоспецифические антигены (ЛПС), полученные из хламидий, диагностический титр 1:64. ИФА применяют так же, как дополнительный серологический метод при дифференциальной диагностике урогенитальных инфекций, вызванных хламидиями и микоплазмами.
• Микробиологическая диагностика микоплазмоза и уреаплазмоза
МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: выделения и мазки со слизистой оболочки мочеиспускательного канала, сперма, выделения из шейки матки, осадок мочи.
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:
Бактериологическое исследование. Проводят путем посева исследуемого материала на богатые элективные питательные среды сложного состава, содержащие нативные добавки (экстракт из плаценты, триптический перевар бычьего сердца, сыворотку и т.д.). Для посева исследуемого материала используют плотные, полужидкие и жидкие среды. В последнем случае в среду добавляют индикатор для контроля роста, поскольку накопление микоплазм не сопровождается выраженным помутнением. С целью подавления роста других бактерий добавляют антибиотики группы пенициллина (пенициллин 100 ЕД/мл и др.), не активные в отношении микоплазм. Посевы инкубируют при 37 "С в течение 48 ч. На плотных средах микоплазмы образуют микроколонии в виде яичницы-глазуньи с врастающим в среду центром и полупрозрачной периферией, которые обнаруживают путем микроскопии посевов при малом увеличении (объектив 8х). Идентификацию выделенной культуры возбудителя проводят по биохимическим (ферментация углеводов, разложение аргинина) и антигенным свойствам в реакции ингибирования роста культуры специфической сывороткой и нейтрализации метаболизма аргинина той же сывороткой. M.hominis в отличие от других видов микоплазм не ферментирует углеводы и разлагает аргинин. Уреаплазмы вызывают гидролиз мочевины.
Экспресс-методы диагностики: иммунохимические, биохимические и молекулярно-биологические исследования. Иммунохимические исследования. Антигены возбудителя могут быть обнаружены непосредственно в материале от больного в реакциях ИФА.
Биохимические и молекулярно-биологические исследования. Исследуемый материал, полученный из очага инфекции, используют для обнаружения ДНК возбудителя с помощью ПЦР. В случае обнаружения соответствующих молекул можно поставить предварительный диагноз.
Серодиагностика. Основана на определении антител к ми-коплазмам и уреаплазмам в сыворотке крови методами ИФА. Используется также как дополнительный серологический метод при дифференциальной диагностике урогенитальных инфекций, вызванных хламидиями и микоплазмами.
• Диагностические и лечебные препараты
Гонококковая вакцина. Взвесь N. gonorrhoeae, убитых нагреванием. Используют для вакцинотерапии хронической гонореи, а также для "провокации" при диагностике этого заболевания.
Флюоресцирующие антитела для диагностики урогениталь-ного хламидиоза методом ИФ.
Тест-системы для серодиагностики негонококковых уретритов методом ИФА.
Антибиотики: пенициллины, цефалоспорины (цефтриаксон), спектиномицин, тетрациклины, макролиды природные и полусинтетические, фторхинолоны.
Глава 16
ВОЗБУДИТЕЛИ ЗООАНТРОПОНОЗНЫХ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ
К зооантропонозным инфекциям относятся заболевания, источником которых являются животные (млекопитающие и птицы) — больные и бактерионосители. Возбудители этих заболеваний принадлежат к разным порядкам, семействам и родам бактерий. Пути и способы передачи этих инфекций от животных людям также различны (табл. 16.1).
Возбудитель Заболе- Свой- Источник Пути заражения вание ства инфекции человека Brucella Бруцел- Гр— , Крупный и мел- Алиментарный, melitensis, лез А кий рогатый скот, контактный, Brucella abor- свиньи аэрогенный tus, Brucella suis Francisella Туляре- Гр-, Грызуны: мыши- Алиментарный, tularensis мия А полевки, водяные контактный, крысы, домашние трансмиссивный, мыши, зайцы аэрогенный Yersinia pestis Чума Гр~, Грызуны многих Трансмиссивный А видов, человек (блохи), контактный, алиментарный, воздушно-капельный Yersinia Псевдо- Гр— , Грызуны, человек Алиментарный pseudotu- тубер- А berculosis кулез Yersinia Кишеч- Гр-, Зайцы, кролики, » enterocolitica ный А собаки, человек иереи- ; ниоз Bacillus Сибир- Гр+, Овцы, козы, Контактный, anthracis екая А крупный рогатый аэрогенный, язва скот и др. трансмиссивный (слепни) Burkholderia Гр— , Лошади Контактный mallei A Pasteurella Пастер- Гр-, Кошки, собаки При укусе multocida релез А Leptospira Лепто- Гр-, Грызуны, парно- Алиментарный, interrogans спироз А копытные контактный Listeria mono- Листе- Гр+, Грызуны, коро- Алиментарный, cytogenes риоз А вы, лошади, соба- контактный, ки, кошки аэрогенный Chlamydophi- Пнев- Гр- Птицы Аэрогенный la psittaci мония Coxiella Пнев- Гр— Собаки, кошки, » burnetii мония другие млекопитающие Spirillum Содоку Гр— Кр*ысы При укусе minus Streptobacil- Лихо- Гр-, » То же 1ш monilifor- радка от А mis укуса крысы |
Возбудитель Заболе- Свой- Источник Пути заражения вание ства инфекции человека Erysipelothrix Эризи- Гр-, Свиньи и другие Контактный rhusiopathiae пелоид А виды домашних и диких животных Bartonella Болезнь Гр— Кошки Укус или царапи-henselae коша- на чьей царапины |
бораторной диагностики сибирской язвы является бактериологический (выделение из исследуемого материала культуры возбудителя). Диагностическую ценность представляет также кож-но-аллергическая проба.
