Биохимические и молекулярно-биологические исследования. Исследуемый материал, полученный из очага инфекции, используют для обнаружения ДНК возбудителя с помощью ПЦР. В случае обнаружения соответствующих моле­кул можно поставить предварительный диагноз.

Серодиагностика. Основана на определении антител к хла-мидиям в сыворотке крови методами ИФА, РСК, РИГА. В ка­честве антигенов используют родоспецифические антигены (ЛПС), полученные из хламидий, диагностический титр 1:64. ИФА применяют так же, как дополнительный серологический метод при дифференциальной диагностике урогенитальных ин­фекций, вызванных хламидиями и микоплазмами.

• Микробиологическая диагностика микоплазмоза и уреаплазмоза

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: выделения и мазки со слизистой оболочки мочеиспускательного канала, сперма, выделения из шейки матки, осадок мочи.

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:

Бактериологическое исследование. Проводят путем посева исследуемого материала на богатые элективные питательные среды сложного состава, содержащие нативные добавки (экстракт из плаценты, триптический перевар бычьего сердца, сыворотку и т.д.). Для посева исследуемого материала исполь­зуют плотные, полужидкие и жидкие среды. В последнем слу­чае в среду добавляют индикатор для контроля роста, посколь­ку накопление микоплазм не сопровождается выраженным по­мутнением. С целью подавления роста других бактерий добав­ляют антибиотики группы пенициллина (пенициллин 100 ЕД/мл и др.), не активные в отношении микоплазм. Посевы инкуби­руют при 37 "С в течение 48 ч. На плотных средах микоплазмы образуют микроколонии в виде яичницы-глазуньи с врастаю­щим в среду центром и полупрозрачной периферией, которые обнаруживают путем микроскопии посевов при малом увели­чении (объектив 8х). Идентификацию выделенной культуры возбудителя проводят по биохимическим (ферментация угле­водов, разложение аргинина) и антигенным свойствам в реакции ингибирования роста культуры специфической сыворот­кой и нейтрализации метаболизма аргинина той же сыворот­кой. M.hominis в отличие от других видов микоплазм не фер­ментирует углеводы и разлагает аргинин. Уреаплазмы вызыва­ют гидролиз мочевины.

Экспресс-методы диагностики: иммунохимические, биохими­ческие и молекулярно-биологические исследования. Иммуно­химические исследования. Антигены возбудителя могут быть обнаружены непосредственно в материале от больного в реакциях ИФА.

Биохимические и молекулярно-биологические исследования. Исследуемый материал, полученный из очага инфекции, используют для обнаружения ДНК возбудителя с помощью ПЦР. В случае обнаружения соответствующих моле­кул можно поставить предварительный диагноз.

Серодиагностика. Основана на определении антител к ми-коплазмам и уреаплазмам в сыворотке крови методами ИФА. Используется также как дополнительный серологический ме­тод при дифференциальной диагностике урогенитальных ин­фекций, вызванных хламидиями и микоплазмами.

---

• Диагностические и лечебные препараты

Гонококковая вакцина. Взвесь N. gonorrhoeae, убитых нагре­ванием. Используют для вакцинотерапии хронической гоно­реи, а также для "провокации" при диагностике этого заболе­вания.

Флюоресцирующие антитела для диагностики урогениталь-ного хламидиоза методом ИФ.

Тест-системы для серодиагностики негонококковых уретри­тов методом ИФА.

Антибиотики: пенициллины, цефалоспорины (цефтриаксон), спектиномицин, тетрациклины, макролиды природные и полу­синтетические, фторхинолоны.

---

Возбудитель Заболе- Свой- Источник Пути заражения вание ства инфекции человека Brucella Бруцел- Гр— , Крупный и мел- Алиментарный, melitensis, лез А кий рогатый скот, контактный, Brucella abor- свиньи аэрогенный tus, Brucella suis Francisella Туляре- Гр-, Грызуны: мыши- Алиментарный, tularensis мия А полевки, водяные контактный, крысы, домашние трансмиссивный, мыши, зайцы аэрогенный Yersinia pestis Чума Гр~, Грызуны многих Трансмиссивный А видов, человек (блохи), контакт­ный, алиментар­ный, воздушно-капельный Yersinia Псевдо- Гр— , Грызуны, человек Алиментарный pseudotu- тубер- А berculosis кулез Yersinia Кишеч- Гр-, Зайцы, кролики, » enterocolitica ный А собаки, человек иереи- ; ниоз Bacillus Сибир- Гр+, Овцы, козы, Контактный, anthracis екая А крупный рогатый аэрогенный, язва скот и др. трансмиссивный (слепни) Burkholderia Гр— , Лошади Контактный mallei A Pasteurella Пастер- Гр-, Кошки, собаки При укусе multocida релез А Leptospira Лепто- Гр-, Грызуны, парно- Алиментарный, interrogans спироз А копытные контактный Listeria mono- Листе- Гр+, Грызуны, коро- Алиментарный, cytogenes риоз А вы, лошади, соба- контактный, ки, кошки аэрогенный Chlamydophi- Пнев- Гр- Птицы Аэрогенный la psittaci мония Coxiella Пнев- Гр— Собаки, кошки, » burnetii мония другие млекопи­тающие Spirillum Содоку Гр— Кр*ысы При укусе minus Streptobacil- Лихо- Гр-, » То же 1ш monilifor- радка от А mis укуса крысы

---

Возбудитель Заболе- Свой- Источник Пути заражения вание ства инфекции человека Erysipelothrix Эризи- Гр-, Свиньи и другие Контактный rhusiopathiae пелоид А виды домашних и диких животных Bartonella Болезнь Гр— Кошки Укус или царапи-henselae коша- на чьей ца­рапины

бораторной диагностики сибирской язвы является бактериоло­гический (выделение из исследуемого материала культуры воз­будителя). Диагностическую ценность представляет также кож-но-аллергическая проба.

