Файл: Тец руководство.doc

ВУЗ: Не указан

Категория: Не указан

Дисциплина: Не указана

Добавлен: 08.09.2021

Просмотров: 7162

Скачиваний: 267

ВНИМАНИЕ! Если данный файл нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам.



чение месяца. При заболевании или гибели животного готовят препараты из крови, мочи, материала, полученного после вскрытия, микроскопируют их в темном поле и делают посевы для выделения чистой культуры лептоспир.

Экспресс-методы диагностики. Биохимические и моле-кулярно-биологические исследования. Исследуемый материал, полученный из очага инфекции, используют для обнаружения ДНК возбудителя с помощью ПЦР. В случае обнаружения соответствующих молекул можно поставить пред­варительный диагноз.

Серодиагностика. Антитела в крови пациентов удается обна­ружить с конца 1-й недели болезни. Для их выявления исполь­зуют реакцию агглютинации-лизиса с живыми эталонными куль­турами лептоспир разных серогрупп и сероваров. Учет резуль­татов реакции проводят методом термопольной микроскопии в препаратах "раздавленная" капля в темном поле. В положи­тельном случае отмечают агглютинацию и лизис лептоспир. При этом в первых разведениях сыворотки наблюдаются пол­ное растворение лептоспир, частичный лизис или зернистое набухание, в последующих разведениях — агглютинация леп­тоспир и появление агломератов в виде паучков. Диагностичес­кий титр реакции 1:100. Максимальный титр антител (1:1000— 1:10 000 и выше) наблюдается на 15—30-й день заболевания. Ввиду того что у части переболевших антитела в высоких титрах сохраняются в течение многих лет, диагностическое значение имеет нарастание титра антител в парных сыворотках.

Микробиологическая диагностика сапа

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: гной из язвенных поражений, абсцессов, отделяемое из носа.

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:

Бактериоскопическое исследование. Из исследуемого мате­риала готовят мазки и окрашивают по методу Грама. В мазках обнаруживаются мелкие (2—4 х 0,5—1 мкм) грамотрицатель-ные палочки. Метод имеет ориентировочное значение.

Бактериологическое исследование. Burkholderia mallei культи­вируют на простых питательных средах. Они образуют мелкие гладкие колонии, имеющие кремовую окраску, которые появ­ляются на 2—3-й день. Чистую культуру возбудителя иденти­фицируют по морфологии микробных клеток, подвижности (В.mallei неподвижны), тинкториальным, культуральным и биохимическим признакам.

Экспресс-методы диагностики. Биохимические и моле-кулярно-биологические исследования. Исследуемый материал, полученный из очага инфекции, используют для обнаружения ДНК возбудителя с помощью ПЦР. В случае обнаружения соответствующих молекул можно поставить пред­варительный диагноз.

Серодиагностика. Для обнаружения антител к возбудителю используют реакции агглютинации, РИГА, РСК.

Кожно-аллергическая проба. Диагностическое значение име­ет постановка кожно-аллергической пробы с маллеином (ал­лергеном, приготовленным из В.mallei).

Микробиологическая диагностика листериозов


МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: кровь, смывы из зева, спинномозговая жидкость, околоплодные воды, плацента.

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:

Бактериоскопическое исследование. В мазках из исследуемо­го материала, окрашенных по методу Грама, обнаруживаются мелкие короткие (0,5—2x0,4—0,5 мкм) грамположительные па­лочки. Метод имеет ориентировочное значение.

Бактериологическое исследование. Исследуемый материал за­севают на богатые питательные среды (кровяной агар, сердеч­но-мозговой бульон и др.), применяют также селективные сре­ды с высоким содержанием NaCl, антибиотиками (полимик-син, цефтазидим) и другими селектирующими агентами. По­севы инкубируют 5—7 дней при 35 "С. На кровяном агаре характерен р-гемолиз. Идентификацию осуществляют по мор­фологии микробных клеток, культуральным и биохимическим признакам. Для видовой и внутривидовой идентификации осу­ществляют серотипирование (по жгутиковому антигену и со­матическому антигену клеточной стенки) и фаготипирование.

