Файл: Practicum_po_microbiologii.doc

Рис. 95. Рост возбудители гемофилеза на кровяном МПА с баккормилками. До посева исследуемого материала сделан крестообразный посев стафилококка (темные колонии).

3. Культивирование:

а) посев на питательные среды: шоколадный МПА (к расплавленному МПА при 90° добавляют 10% крови барана – среда приобретает цвет шоколада), кровяной МПА и др. с баккормилками, для этого после посева исследуемого материала делают крестообразный посев кишечной палочки или стафилококка (рис. 95).

б) особенности выделения культуры:

- аэробы,

- оптимальная температура 37°,

- срок культивирования 18-20 ч.

в) культуральные свойства:

- на плотных питательных средах – мелкие слизистой консистенции колонии.

г) биохимические свойства:

- сахаролитические и протеолитические выражены слабо,

- гемолиз не вызывают.

д) биопроба:

- заражают внутрибрюшинно трех морских свинок (I),

- или белых мышей (II).

Б и В. Серологические и аллергические методы:

- не используются.

4. Биопрепараты для специфической профилактики:

- инактивированная вакцина для иммунизации супоросных свиноматок и молодняка при гемофилезном серозите (I),

- инактивированная ГОА-формолвакцина для супоросных свиноматок для создания колострального иммунитета против гемофилезной плевропневмонии.

5. Биопрепараты для специфической терапии:

- отсутствуют.

Задания для самостоятельной работы

1. Изучить культуральные особенности возбудителей гемофилезов.

2. Приготовить препараты из чистой культуры возбудителя, окрасить по Граму и микроскопировать.

3. Приготовить препараты-отпечатки из патматериала белой мыши, павшей от гемофилеза, окрасить по Граму и микроскопировать.

Тема 36. Возбудитель пастереллеза

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ. Изучить свойства возбудителя и методы бактериологической диагностики пастереллеза.

МАТЕРИАЛЬНОЕ ОСНАЩЕНИЕ. Для демонстрации необходима таблица-схема бактериологической диагностики пастереллеза. Культуры на МПА, МПБ, кровяной агар, труп голубя, погибшего от пастереллеза, вакцины и сыворотки против пастереллеза.

При подготовке к занятию необходимо уяснить следующие вопросы:

1. Название возбудителя и его патогенность для животных.

2. Морфологические и тинкториальные особенности пастерелл.

3. Культуральные и биохимические свойства пасгерелл.

4. Схема бактериологической диагностики пастерелл.

1. Классификация возбудителя

Сем.: Pasteurellaceae

Род: Pasteurella

Вид: Р. multocida

2. Общая характеристика болезни:

Пастереллез – инфекционная болезнь, характеризующаяся септицемией, воспалительно-геморрагическими процессами во внутренних органах, на серозных и слизистых оболочках.

3. Восприимчивые животные:

- болеют многие виды сельскохозяйственных и диких животных, в т.ч. птицы (холера птиц).

4. Патогенез и факторы вирулентности:

- заражение животных происходит алиментарным и воздушно-капельными путями;

- возбудитель размножается и проникает в кровь и лимфу, вызывая септицемию;

- эндотоксины и агрессины повреждают стенки сосудов, вызывая массовые кровоизлияния, появляются отеки. Все это приводит к омертвлению тканей.

Методы диагностики:

А. Бактериологический метод (рис.96).

1. Материал для исследований:

- паренхиматозные органы, кровь, головной мозг, трубчатая кость - посмертно,

2. Микроскопия:

а) методы окраски: простой метод (метиленовая синь), по Граму, Романовскому-Гимзе;

б) микрокартина: короткие палочки до 1,5 мкм, расположенные одиночно;

в патматериале палочки окрашиваются биполярно! (интенсивно по полюсам) метиленовой синью; в мазках из культур – кокковидные палочки, расположенные одиночно, попарно, реже цепочками (рис. 97, 98);

в) грамотрицательные;

г) спор не образуют;

д) образуют капсулу;

е) неподвижны.

