ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 24.04.2024
Просмотров: 1180
Скачиваний: 2
СОДЕРЖАНИЕ
Министерство сельского хозяйства
Бактериологическая диагностика
1.2. Техника безопасности при работе в ветеринарной лаборатории
1.3. Общая схема проведения бактериологической диагностики
1.4. Правила взятия, консервирования и транспортировки патологического материала
Сопроводительное письмо на патологический материал
Задания для самостоятельной работы
2.1. Устройство оптического микроскопа.
2.2. Виды микроскопии и их назначение
3.1. Техника приготовления препаратов для микроскопии
3.2. Бактериологические краски
3.3. Простой метод окрашивания препарата для микроскопии
Задания для самостоятельной работы
Вопросы для самоподготовки и контроля знаний
Тема 4. Сложные (дифференциальные) методы окрашивания бактерий (4.1). Окраска по Граму (4.2)
4.1. Сложные (дифференциальные) методы окрашивания бактерий
Задания для самостоятельной работы
Тема 5. Сложные (дифференциальные) методы окрашивания бактерий: окраска спор (5.1) и капсул (5.2)
Тема 6. Назначение и классификация питательных сред для бактерий (6.1) и их приготовление (6.2)
6.1. Назначение и классификация питательных сред
Классификация питательных сред
6. 2. Приготовление питательных сред
Тема 7. Стерилизация. Методы: физические (7.1), химические (7.2), механические (7.3)
8.1. Техника посевов бактерий на питательные среды
8.2. Методы культивирования бактерий
8.3. Методы выделения чистых культур бактерий
Тема 9. Культуральные свойства бактерий на плотных (9.1) и в жидких (9.2) питательных средах
9.1. Культуральные свойства бактерий на плотных питательных средах
9.2. Культуральные свойства бактерий в жидких питательных средах
Тема 10. Ферментативные (биохимические) свойства бактерий
1. Определение ферментации углеводов
2. Определение протеолитических свойств
3. Определение редуцирующей (восстанавливающей) способности
11.1. Методы серийных разведений
Критерии оценки чувствительности стафилококков к пенициллину
11.2. Метод диффузии в агар (метод бумажных дисков)
Тема 12. Исследование бактерий на подвижность
В. Биологические методы исследований
13.1. Методы заражения лабораторных животных
13.2. Определение вирулентности микробов
13.3. Бактериологическое исследование трупа
Тема 14. Культивирование анаэробных микроорганизмов
Тема 15. Методы изучения микроскопических грибов и ак-тиномицетов
Тема 16. Методы изучения риккетсий (16.1), хламидий (16.2) и микоплазм (16.3)
16.1. Методы изучения риккетсий
16.2. Методы изучения хламидий
16.3. Методы изучения микоплазм
Раздел II. Основы санитарной микробиологии
Тема 17. Санитарно-микробиологическое исследование воздуха (17.1) и почвы (17.2)
17.2. Санитарно-микробиологическое исследование почвы
Санитарно-бактериологические показатели почвы
Тема 18. Санитарно-микробиологическое исследование воды
19.1. Методы количественного определения микробов в исследуемых объектах
19.2. Санитарно-микробиологическое исследование мяса
Тема 20. Санитарно-микробиологическое исследование молока (20.1) и кисломолочных продуктов (20.2)
Классификация молока по редуктазе
Показатели бактериальной чистоты питьевого молока
20.2. Санитарно-микробиологическое исследование кисломолочных продуктов
Раздел III. Серологическая диагностика инфекционных болезней сельскохозяйственных животных
21.1. Реакция кольцепреципитации
21.2. Реакция диск-преципитации
21.3. Реакция диффузионной преципитации (рдп)
22.1. Постановка реакции агглютинации классическим (пробирочным) методом
22.2. Другие модификации постановки реакции. Кольцевая реакция с молоком (кр)
Тема 23. Реакция связывания комплемента (рск)
Задания для самостоятельной работы (для трех занятий)
Тема 24. Методы люминесцентной микроскопии
Тема 25. Иммуноферментный метод (ифм) диагностики инфекционных болезней
Тема 26. Использование в микробиологии полимеразной цепной реакции (пцр)
Тема 27. Использование в микробиологии днк-зондов
Раздел IV. Специальная (частная) микробиология
Тема 28. Патогенные стафилококки.