Экспресс-методы диагностики: иммунохимические, биохими­ческие и молекулярно-биологические исследования. Иммуно­химические исследования. Для быстрого обнаружения антигенов возбудителя в мазках из исследуемого материала используют метод прямой ИФ.

Биохимические и молекулярно-биологические исследования. Исследуемый материал, полученный из очага инфекции, используют для обнаружения ДНК возбудителя с помощью ПЦР. В случае обнаружения соответствующих моле­кул можно поставить предварительный диагноз.

Серодиагностика мало информативна и практически не при­меняется.

Микробиологическая диагностика инфекций, вызванных Streptobacillus moniliformis

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: кровь, суставная жидкость.

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:

Бактериоскопическое исследование. В мазках из суставной жидкости, окрашенных по методу Грама, можно обнаружить грамотрицательные палочки, располагающиеся в виде цепочек, образующих длинные неветвящиеся нити. Метод имеет ориен­тировочное значение.

Бактериологическое исследование. Исследуемый материал за­севают на богатые питательные среды с высоким содержанием (не менее 10 %) нативных добавок (кровь, сыворотка или ас-цитическая жидкость). Посевы инкубируют при 35 °С в атмо­сфере с повышенным содержанием СС^. Бактерии образуют мелкие гладкие блестящие колонии. Идентификацию осущест­вляют по морфологии и тинкториальным свойствам (грамот­рицательные палочки располагаются в виде цепочек, образую­щих неветвящиеся нити длиной до 100—150 мкм), культураль-ным и биохимическим признакам. Важным методом иденти­фикации является ГЖХ.

Экспресс-методы диагностики. Биохимические и моле-кулярно-биологические исследования. Исследуемый ма­териал, полученный из очага инфекции, используют для обна­ружения ДНК возбудителя с помощью ПЦР. В случае обнару­жения соответствующих молекул можно поставить предвари­тельный диагноз.


Серодиагностика. Для обнаружения антител к возбудителю используют реакцию агглютинации с парными сыворотками пациента. Диагностическим считается титр реакции 1:80 и на­растание титра антител не менее чем в 4 раза.

Микробиологическая диагностика инфекций, вызванных Spirillum minus

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: кровь, экссудат из очага инфекции, пунктат лимфатических узлов.

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:

Бактериоскопическое исследование. Является ведущим мето­дом диагностики. Возбудителя в нативных препаратах из ис­следуемого материала обнаруживают с помощью темнопольной микроскопии. Бактерии 3—5 мкм длиной и 0,2—0,5 мкм тол­щиной, подвижны, имеют извитую форму (2—6 завитков).

Бактериологическое исследование. Не проводится, поскольку Spirillum minus не удается культивировать in vitro.

Экспресс-методы диагностики. Биохимические и моле-кулярно-биологические исследования. Исследуемый материал, полученный из очага инфекции, используют для обнаружения ДНК возбудителя с помощью ПЦР. В случае обнаружения соответствующих молекул можно поставить предварительный диагноз.

Биопроба. Материал от больного вводят внутрибрюшинно морским свинкам. Через 7—10 дней перитонеальный экссудат и кровь зараженного животного исследуют методом темно­польной микроскопии.

Микробиологическая диагностика пастереллеза

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: отделяемое кожных язв, гной из абсцессов, кровь, спинномозговая жидкость.

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:

Бактериоскопическое исследование. В препаратах из исследу­емого материала, окрашенных по методу Грама, обнаруживают короткие (0,3—1,5 мкм длиной и 0,15—0,25 мкм толщиной) грамотрицательные палочки овоидной формы, которые могут окрашиваться биполярно.

Бактериологическое исследование. Pasteurella multocida хоро­шо растут на простых питательных средах, через 24 ч образуют мелкие непигментированные колонии. На кровяном агаре ге­молиз нехарактерен. Чистую культуру возбудителя идентифи­цируют по морфологии микробных клеток, тинкториальным, культуральным и биохимическим признакам.

