Файл: chastnaya_sanitarnaya_mikrobiologia.docx

Биологический метод. Сущность биологического метода дифференциации заключается в определении патогенности культуры для морских свинок, кроликов, птиц и других лабораторных животных, которые отличаются восприимчивостью к различным микобактериям туберкулеза.

Дифференциацию выделенных культур проводят на двух кроликах массой не менее 1,5-2 кг, которым в краевую вену уха вводят суспензию культуры микобактерии в физиологическом растворе: первому в дозе 0,1, второму – 0,01 мг бактериальной массы.

Возбудитель туберкулеза бычьего вида на протяжении 3 месяцев вызывает генерализованное поражение, человеческого вида – нетипичные туберкулезные очажки регрессивного характера, птичьего вида – септическую форму болезни без образования специфических патологических изменений в органах и тканях с летальным исходом в течение 2-3 недель.

Параллельное заражение двух морских свинок такими же дозами культуры позволяет дифференцировать возбудителя птичьего вида, к которому они нечувствительны, в то время как микобактерии человеческого и бычьего видов у них вызывают прогрессивные туберкулезные изменения. У кур, зараженных внутривенно бактериальной массой, микобактерии птичьего вида в дозе 1 мг вызывают туберкулезные поражения селезенки, печени и кишечника. Куры к возбудителю человеческого и бычьего видов менее чувствительны.

Биохимический метод. Основан на проявлении различной ферментативной активности микобактерий разных видов.

Наиболее демонстративны следующие тесты биохимической дифференциации микобактерий: ниациновый тест, реакция восстановления нитратов, амидазная проба, каталазная и арилсульфатазная активность, рост на среде с салицилатом натрия, деградация (разрушение) салицилата натрия, ПАСК, использование нитрата как единственного источника азота, устойчивость к 5 % хлориду натрия и пикриновой кислоте, сахаролитическая активность, гидролиз твина-80 и др.

Серодиагностика. Для ранней диагностики туберкулеза, а также для определения антигенного родства между истинными и атипичными микобактериями используют реакцию связывания комплемента (РСК) с антигенами УНИИЭВ (Ю. Я. Кассич) и СибНИВИ (Э. Д. Лакман); реакцию пассивной, или непрямой, гемагглютинации (РПГА); реакцию кольцепреципитации; реакцию диффузной преципитации в геле (РДП).

Аллергическая диагностика туберкулеза. Ведущее место в прижизненном распознавании туберкулеза у животных и птиц занимает аллергическая диагностика с использованием туберкулина (Р. Кох, 1890). Однако еще до Коха в России Гельман (1888-1889) изготовил экстракт из туберкулезных бактерий и испытал его с диагностической целью на больных туберкулезом коровах, получив положительный результат. Диагностика с помощью туберкулина наиболее распространенный метод в медицине и ветеринарии. В настоящее время основным прижизненным методом исследования животных на туберкулез служит внутрикожная туберкулиновая проба. Туберкулин для млекопитающих изготавливают из штаммов только бычьего вида.

Для внутрикожной пробы применяют сухой очищенный туберкулин (протеин пурифиед дериват – ППД). ППД был предложен М.А. Линниковой для медицинской практики. В ветеринарии используют стандартизированный сухой очищенный туберкулин для млекопитающих, который содержит в диагностической дозе 10 000 ± 2000 туберкулиновых единиц (ТЕ), т. е. 0,2 мг препарата, растворенного в 0,2 мл растворителя.

Сухой очищенный туберкулин (ППД) для птиц готовят по той же технологии, что и ППД для млекопитающих, – из культурального фильтрата микобактерий туберкулеза птичьего вида и применяют для диагностики у птиц и свиней.

Туберкулин вводят внутрикожно крупному рогатому скоту, буйволам, зебу, верблюдам, оленям – в область средней трети шеи, свиньям – наружной поверхности основания уха, курам – в бородку.

С этой целью применяют инъекционные иглы (МРТУ № 46-84-42 или 0612), которые следует менять при каждом наполнении шприца туберкулином. Используют и безыгольные инъекторы марки ИБВ-0,1, БИ-7 «Овод», которые ускоряют и упрощают процесс введения туберкулина.

Учитывают реакцию через 72 ч по результатам измерения толщины кожной складки с учетом характера образовавшейся припухлости. При положительной реакции появляется разлитой отек размером 35х45 мм и больше, без строго очерченных границ, тестообразной консистенции, с повышенной местной температурой и чувствительностью (болезненность). Кожная складка увеличивается на 3 мм и более. Кожную складку измеряют с помощью кутиметра и по разнице между показателем толщины возникшей припухлости и складки неизмененного участка кожи устанавливают степень увеличения.

Курам туберкулин вводят внутрикожно в одну бородку, вторая служит контролем. Реакцию учитывают через 30-36 ч. Положительная реакция проявляется в виде опухания бородки, она утолщена, тестообразна, горячая и отвисает книзу.

Кроме внутрикожной пробы в определенных случаях используют глазную, подкожную и внутривенную пробы.

Крупный рогатый скот может быть инфицирован возбудителем человеческого, птичьего видов, паратуберкулезными или атипичными микобактериями. Такие животные положительно реагируют на туберкулин млекопитающих, но не являются туберкулезными. Такие реакции называют неспецифическими и разделяют на парааллергические и псевдоаллергические.

Парааллергические реакции – результат сенсибилизации крупного рогатого скота атипичными микобактериями, псевдоаллергические – результат воздействия возбудителей паразитарных болезней и других факторов.

