Файл: chastnaya_sanitarnaya_mikrobiologia.docx

Под действием 3 % раствора формальдегида и 5-8 % растворов гидроокиси натрия грибы погибают в течение 20-30 минут.

Спецодежду обеззараживают кипячением в 2 % мыльно-содовом растворе в течение 15 минут или замачивают в 5 % растворе хлорамина (3 ч), 5 % растворе лизола (20 минут). Спецодежду и предметы ухода лучше обезвреживать в параформалиновой камере в течение 40-50 минут.

Патогенность. М. equinum вызывает микроспороз у лошадей в естественных условиях и в эксперименте. Из лабораторных животных заражается морская свинка, в скарифицированную кожу которой втирают культуру гриба или патологический материал (пораженные волосы, кожные соскобы), возможно заражение им человека.

Эпизоотологические данные. Болезнь регистрируется повсеместно. Возможно заражение микроспорией человека. К микроспории восприимчивы лошади, кошки, собаки, пушные звери, свиньи, лабораторные животные. М. equinum вызывает микроспороз у лошадей в естественных условиях и в эксперименте. Из лабораторных животных чувствительны морские свинки, в скарифицированную кожу которых втирают культуру гриба или патологический материал (пораженные волосы, кожные соскобы).

Чувствительны животные всех возрастов, но особенно восприимчив молодняк. Лошади болеют чаще в возрасте 2-7 лет, свиньи – до 4 месяцев. У пушных зверей чаще поражается весь помет с самкой.

Источник возбудителя – больные животные, загрязняющие окружающую среду отпадающими инфицированными чешуйками, корочками, волосами. Особую опасность в распространении возбудителя и поддержании эпизоотического очага представляют собой бездомные кошки и собаки, а также животные с атипичными формами болезни, которые нередко являются источником возбудителя, особенно для детей. Заражение происходит при прямом контакте здоровых животных с больными, через контаминированные патогенным грибом инвентарь, предметы ухода, спецодежду обслуживающего персонала. Носителями патогенных грибов являются грызуны, поддерживающие резервуар возбудителя.

Лабораторная диагностика. С целью дифференциации грибов рода микроспорой от трихофитон у кошек и собак используют люминесцентный метод. Исследуемый материал рассматривают под ультрафиолетовыми лучами ртутно-кварцевой лампы типа ПРК-2 или ПРК-4 с фильтром Вуда на расстоянии 20 см в затемненной комнате. Пораженные возбудителем микроспории волосы дают яркое зеленоватое свечение, споры трихофитон не светятся.

Для специфической профилактики применяют вакцину «Ментовак». С лечебной целью используют мазь юглон или 2 % мазь перихотецина на рыбьем жире.

Ветеринарно-санитарная оценка и мероприятия. При микроспории парные шкуры дезинфицируют в подкисленном растворе кремнефтористого натрия с содержанием 1 % кремнефтористого натрия, 0,7 % серной кислоты и 25 % поваренной соли. Шкуры выдерживают в растворе в течение 48 ч при температуре +18-20 ⁰С и жидкостном коэффициенте 1:5. По окончании дезинфекции шкуры нейтрализуют.

Нейтрализацию проводят в растворе, содержащем 6 % поваренной соли. В него кладут 0,5 % кальцинированной соды (к весу сырья) и если нейтрализация не наступила, то добавляют столько же соды повторно. Жидкостный коэффициент 1:4, температура раствора +18-20 ⁰С. Окончание нейтрализации устанавливают индикаторами (спиртовой раствор метилрота или бромкрезолпурпура) следующим образом: от огузков шкур с белой или светлой шерстью после каждого добавления кальцинированной соды отрезают кусочек (примерно 3х3 см) и смачивают его индикатором. Если при смачивании метилротом получится желтая окраска (рН 5,5), а при смачивании бромкрезолпурпуром – от грязно-желтой до фиолетово-коричневой окраски, то нейтрализацию считают оконченной. После нейтрализации необходимо тщательно промыть шкуры для удаления солей.

5. Возбудитель столбняка

Возбудитель столбняка – С. tetani. Вызывает остропротекающую неконтагиозную раневую инфекцию, при которой нервная система поражается экзотоксином микроба.

Болезнь возникает в результате различных травм и ранений при условии внесения в них спор возбудителя, что возможно при попадании почвы, и сопровождается тоническими и клоническими судорогами мышц.