Экспресс-методы диагностики. Биохимические и моле-кулярно-биологические исследования. Исследуемый материал, полученный из очага инфекции, используют для обнаружения ДНК возбудителя с помощью ПЦР. В случае обнаружения соответствующих молекул можно поставить пред­варительный диагноз.

Серодиагностика мало информативна и практически не при­меняется.

Микробиологическая диагностика инфекций, вызванных
Erysipelothrix rhusiopathiae

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: биоптаты поражен­ных участков кожи, отечная жидкость, кровь при септической форме инфекции.

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:

Бактериоскопическое исследование. В препаратах из исследу­емого материала, окрашенных по методу Грама, обнаруживают мелкие (0,8—2,5 мкм длиной и 0,2—0,5 мкм толщиной) грам-положительные палочки, располагающиеся поодиночке, в ви­де коротких цепочек или образующих длинные неветвящиеся нити.


Бактериологическое исследование. Исследуемый материал за­севают на богатые питательные среды и инкубируют в течение 7 дней в атмосфере с повышенным содержанием СО2- Бакте­рии образуют колонии двух типов: мелкие гладкие и крупные шероховатые, на кровяном агаре дают а \ -гемолиз. Чистую куль­туру возбудителя идентифицируют по морфологии микробных клеток, тинкториальным, культуральным и биохимическим при­знакам, внутривидовое типирование (серотипирование) осу­ществляют по соматическому антигену клеточной стенки в РА с типоспецифическими антителами.

Экспресс-методы диагностики. Биохимические и моле-кулярно-биологические исследования. Исследуемый ма­териал используют для обнаружения ДНК возбудителя с помо­щью ПЦР. В случае обнаружения соответствующих молекул можно поставить предварительный диагноз.

Серодиагностика не применяется.

Микробиологическая диагностика инфекций, вызванных Bartonella hensella

МАТЕРИАЛ ДЛЯ ИССЛЕДОВАНИЯ: биоптат из поражен­ного участка кожи, лимфатического узла или органа, кровь.

МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ:

Бактериоскопическое исследование. В гистологических пре­паратах из очагов поражения, окрашенных по методу Грама, могут быть обнаружены мелкие грамотрицательные палочки, располагающиеся преимущественно внутриклеточно. Метод обладает чрезвычайно низкой чувствительностью в связи с малыми размерами возбудителя. Вероятность обнаружения бактерий повышается при использовании окраски серебрени­ем, позволяющей выявлять объекты малых размеров. Метод имеет ориентировочное значение.

Бактериологическое исследование. Бартонеллы выделяют из крови пациентов на богатых средах сложного состава (с добав­лением сердечно-мозгового экстракта, крови и других факто­ров роста) или путем заражения клеточных культур (Vero и др.). Культивирование занимает несколько недель, поскольку бар-тонеллы являются прихотливыми медленно растущими бакте­риями. Для идентификации используют серологические (реак­ция ИФ) и молекулярно-биологические методы (ПЦР, метод ДНК-зондов). Бактериологическое исследование при болезни кошачьей царапины применяется сравнительно редко по при­чине трудоемкости.

Экспресс-методы диагностики: иммунохимические, биохими­ческие и молекулярно-биологические исследования. Иммуно­химические исследования. Антигены возбудителя в био-птатах из очагов поражения могут быть обнаружены методом ИФ.

Молекулярно-биологические исследования. ДНК возбудителя в биоптатах из очагов поражения и крови может быть обнаружена с помощью метода ДНК-зондов и ПЦР.

Серодиагностика недостаточно информативна, поскольку антитела часто присутствуют в крови здоровых лиц. Для обна­ружения специфических IgM в крови больных применяют ме­тод непрямой ИФ: клетки культуры Vero, зараженные тест-штаммом бартонелл, обрабатывают сывороткой крови пациен­та. Специфические IgM выявляют с помощью моноклональных антител (МКАТ) к человеческим IgM, меченных флюорохромом. В положительном случае наблюдается специфическое свечение бактерий в зараженных клетках.