3. Культивирование:

а) посев на питательные среды: МПА и МПБ с сывороткой крови,

Рис. 96. Схема лабораторной диагностики пастереллеза

б) особенности выделения культуры:

- факультативные анаэробы,

- оптимальная температура 37°,

- срок культивирования 18-20 ч.

в) культуральные свойства

- на плотных средах – мелкие, прозрачные, с ровным краем колонии,

- на жидких средах – умеренное помутнение, на дне слизистый осадок, при встряхивании поднимается в виде «косички»

г) биохимические свойства

- обладают сахаролитической активностью,

- не разжижают желатин,

- образуют индол,

- гемолиз не вызывают,

- обладают каталазной активностью;

д) биопроба

- заражают подкожно белых мышей и кроликов, внутримышечно голубей.

Рис. 97. Возбудитель пастереллеза из крови голубя. Окраска метиленовой синью для выявления биполярности. Увеличение х900

Рис. 98. Возбудитель пастереллеза из чистой агаровой культуры. Увеличение х900

Б и В. Серологические и аллергические методы не получили применения

5. Биопрепараты для специфической профилактики:

- инактивированная эмульгированная вакцина (для крупного рогатого скота, буйволов и свиней);

- инактивированная преципитированная вакцина (для овец и свиней);

- инактивированная эмульгированная вакцина (для кур, уток);

- живые вакцины из штамма АВ и К (для всех видов птиц).

6. Биопрепараты для специфической терапии:

- гипериммунная сыворотка против пастереллеза.

Задания для самостоятельной работы

1. Изучить культуральные особенности возбудителя пастереллеза на МПА и МПБ.

2. Приготовить препараты из культур пастерелл, окрасить по Граму. Изучить под микроскопом.

3. Приготовить препараты-отпечатки из патматериала голубя, павшего от пастереллеза. Окрасить метиленовой синью. При микроскопии выявить биполярную окраску пастерелл.

Тема 37. Возбудитель туляремии

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ. Изучить свойства возбудителя и методы бактериологической диагностики туляремии.

МАТЕРИАЛЬНОЕ ОСНАЩЕНИЕ. Для демонстрации необходима таблица-схема, бактериологической диагностики туляремии. Культура на питательных средах: Мак-Коя (желточная), Френсиса (МПА с цистином, глюкозой, дефибринированной кроличьей кровью), туляремийный антиген для РА и позитивная сыворотка, готовые фиксированные мазки (туляремийный антиген для РА).

При подготовке к занятию следует уяснить следующие вопросы:

1. Морфологические, тинкториальные, культуральные свойства возбудителя туляремии.

2. Патогенные свойства возбудителя туляремии.

3. Питательные среды, применяемые для культивирования.

4. Бактериологическая и серологическая диагностика туляремии.

1. Классификация возбудителя

Род: Fracisella

Вид: F.tularensis.

2. Общая характеристика болезни:

Туляремия – природно-очаговая инфекционная болезнь многих видов животных и человека, характеризующаяся лихорадкой, увеличением лимфатических узлов, параличами, абортами. Встречается во всех странах.

3. Восприимчивые животные:

- болеют все виды животных, в т.ч. человек;

- в передаче инфекции участвуют грызуны и кровососущие насекомые.

4. Патогенез и факторы вирулентности:

- заражение происходит алиментарно, воздушно-капельным и трансмиссивным путями,

- у животных болезнь чаще всего протекает доброкачественно (среди молодняка овец и пушных зверей возможен падеж до 30%),

- возбудитель, размножаясь на месте внедрения, попадает в лимфатические узлы, из которых проникает в кровь, вызывая септицемию;

- образует эндотоксины и факторы распространения (гиалуронидазу, фибринолизины и др.).

Методы диагностики (рис. 99):

А. Бактериологический метод:

1. Материал для исследования:

- при жизни – пунктат из лимфатических узлов, абортированный плод;