Возбудители лептоспироза относятся к порядку Spirocha-etales роду Leptospira. Патогенные лептоспиры относятся к виду L.interrogans, включающему более 160 сероваров, объединенных в несколько групп. Чаще всего заболевания у человека вызы­вают L.interrogans серогруппы icterohaemorrhagica — возбудитель желтушного лептоспироза (болезнь Васильева—Вейля) и L.in­terrogans серогруппы grippotyphosa — возбудитель безжелтушно­го лептоспироза (водная лихорадка).

Тема 16.1. ВОЗБУДИТЕЛИ ЧУМЫ, ТУЛЯРЕМИИ, БРУЦЕЛЛЕЗА, СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ, ЛЕПТОСПИРОЗА И ДРУГИХ ЗООНОЗНЫХ ИНФЕКЦИЙ

План

Программа

Биологические свойства возбудителей зооантропонозных инфекций, их патогенность, экология, особенность инфекций и эпидемиология вызываемых заболеваний.

Микробиологическая диагностика чумы, туляремии, бруцеллеза, сибирской язвы, лептоспироза.

Особенности лабораторной работы с возбудителями ООН.

Диагностические, профилактические и лечебные пре­параты.

Демонстрация

Мазки из чистых культур: Bwcella abortus, Bacillus апthracis, Francisella tularensis (окраска по методу Грама).

Yersinia pestis в гное из бубона (окраска метиленовым синим).

Культура лептоспиры в темном поле.

Рост B.anthracoides на питательной среде.

Реакция агглютинации Райта для серодиагностики бруцеллеза.

Реакция агглютинации для серодиагностики туляремии.

Диагностические, профилактические и лечебные пре­параты.

а Задание студентам

Микроскопировать и зарисовать препараты возбудителей зоонозных инфекций.

Учесть результаты реакции агглютинации Райта для серодиагностики бруцеллеза.

Проанализировать результаты РИГА для серодиагнос­тики бруцеллеза.

Оценить результаты реакции агглютинации с парными сыворотками больного для серодиагностики туляремии.

Оценить результаты реакции термокольцепреципитации по Асколи с исследуемым материалом (термоэк­стракт из шкуры животного).

Отметить результаты реакции агглютинации-лизисалептоспир для серодиагностики лептоспироза и сде­лать заключение.

Ознакомиться с диагностическими, профилактичес­кими и лечебными препаратами.

а Методические указания

• Микробиологическая диагностика чумы

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: гной из бубонов, пунктат лимфатических узлов, мокрота, промывные воды же­лудка, кровь, патолого-анатомический материал.

---

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:

Бактериоскопическое исследование (схема 16.1.1). Из ис­следуемого материала готовят мазки, окрашивают по методу Грама и водным раствором метиленового синего. Y.pestis пред­ставляют собой грамотрицательные палочки овоидной формы (0,5x1,7 мкм). В мазках, окрашенных метиленовым синим, хорошо заметно биполярное распределение краски (рис. 16.1.1; на вклейке). Встречаются полиморфные клетки.

Бактериологическое исследование. Исследуемый материал за­севают на чашки с питательным агаром. Посевы инкубируют при 25—28 °С. Первичное изучение посевов производят через 10—12 ч. К этому сроку появляются колонии в виде батисто­вого платочка, которые образованы вирулентными R-формами. Мало- и авирулентные бактерии формируют S-формы коло­ний. Идентификацию чистой культуры проводят по морфоло­гии бактериальных клеток, характеру роста, антигенным и био­химическим свойствам, чувствительности к специфическому фагу и с помощью молекулярно-биологических методов. Иног­да также используют биопробу.

На бульоне Y.pestis образуют пленку со спускающимися ни­тями, напоминающими сталактиты; ферментируют многие са­хара до кислоты, индола не образуют, желатин не разжижают. Y.pestis содержат групповой термостабильный соматический антиген и специфический термолабильный капсульный анти­ген, который обнаруживается только у вирулентных штаммов. В случае исследования материала, взятого у погибших грызу­нов, проводят дифференциальную диагностику с возбудителя­ми псевдотуберкулеза (Yersinia pseudotuberculosis) на основании

---

Смотрите также файлы

• ГИПЕРТЕНЗИЯ, Эклампсия.doc

• ДИВ.doc

• ВЗРП.doc

• Внутриутробная задержка развития плода.doc

• Антенатальный 20уход_24Nov[1].doc