Возбудитель столбняка открыт Н. Д. Монастырским (1883) и А. Николайером (1884), чистую культуру выделил в 1889 г. Китазато.

Морфология. С. tetani – крупная тонкая палочка с закругленными концами длиной 3-12 и шириной 0,3-0,8 мкм. В препаратах из пораженных тканей бактерии располагаются отдельно и группами по 2-3 клетки, из культур, особенно молодых, в жидких средах – в виде длинных изогнутых нитей. Столбнячная палочка подвижна (перитрих), имеет до 20 и более жгутиков; в старых культурах преобладают клетки без жгутиков. Капсулу не образует. Круглые споры, располагающиеся терминально, в 2-3раза шире клетки, в результате этого бактерия приобретает вид барабанной палочки. Споры формируются в культурах обычно через 2-3 суток, они также образуются и в организме. Палочки со спорами неподвижны. На 4-6 сутки культуры в жидких средах состоят исключительно из спор и почти не содержат вегетативных клеток, которые лизируются.

Вегетативные клетки хорошо окрашиваются спиртово-водными растворами анилиновых красок. Грамположительные, но в старых культурах часть бактерий грамотрицательные.

Культивирование. Возбудитель столбняка – строгий анаэроб. На поверхности плотных питательных сред растет в условиях анаэробиоза при остаточном давлении не выше 0,7 кПа. Оптимальные условия: рН 7,4-7,6 и температура 36-38 ⁰С; С. tetani. Споры границы роста лежат в пределах 14-43 ⁰С.

В среде Китта-Тароцци возбудитель растет медленно; обычно через 24-36 ч появляется интенсивное равномерное помутнение с незначительным газообразованием в виде единичных пузырьков, к 5-7 суткам выпадает рыхлый осадок, среда при этом становится прозрачной. Культуры, особенно на 3-5 сутки роста, издают своеобразный запах женого рога.

На глюкозо-кровяном агаре в анаэробных условиях образует нежные беловато-серые колонии с отростками и приподнятым центром, иногда в виде мелких круглых, напоминающих капельки росы. Колонии окружены слабой зоной гемолиза (2-4 мм). Если чашки дополнительно выдержать при комнатной температуре, зона гемолиза увеличится, при обильном посеве гемолиз может быть по всей поверхности среды. В высоком столбике агара через 1-2 суток вырастают плотные колонии, напоминающие чечевичное зерно, иногда диск (R-форма). В столбике желатина через 5-12 суток появляется рост в виде елочки и происходит медленное разжижение субстрата. Молоко свертывается медленно с образованием на 5-7 сутки мелких сгустков казеина, мозговая среда чернеет при продолжительном культивировании.

Биохимические свойства. В отличие от других патогенных клостридий возбудитель столбняка характеризуется слабой биохимической активностью: не сбраживает моносахариды и многоатомные спирты. Однако некоторые штаммы могут ферментировать глюкозу в зависимости от концентрации в среде ионов железа.

С. tetani обладает слабыми протеолитическими свойствами, вызывая медленную ферментацию протеинов и пептонов до аминокислот, которые затем разлагаются с образованием угольной кислоты, водорода, аммиака, летучих кислот и индола.

Токсинообразование. Возбудитель столбняка лишен факторов инвазивности, но обладает способностью синтезировать экзотоксин высокой активности. Столбнячный токсин получен и описан Берингом и Китазато (1890). Токсин обусловливает всю специфику патогенеза и клиническую картину столбняка.

В составе столбнячного экзотоксина два компонента – тетаноспазмин и тетанолизин (тетаногемолизин). Тетаноспазмин избирательно действует на нервную систему и вызывает тонические сокращения поперечнополосатых мышц, тетанолизин – неспецифический гемолиз эритроцитов. Тетаноспазмин – основной токсический фактор, обладающий свойством нейротоксина, поражающего моторные нейроны центральной нервной системы; Цитопатический эффект в отношении клеток других тканей не проявляет. Вырабатывается в организме и культурах на вторые сутки инкубирования и достигает максимума на 5-7 сутки. Очищенный кристаллизованный тетаноспазмин – термолабильная протеаза, состоящая из 13 аминокислот с преобладанием аспарагина. Токсичность кристаллического тетаноспазмина составляет 66х10⁶ ЛД₅₀ для белых мышей на 1 мг азота токсина. Тетанолизин – разрушающийся в присутствии кислорода гемолизин, имеющий общие свойства с бетатоксином С. perfringens, пневмолизином пневмококков и О-стрептолизином гемолитических стрептококков. В культуральной жидкости накапливается в значительном количестве уже через 20-30 ч; в старых культурах разрушается. Обладает гемолитическим, кардиотоксическим и летальным действиями.