Тема 29. Патогенные стрептококки
Тема 30. Возбудители эшерихиозов
Тема 31. Возбудители сальмонеллезов
Тема 32. Возбудитель листериоза
Тема 33. Возбудитель рожи свиней
Тема 34. Возбудитель антропозоонозной чумы
Тема 35. Возбудители гемофилезов
Тема 36. Возбудитель пастереллеза
Тема 37. Возбудитель туляремии
Тема 38. Возбудитель бруцеллеза
Тема 39. Возбудитель сибирской язвы
40.1. Возбудитель эмфизематозного карбункула (эмкара)
40.2. Возбудители злокачественного отека
40.3. Возбудитель брадзота овец
40.4. Возбудитель инфекционной анаэробной энтеротоксемии
41.3. Возбудитель некробактериоза (фузобактериоза)
41.4. Возбудитель копытной гнили
Тема 42. Возбудители туберкулеза (42.1) и паратуберкулеза (42.2)
42.2. Возбудитель паратуберкулеза
Тема 43. Возбудитель актиномикоза
Тема 45. Возбудитель лептоспироза
Тема 46. Возбудитель кампилобактериоза (вибриоза)
Тема 47. Возбудитель дизентерии свиней
Тема 48. Возбудители микоплазмозов
Тема 49. Возбудители риккетсиозов
Тема 50. Возбудители хламидиозов
Тема 52. Возбудители микотоксикозов
Задания для програмированного контроля знаний студентов по частной ветеринарной микробиологии
Ответы на задания для программированного контроля по разделу «Частная микробиология»
Показатели бактериальной чистоты питьевого молока
Наименование продукта |
Количество бактерий в 1 мл, не более |
Титр кишечной палочки, не менее |
Пастеризованное молоко в бутылках и пакетах, группы А |
50 000 |
3 |
Группа Б |
100 000 |
0,3 |
Пастеризованное во флягах и цистернах |
200 000 |
0,3 |
Рис 55. Схема приготовления разведений и посевов: 1 – сырого, 2 – пастеризованного молока
При определении санитарно-показательных микроорганизмов в молоке учитывают бактерии группы кишечной палочки (БГКП).
БГКП являются постоянными обитателями кишечного тракта человека и животных, находятся в почве, кормах и подстилке. При попадании в молоко эти бактерии вызывают различные пороки, изменяя вкус, запах и консистенцию молока.
Для характеристики санитарно-гигиенических условий производства и реализации молока устанавливают степень обсеменения продуктов бактериями группы кишечной палочки (БГКП), т.е. определяют коли-титр.
Титр — это то наименьшее количество продукта, выраженное в мл (г), в котором обнаружены БГКП. Согласно ГОСТу, титр кишечных палочек в молоке и молочных продуктах определяют трехэтапным бродильным методом (рис. 56). При этом учитывают цитрато-отрицательные разновидности кишечных палочек, которые не растут на средах Козера и Симмонсона.
Первый этап – постановка первой бродильной пробы заключается в посеве продукта на среду Кесслера.
В состав этой среды входят: 5% желчи, 1% пептона, 0,25% глюкозы и бактериостатик генцианвиолетовый, подавляющий размножение грамположительной микрофлоры. Среду Кесслера разливают в пробирки по 5 мл с поплавками, готовая среда фиолетового цвета.
Посев для определения коли-титра молока проводят по схеме.
Пробирки с посевами помещают в термостат при температуре 43°С на 24 ч. Пробирки с посевами просматривают и устанавливают бродильный титр. В случае присутствия кишечной палочки в пробирках наблюдается помутнение среды и газ в поплавках.
Второй этап. Из каждой забродившей пробирки производят посев на среду Эндо с таким расчетом, чтобы получить отдельные колонии, для чего берут петлей минимальное количество посевного материала и производят посев частым штрихом.
Перед посевом дно чашки со средой Эндо делят на четыре сектора. Посев из каждой забродившей пробирки со средой Кесслера проводят в отдельный сектор. Чашки с посевами помещают в термостат с температурой 37°С на 24 ч.
Рис 56. Схема определения бродильного титра и коли-титра молока:
КГ – образование кислоты и газа; - без изменений
Третий этап. При отсутствии на среде Эндо колоний, типичных для БГКП (красных, розовых), продукт считают незагрязненным кишечной палочкой.
При наличии на среде Эндо колоний, типичных для БГКП, а также бесцветных, проводят изучение их: готовят препарат из изолированных колоний, окрашивают по Граму и микроскопируют. Если в препарате обнаружены грамотрицательные палочки, то ставят вторую бродильную пробу. Проверенные с каждого сектора колонии отсевают на цитратную среду Козера и глюкозолептонную среду (ГПС), и помещают в термостат при 37°С, а ГПС – при 43°С на 24 ч.