Возбудители лептоспироза относятся к порядку Spirocha-etales роду Leptospira. Патогенные лептоспиры относятся к виду L.interrogans, включающему более 160 сероваров, объединенных в несколько групп. Чаще всего заболевания у человека вызывают L.interrogans серогруппы icterohaemorrhagica — возбудитель желтушного лептоспироза (болезнь Васильева—Вейля) и L.interrogans серогруппы grippotyphosa — возбудитель безжелтушного лептоспироза (водная лихорадка).
Тема 16.1. ВОЗБУДИТЕЛИ ЧУМЫ, ТУЛЯРЕМИИ, БРУЦЕЛЛЕЗА, СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ, ЛЕПТОСПИРОЗА И ДРУГИХ ЗООНОЗНЫХ ИНФЕКЦИЙ
План
Программа
Биологические свойства возбудителей зооантропонозных инфекций, их патогенность, экология, особенность инфекций и эпидемиология вызываемых заболеваний.
Микробиологическая диагностика чумы, туляремии, бруцеллеза, сибирской язвы, лептоспироза.
Особенности лабораторной работы с возбудителями ООН.
Диагностические, профилактические и лечебные препараты.
Демонстрация
Мазки из чистых культур: Bwcella abortus, Bacillus апthracis, Francisella tularensis (окраска по методу Грама).
Yersinia pestis в гное из бубона (окраска метиленовым синим).
Культура лептоспиры в темном поле.
Рост B.anthracoides на питательной среде.
Реакция агглютинации Райта для серодиагностики бруцеллеза.
Реакция агглютинации для серодиагностики туляремии.
Диагностические, профилактические и лечебные препараты.
а Задание студентам
Микроскопировать и зарисовать препараты возбудителей зоонозных инфекций.
Учесть результаты реакции агглютинации Райта для серодиагностики бруцеллеза.
Проанализировать результаты РИГА для серодиагностики бруцеллеза.
Оценить результаты реакции агглютинации с парными сыворотками больного для серодиагностики туляремии.
Оценить результаты реакции термокольцепреципитации по Асколи с исследуемым материалом (термоэкстракт из шкуры животного).
Отметить результаты реакции агглютинации-лизисалептоспир для серодиагностики лептоспироза и сделать заключение.
Ознакомиться с диагностическими, профилактическими и лечебными препаратами.
а Методические указания
• Микробиологическая диагностика чумы
МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: гной из бубонов, пунктат лимфатических узлов, мокрота, промывные воды желудка, кровь, патолого-анатомический материал.
МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:
Бактериоскопическое исследование (схема 16.1.1). Из исследуемого материала готовят мазки, окрашивают по методу Грама и водным раствором метиленового синего. Y.pestis представляют собой грамотрицательные палочки овоидной формы (0,5x1,7 мкм). В мазках, окрашенных метиленовым синим, хорошо заметно биполярное распределение краски (рис. 16.1.1; на вклейке). Встречаются полиморфные клетки.
Бактериологическое исследование. Исследуемый материал засевают на чашки с питательным агаром. Посевы инкубируют при 25—28 °С. Первичное изучение посевов производят через 10—12 ч. К этому сроку появляются колонии в виде батистового платочка, которые образованы вирулентными R-формами. Мало- и авирулентные бактерии формируют S-формы колоний. Идентификацию чистой культуры проводят по морфологии бактериальных клеток, характеру роста, антигенным и биохимическим свойствам, чувствительности к специфическому фагу и с помощью молекулярно-биологических методов. Иногда также используют биопробу.
На бульоне Y.pestis образуют пленку со спускающимися нитями, напоминающими сталактиты; ферментируют многие сахара до кислоты, индола не образуют, желатин не разжижают. Y.pestis содержат групповой термостабильный соматический антиген и специфический термолабильный капсульный антиген, который обнаруживается только у вирулентных штаммов. В случае исследования материала, взятого у погибших грызунов, проводят дифференциальную диагностику с возбудителями псевдотуберкулеза (Yersinia pseudotuberculosis) на основании