Процессы образования тетаноспазмина и тетанолизина взаимно не обусловлены: некоторые штаммы могут продуцировать большое количество тетанолизина и малое тетаноспазмина.

Экзотоксин возбудителя столбняка нестоек и легко разрушается при высокой температуре (при 60 ⁰С – через 30 минут, при 65 ⁰С – через 5 минут), а также под влиянием прямых солнечных лучей, ионизирующих излучений и химических веществ: перманганата калия, азотнокислого серебра, йода, кислот, щелочей. Антибиотики и сульфаниламиды не разрушают этот токсин. Он не проникает через стенку кишечника и не инактивируется ферментами желудочно-кишечного тракта. Под действием формалина при 35-38 ⁰С переходит в анатоксин – нетоксический иммуногенный препарат.

К ферментам патогенности клостридий столбняка следует отнести РНК-азу и фибринолизин. РНК-аза токсична для лейкоцитов и ингибирует фагоцитоз; фибринолизин способствует всасыванию тетаноспазмина.

Антигенная структура. Подвижные штаммы клостридий столбняка в своем составе имеют соматический О- и жгутиковый Н-антигены. Термолабильный Н-антиген определяет типовую специфичность микроба. Описано 10 сероваров возбудителя столбняка, различающихся по структуре Н-антигена, обозначаемых цифрами I, II, III, IV и т. д. В природе чаще других встречают серовары I и II. Все они продуцируют иммунологически однородный экзотоксин, нейтрализуемый противостолбнячной сывороткой. Термостабильный О-антиген относится к групповым.

Антигенная структура столбнячного токсина изучена недостаточно.

Устойчивость. Вегетативные клетки С. tetani малоустойчивы к воздействию различных факторов внешней среды. Температура 60-70 ⁰С убивает столбнячные палочки в течение 30 минут, растворы обычных дезинфицирующих препаратов – через 15-20 минут.

Споры, напротив, весьма резистентны. В почве, высохшем кале, на различных предметах (гвозди, щепки, сельскохозяйственные орудия, колючки растений и др.), защищенных от света, они сохраняются в течение многих лет (так, например, на кусочке сухого дерева – до 11 лет). Прямой солнечный свет инактивирует споры через 3-5 суток. Во влажной среде при нагревании до 80 ⁰С сохраняют жизнеспособность 6 ч, а при нагревании до 90 ⁰С – 2 ч. Они также относительно устойчивы к различным дезинфектантам: 1 % раствор сулемы 5 % раствор фенола убивают их через 8-10 ч, 5 % раствор креолина – за 5, 1 % раствор формалина – за 6 ч, 0,5 % раствор соляной кислоты – за 30 минут, 10 % настойка йода – за 10, 1 % раствор азотнокислого серебра – за 1 минуту.

Патогенность. К столбняку восприимчивы все виды сельскохозяйственных животных, но наиболее чувствительны лошади. Болеют также собаки, кошки и дикие млекопитающие. Описаны случаи столбняка у кур, гусей и индюков. К столбнячному токсину исключительно восприимчив человек. Холоднокровные – лягушки, змеи, черепахи, крокодилы – невосприимчивы к столбняку при температуре ниже 20 ⁰С, но введенный токсин длительное время циркулирует в их организме.

Из лабораторных животных наиболее восприимчивы белые мыши, морские свинки и кролики. Инкубационный период у белых мышей продолжается до 36 ч, у морских свинок – до 48 ч, у кроликов – до 3-4 суток. Болезнь у них развивается по типу общего или восходящего (tetanus ascendes) столбняка. Особенно характерно клиническая картина проявляется у белых мышей: ригидность хвоста и инокулированной лапки. Конечность вытянута, ограничена в подвижности, туловище искривлено в сторону инокулированной лапки, постепенно процесс захватывает и вторую половину тела. Положенная на спину мышь не может самостоятельно перевернуться. Погибающие животные принимают характерную позу с искривлением тела и вытянутыми лапками. Гибель их наступает в течение от 12 ч до 5 суток.