Учет результатов посева колоний с агара Эндо на среде Козера:
- отсутствие роста на цитратной среде Козера указывает на присутствие в исследуемом продукте цитратоотрицательных разновидностей БГКП (которые учитываются);
- изменение зеленого цвета среды Козера на васильковый свидетельствует о том, что обнаруженные БГКП относятся к цитратоположительным разновидностям (которые не учитываются).
Учет результатов посева колоний с агара Эндо на глюкозопептонную среду:
- если в ГПС при 43° нет брожения, то считают, что в продукте БГКП отсутствуют;
- если в ГПС произошло брожение и одновременно отсутствует рост на среде Козера, то считают, что в продукте обнаружены БГКП.
Готовая среда имеет травянисто-зеленый цвет. Эшерихии, не утилизирующие цитраты, на этой среде не растут.
После учета результатов на ГПС и среде Козера вычисляют коли-титр исследуемого молока и молочных продуктов следующим образом (табл. 9):
Таблица 9
Коли-титр молока и молочных продуктов
Варианты |
Кишечная палочка обнаружена в следующих объемах, мл |
Вычисленные коли-титр, мл |
|||||
1 |
1 |
1 |
0,1 |
0,1 |
0,1 |
||
а |
- |
- |
- |
- |
- |
- |
<3,0 |
б |
+ |
- |
- |
- |
- |
- |
=3,0 |
в |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
- |
=0,3 |
+ |
+ |
- |
+ |
+ |
+ |
||
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
а) если ни в одном из засеянных объемов продукта кишечной палочки не обнаружено, то считают коли-титр более 3,0 мл;
б) если в одном из засеянных объемов по 1 мл продукта обнаружена кишечная палочка, считают коли-титр равен 3,0;
в) если кишечная палочка обнаружена в посевах пяти или во всех объемах продукта, то считают коли-титр равным 0,3 мл.
Результаты бактериологического исследования качества готовой продукции из-за длительности анализов не могут быть использованы для задержки выпуска молочной продукции, но по ним судят о санитарно-гигиеническом благополучии предприятия.
20.2. Санитарно-микробиологическое исследование кисломолочных продуктов
Общим признаком всех кисломолочных продуктов является молочнокислое брожение, вызванное молочнокислыми бактериями. Микроорганизмы выделяют фермент лактазу, расщепляющую дисахарид лактозу на 2 молекулы моносахаридов: глюкозу и галактозу.
С12Н22О11+Н2О С6Н12О6+С6Н12О6 4С3Н6О3
лактоза глюкоза галактоза молочная кислота
Таким образом из одной молекулы сахара лактозы образуются четыре молекулы молочной кислоты. Молоко скисает, а содержащийся в нем казеин свертывается и образует сгусток.
В некоторых кисломолочных продуктах наряду с молочнокислым брожением протекает и спиртовое брожение. Поэтому различают:
1. Продукты молочнокислого брожения: сметана, простокваша, ацидофильное молоко.
2. Продукты смешанного (молочнокислого и спиртового) брожения: кумыс, кефир, катык и др.
Технология приготовления кисломолочных продуктов сводится к следующему: После пастеризации молоко охлаждают до температуры сквашивания. В зависимости от вида приготовляемого продукта применяют различные температуры сквашивания:
- для термофильных микроорганизмов – 40-42°С;
- для мезофильных микроорганизмов – 30-35°С.
Для получения кисломолочного продукта желательной консистенции с выраженным вкусом и ароматом необходима хорошая закваска. На молочных заводах применяют закваски, состоящие из чистой культуры молочнокислых бактерий.
1. Молочнокислый стрептококк – Str. lactis, Str. cremoris Str. diacetylactis Str. thermophilus;
2. Молочнокислые палочки – L. bulgaricum, L. acidophilus .
Для каждого кисломолочного продукта применяется специфическая закваска. Различие между ними заключается в том, что в каждой закваске находится один или несколько видов микробов, которые, развиваясь в продукте, придают ему нужные, характерные свойства.
Чистоту закваски, а также соотношение между ее компонентами, проверяют ежедневно путем приготовления окрашенных препаратов и их микроскопией.
Ацидофильное молоко относится к продуктам молочнокислого брожения.