Для дифференциации аллергических реакций у животных предложен комплексный аллерген (КАМ) из атипичных микобактерий (А. Н. Шаров, 1978).

Специфическая профилактика. При туберкулезе иммунитет нестерильный, продолжается до тех пор, пока в организме присутствуют живые микобактерии туберкулеза. Роль живых бактерий туберкулеза в образовании иммунитета выявил Р. Кох в опыте повторного заражения больных туберкулезом морских свинок. При их первичном заражении туберкулезными микобактериями под кожу на месте инъекции через 10-14 суток образуется язва, не заживающая до гибели животного. При повторной инокуляции (через 4-6 недель) той же культуры участок кожи в месте инъекции через 1-3 суток некротизируется, отторгается и образуется весьма быстро заживающая, в противоположность первичной язве. Этот опыт был назван феноменом Коха.

Механизм формирования иммунитета при туберкулезе до конца не выяснен. Несомненно одно: присутствующие в крови больных антитела (агглютинины, комплементсвязывающие и др.) играют ничтожную роль в защите макроорганизма. Значительную защитную функцию организма осуществляют Т-лимфоциты, тканевые элементы, образующие специфические бугорки (эпителиоидные, гигантские и лимфоидные клетки). Бугорок может инкапсулироваться и обызвествляться, что приводит к разрушению содержащихся в бугорке микобактерий. И. И. Мечников первый указал на роль макрофагов в разрушении возбудителя туберкулеза. Однако фагоцитоз имеет незавершенный характер и фагоцитированные микобактерии не погибают, а даже сохраняются в макрофагах.

Вакцину против туберкулеза предложили в 1924 г. французские ученые Кальметт и Герен. В течение 13 лет они культивировали штамм бычьих туберкулезных палочек на картофеле, пропитанном бычьей желчью с 5 % глицерина. В результате 230 пересевов культуры, непрерывно подвергавшейся воздействию желчи, авто­ры получили стойкий вариант с определенными биологическими свойствами. Штамм этот назван культурой BCG (Bacterium Calmett – Guerin), по-русски БЦЖ. Кальметт и Герен предложили использовать культуру БЦЖ как безопасную вакцину для иммунизации людей и животных, в первую очередь крупного рогатого скота. В России противотуберкулезные прививки являются одним из важнейших мероприятий в профилактике туберкулеза человека. В ветеринарной практике вакцина БЦЖ не нашла применения.

Ветеринарно-санитарная оценка и мероприятия. Полностью туша и все другие продукты убоя направляются на утилизацию в двух случаях: первый – когда туши имеют тощую упитанность, любую форму поражения туберкулезом органов или лимфатических узлов, второй – при обнаружении генерализованного туберкулезного процесса (когда одновременно поражены грудные и брюшные органы и большинство регионарных лимфатических узлов) независимо от упитанности.

Туши нормальной упитанности (кроме туш свиней и непораженных органов) при наличии поражения туберкулезного происхождения в лимфатическом узле, в одном из внутренних органов или других тканях направляют как условно годные на обезвреживание методом проварки или для переработки в консервы с усиленным температурным режимом. Внутренний жир перетапливают. Непораженный туберкулезом кишечник направляют для использования на данном предприятии в качестве оболочки при выработке только вареных колбас, а при отсутствии такой возможности направляют на производство сухих кормов. Пораженные туберкулезом органы и ткани, независимо от формы поражения, направляют на утилизацию.

Если туберкулезное поражение в свиных тушах в виде обызвествленных очагов найдено только в подчелюстных лимфатических узлах, то последние удаляют, а голову вместе с языком обезвреживают проваркой. Тушу, внутренние органы и кишечник направляют на промпереработку. При аналогичном поражении лишь брыжеечных лимфатических узлов направляют на утилизацию кишечник, а тушу и остальные внутренние органы направляют на промпереработку.

В случае обнаружения в одном из тех же лимфатических узлов поражений в виде казеозных необызвествленных очагов или туберкулезных поражений (независимо от их вида) одновременно и в подчелюстных, и в брыжеечных узлах последние удаляют, кишечник направляют на утилизацию, а тушу и остальные органы – на выработку мясных хлебов, консервов или проварку.

При поражении туберкулезом костей все кости скелета направляют на техническую утилизацию, а мясо обезвреживают проваркой или переработкой в консервы с усиленным термическим режимом.

При убое животных, положительно реагирующих на туберкулин, и отсутствии патологоанатомических изменений в лимфатических узлах, тканях и органах туберкулезного характера туши выпускают без ограничения, шкуры – без дезинфекции.

Молоко от коров, буйволиц, овец и коз в неблагополучном по туберкулезу хозяйстве (ферме, стаде) обезвреживают и используют в следующем порядке: от животных оздоровляемых групп до постановки их на контроль молоко обезвреживают в хозяйстве при 90 ⁰С в течение 5 минут или при 85 ⁰С в течение 30 минут, после чего отправляют на молокозавод, где его подвергают повторной пастеризации при обычном режиме и в дальнейшем перерабатывают без ограничений. В таком режиме работают пастеризаторы ВДП - 300, 600, 1000 л/ч, ОПФ-1-300 л/ч.

Запрещается продажа молока и молочных продуктов на рынке из неблагополучных по туберкулезу хозяйств и от клинически больных и положительно реагирующих на туберкулез животных частного сектора.