Файл: метод.doc

Правила работы с микроскопом биомед-2

При работе с микроскопом необходимо соблюдать операции в следующем порядке:

1. Работать с микроскопом следует сидя;

2. Микроскоп установить перед собой, слева от себя, на 2-3 см от края стола.

Во время работы микроскоп не сдвигать!!!

3. Микроскоп осмотреть на наличие всех комплектующих.

4. Взять мягкую салфетку с предметного столика и протереть объективы и окуляр.

5. Включить осветительную лампу с помощью переключателя, расположенного на левой стороне подставки.

6. Поместить постоянный или временный микропрепарат на предметный столик, отведя держатель микропрепарата на предметном столике в крайне правое положение, а затем отпустить.

7. Установить изучаемый объект под объективом малого увеличения (4/0,1), передвигая предметный столик с микропрепаратом не руками, а при помощи винтов, расположенных слева под предметным столиком.

Предметный столик имеет двукоординатное перемещение, винт состоит из двух частей: нижний винт и верхний винт.

Нижний винт перемещает микропрепарат по горизонтали X (слева направо).

Верхний винт перемещает микропрепарат по вертикали Y(сверху вниз).

8. Начинать работу с микроскопом необходимо всегда с объектива малого увеличения (4/0,1).

9. Установить объектив (4/0,1) можно, повернув револьвер с объективами строго по часовой стрелке до щелчка, так, чтобы он занял рабочее положение. Настроить четкое изображение можно при помощи макровинта, плавно поднимая либо опуская предметный столик.

10. Если изображение не появилось, то надо повторить все операции пунктов 6-10;

11. Для изучения объекта при большом увеличении при помощи объективов с увеличениями 10/0,25 или 40/0,65, сначала нужно поставить выбранный участок в центр поля зрения микроскопа при малом увеличении.

12. Повернуть револьвер с объективами до щелчка, так, чтобы он занял рабочее положение. При помощи микрометрического винта добиться хорошего изображения объекта.

13. По окончании работы с большим увеличением, перевести микроскоп на малое увеличение (4/0,1), вращая револьвер с объективами до щелчка, так, чтобы он занял рабочее положение.

14. Отведя держатель микропрепарата в крайне правое положение, снять микропрепарат с предметного столика, а затем отпустить держатель.

15. Выключить осветительную лампу с помощью переключателя, расположенного на левой стороне подставки.

16. Протереть чистой салфеткой все части микроскопа.

Работа 2. Основные методы приготовления временных препаратов

1. Для изучения строения мелких объектов

1.1. Промываются и протираются предметное и покровное стекла.

2. На предметное стекло наносится капля воды.

3. Пинцетом объект помещается в каплю воды.

4. С помощью пинцета поверх капли воды помещается покровное стекло. Если из-под стекла выступает вода, то она удаляется фильтровальной бумагой. Если пространство под стеклом частично не заполнено водой, которая добавляется пипеткой.

1. Для изучения строения эпидермиса

2.1.Промываются и протираются предметное и покровное стекла.

2.2.На предметное стекло наносится капля воды.

2.3.Эпидермис надрывается иглой.

2.4.Часть эпидермиса отделяется пинцетом и помещается в каплю воды.

2.5.С помощью пинцета поверх капли воды помещается покровное стекло. Если из-под стекла выступает вода, то она отсасывается фильтровальной бумагой, если пространство под стеклом частично не заполнено водой, она добавляется пипеткой.

3. Для изучения поперечного среза органа

1. Промывают и протирают предметное и покровное стекла.

2. На предметное стекло наносится капля воды.

3. Лезвием вырезается неповрежденная часть органа.

4. Исследуемая поверхность выравнивается перпендикулярно к оси органа.

5. Лезвие помещается на изучаемую поверхность так, чтобы оно прикрывало 1/3 поверхности. Скользящим движением выполняется срез.

6. Срез с лезвия иглой снимается в каплю воды.

Для исследования необходимо в каплю воды поместить 2-6 срезов в зависимости от их размеров. В случае необходимости провести обработку реактивами.

1. С помощью пинцета поверх капли воды помещается покровное стекло. Если из-под стекла выступает вода, то она отсасывается фильтровальной бумагой, если пространство под стеклом частично не заполнено водой, она добавляется пипеткой.

4. Для изучения продольного среза органа

1. Промывают и протирают предметное и покровное стекла.

2. На предметное стекло наносится капля воды.

3. Лезвием вырезается неповрежденная часть органа.

4. Лезвием удаляется часть органа на глубину необходимую для исследования.

5. Лезвие помещается на изучаемую поверхность. Скользящим движением выполняется срез.

4.6. Срез с лезвия иглой снимается в каплю воды. С помощью пинцета поверх капли воды помещается покровное стекло. Если из-под стекла выступает вода, то она отсасывается фильтровальной бумагой, если пространство под стеклом частично не заполнено водой, она добавляется пипеткой.

С частными методами приготовления препаратов студент знакомится в процессе выполнения самостоятельной работы.

Работа 3. Основные методы окрашивания препаратов

1. Окрашивание временных препаратов

1. Поднять покровное стекло препаровальной иглой.

2. Добавить к препарату каплю реактива.

3. Закрыть покровным стеклом.

4. Рассмотреть при малом увеличении.

5. Зарисовать объект при малом увеличении.

6. Записать в тетрадь (альбом) результат окрашивания.

7. Поместить рядом с покровным стеклом каплю реактива так, чтобы она прикасалась к ребру покровного стекла.

8. У другого противоположного ребра покровного стекла приложить полоску фильтровальной бумаги, для оттягивания воды из препарата.

9. Проследить постепенное окрашивание объекта при малом увеличении.

10. Зарисовать объект. Записать результат окрашивания.

1. Окрашивание препаратов с применением реактивов с концентрированной серной кислотой

1. Проверить качество приготовления временного препарата при малом увеличении микроскопа.

2. Поднять покровное стекло при помощи препаровальной иглы.

3. Снять покровное стекло.

4. Осушить препарат фильтровальной бумагой.

5. Добавить реактив, а затем каплю раствора кислоты серной 50%.

6. Выдержать препарат 1-2 мин. до появления окрашивания.

7. Промыть препарат водой.

8. Осушить предметное стекло, убрав избыток воды.

9. Накрыть покровным стеклом.

10. Рассмотреть при малом увеличении микроскопа.

11. Зарисовать объект. Записать в тетрадь (альбом) результат окрашивания.

Работа 4. Основные реактивы и их действие.

Переписать в альбом содержание таблицы:

Работа 5. Приготовление временных препаратов

Приготовить 3 временных препарата объектов, предложенных преподавателем. Рассмотреть их при малом и большом увеличении микроскопа. Зарисовать часть объекта.

Работа 6. Окрашивание препаратов

Один из препаратов окрасить раствором флороглюцина и раствором кислоты серной 50%. Результат окрашивания записать в альбом.

Контрольные вопросы

1. Название частей микроскопа и их назначение.

2. Правила работы с микроскопом.

3. Методы приготовления временных препаратов.

4. Основные реактивы и их действие.