Файл: Методичн_ рекомендац_ї 1 частина.doc

2.Конкретні цілі:

• Дати визначення таксономічним категоріям в класифікації мікроорганізмів.

• Визначити морфологічні, тинкторіальні властивості та оцінити чистоту культури.

• Визначити мету та засвоїти основні етапи ідентифікації чистої культури бактерій.

• Освоїти мікроскопічний метод дослідження рухливості бактерій - метод «роздавленої» краплі.

• Визначити ферментативні властивості чистої культури аеробних бактерій.

3. Базові знання, вміння, навички, необхідні для вивчення теми (міждисциплінарна інтеграція). Дивись практичне заняття №1.

4. Завдання для самостійної роботи під час підготовки до заняття.

4.1. Перелік основних термінів, параметрів, характеристик, які повинен засвоїти студент при підготовці до заняття.

4.2. Теоретичні питання до заняття:

• Таксономічні категорії в класифікації мікроорганізмів.

• Ознаки чистої культури.

• Біологічні особливості, покладені в основу ідентифікації мікроорганізмів.

• Класифікація ферментів мікроорганізмів.

• Методи визначення ферментативної активності мікроорганізмів.

• Методи визначення здатності мікроорганізмів до активного руху.

4.3. Практичні завдання, які виконуються на занятті:

• Дослідити культуру аеробних бактерій - визначити культуральні, морфологічні, тинкторіальні ознаки, активну рухливість методом «роздавленої» краплі. Зробити висновок про чистоту культури.

• Визначити ферментативні властивості чистої культури аеробних бактерій.

• Дослідти культуру анаеробних бактерій - визначити культуральні, морфологічні, тинкторіальні ознаки. Зробити висновок про чистоту культури.

5. Зміст теми.

На практичному занятті студенти вивчають таксономічні категорії мікроорганізмів, визначають морфологічні, тинкторіальні властивості. Досліджують культуру анаеробних бактерій, роблять висновок про чистоту культури. Визначають мету ідентифікації чистої культури та засвоюють основні етапи ідентифікації чистої культури бактерій. Визначають ферментативні властивості чистої культури аеробів та досліджують здатність бактерій до активного руху за допомогою мікроскопічного методу - методу «роздавленої» краплі. Виконані завдання студенти записують у протокол та підписують його у викладача.

Рекомендації для оформлення протоколу.

З метою ідентифікації чистої культури бактерій (визначення виду мікроорганізмів) необхідно:

1. Вивчити морфологічні і тинкторіальні властивості (фарбування за Грамом або іншим методом).

2. Визначити активну рухливість (методи «роздавленої» або «висячої» краплі).

3. Вивчити культуральні властивості (тип колоній, характер росту культури в рідких і на твердих поживних середовищах).

4. Вивчити ферментативні властивості (посів на диференціально-діагностичні середовища).

5. Визначити антигенні властивості (здійснити серологічні реакції).

6. Визначити чутливість культури до специфічного фагу.

7. Визначити патогенність (зараження лабораторних тварин).

8. Визначити інші властивості (за необхідністю).

Завдання 1. Дослідити культуру аеробних бактерій (визначити культуральні, морфологічні, тинкторіальні ознаки, визначити активну рухливість та ферментативні властивості)

1. Культуральні ознаки (характер росту на скошеному МПА)

2. Морфологічні і тинкторіальні ознаки

(Фарбування за Грамом)

Культура бактерій 3. Визначення рухливості

на скошеному МПА (метод «роздавленої» краплі)

Висновок: Виділена чиста культура аеробних грамнегативних паличок (грампозитивних коків), - вона є морфологічно однорідною і однотинкторіальною. Для її ідентифікації треба визначати ферментативні та інші властивості.

4. Визначення ферментативних властивостей чистої культури аеробних бактерій (посів на кольоровий ряд Гісса)

Індол H₂S

NH₃

Глюкоза Лактоза Маніт Сахароза МПБ

Індикатор ВР(суміш водного голубого

з розаловою кислотою)

Посів на кольоровий ряд Гісса дозволяє:

1. Виявити ферментацію вуглеводів (цукрів) до кислоти і газу.

2. Виявити редукційні властивості і інтенсивність відтворення кольору індикатора.

3. Виявити пептолітичні властивості (на МПБ). Про розклад пептону судимо на основі виявлення кінцевих продуктів:

- сірководню (індикаторний папірець змочений розчином ацетату свинцю – чорніє);

- індолу (індикаторний папірець змочений 12% розчином щавелевої кислоти стає рожевого кольору);

- аміаку (червоний лакмусовий папірець набуває синього забарвлення).

4. Встановити характер росту на рідкому поживному середовищі.

Завдання 2. Дослідити культуру анаеробних бактерій (визначити культуральні, морфологічні, тинкторіальні ознаки)

1. Культуральні ознаки (характер росту на середовищі Врублєвського)

2. Морфологічні і тинкторіальні ознаки

(Фарбування за Грамом)

Культура бактерій

на середовищі Врублєвського

6. Питання для самоконтролю.

• На які таксономічні категорії поділяють мікроорганізми?

• За якими ознаками роблять висновок про чистоту культури?

• Які властивості мікроорганізмів вивчають та визначають з метою ідентифікації чистої культури бактерій?

• Чим зумовлена біохімічна ативність мікроорганізмів?

• Які існують класифікації ферментів?

• Які існують методи визначення ферментативної активності бактерій?

• Для яких мікроорганізмів здатність утворювати пігменти є стійкою ознакою виду, яку використовують для їх ідентифікації?

• Дайте визначення термінам штам, вид, клон.