Файл: Practicum_po_microbiologii.doc

- оптимальная температура 37°С,

- срок культивирования 18-20 ч.

в) культуральные свойства:

- С1. septicum на МППБ – интенсивное помутнение, на КМПА – сплошная нежная пленка, образуется зона гемолиза;

- С1. perfringens на МППБ – обильное помутнение с газообразованием;

- С1. novji на МППБ – обильное помутнение с газообразованием, на КМПА – колонии в виде спутанного клубка, гемолиза нет;

- С1. histoliticum на МППБ растет в виде умеренного помутнения, на КМПА колонии в виде росинок, без гемолиза.

г) биохимические свойства:

- обладают сахаролитическими, протеолитическими и др. свойствами.

4. Биопроба:

- заражают внутримышечно морских свинок, восприимчивы также кролики и белые мыши.

Рис. 113. С1. perfringens в препарате из культуры

Рис. 114. С1 novji. в препарате из культуры

Рис. 115. С1. histoliticum в препарате из культуры

Б. Серологическая диагностика:

- для идентификации выделенных культур проводится реакция нейтрализации.

В. Аллергическая диагностика:

- не применяется.

5. Биопрепараты для специфической профилактики:

- вакцины не нашли практического применения.

6. Биопрепараты для специфической терапии:

- применяют поливалентные антитоксичные сыворотки.

40.3. Возбудитель брадзота овец

Классификация возбудителя

Сем.: Bacillaceae

Род: Clostridium

Вид: С1. septicum

Общая характеристика заболевания:

Брадзот – острая неконтагиозная болезнь овец, характеризующаяся геморрагическим воспалением сычуга и двенадцатиперстной кишки (отек, геморрагии, иногда некрозы) с образованием газа в пищеварительном тракте. Болезнь заканчивается гибелью животного.

3. Восприимчивые животные:

- овцы.

4. Бактериологическая диагностика (рис. 116):

1. Материал для исследования:

- паренхиматозные органы, измененные участки стенки сычуга, 12-перстная кишка, отечная ткань.

Схема бактериологической диагностики аналогична описанной при злокачественном отеке.

Рис. 116. Схема лабораторной диагностики брадзота овец

5. Биопрепараты для специфической профилактики:

- инактивированная поливалентная концентрированная ГОА вакцина против брадзота, инфекционной энтеротоксемии, злокачественного отека овец и дизентерии ягнят,

- анатоксин поливалентный против клостридиоза овец.

6. Биопрепараты для специфической терапии:

- используют соответствующую антитоксическую гипериммунную сыворотку.

40.4. Возбудитель инфекционной анаэробной энтеротоксемии

1. Возбудитель – С1. perfringens различных сероваров.

2. Общая характеристика болезни:

Инфекционная анаэробная энтеротоксемия – острая неконтагиозная болезнь различных видов животных, характеризующаяся гемморагическим энтеритом, кровоизлияниями на слизистых оболочках, поражением почек, выраженной токсемией.

3. Восприимчивые животные:

- новорожденные ягнята (анаэробная дизентерия ягнят);

- овцы всех возрастов (инфекционная энтеротоксемия овец, «мягкая почка»);

- телята (энтеротоксемия крупного рогатого скота);

- болеют поросята, птицы, пушные звери.

4. Патогенез и факторы вирулентности:

Заражение происходит алиментарно. Возбудитель размножается в желудочно-кишечном тракте, образует экзотоксины, которые вызывают токсемию; проникновение возбудителя в кровь приводит к бактериемии.

Методы диагностики:

А. Бактериологическая диагностика (рис. 117)

Исследования проводят в двух направлениях: обнаружение токсина в содержимом тонкого отдела кишечника; выделение возбудителя с проверкой его токсичности.

Материал для исследования:

- труп животного, тонкий кишечник с содержимым, печень, селезенка, почки.

Схема бактериологической диагностики аналогична описанной при злокачественном отеке.

Биопроба:

- заражают внутривенно или внутрибрюшинно белых мышей или кроликов экстрактом из патологического материала.

Рис. 117. Схема лабораторной диагностики инфекционной энтеротоксемии овец и анаэробной дизентерии ягнят

Б. Серологическая диагностика:

- при обнаружении в исследуемом материале токсина ставят реакцию нейтрализации со специфическими сыворотками, вводя эту смесь лабораторным животным.

В. Аллергическая диагностика:

- не применяется.

5. Биопрепараты для специфической профилактики:

- инактивированная поливалентная концентрированная ГОА вакцина против брадзота овец и дизентерии ягнят;

- аналогичные вакцины против энтеротоксемии свиней, телят.

6. Биопрепараты для специфической терапии

- используют соответствующую антитоксическую гипериммунную сыворотку.

Задания для самостоятельной работы

1. Ознакомиться с физическими, химическими и комбинированными методами создания анаэробных условий.

2. Ознакомиться с питательными средами для культивирования анаэробов.

3. Приготовить препараты-мазки из патматериала морских свинок, павших после заражения анаэробами, окрасить простым методом и по Граму и микроскопировать.

4. Изучить культуральные и биохимические особенности анаэробов по готовым посевам на разных питательных средах.

Тема 41. Патогенные анаэробы – возбудители столбняка (41.1), ботулизма (41.2), некробактериоза (41.3), копытной гнили (41.4)

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ. Изучить свойства указанных возбудителей и методы бактериологической диагностики.

МАТЕРИАЛЬНОЕ ОСНАЩЕНИЕ. Для демонстрации необходимы схемы бактериологической диагностики столбняка, ботулизма, некробактериоза и копытной гнили; готовые фиксированные препараты-мазки микробных культур С1. tetani и Сl. botulinum, мазки (фиксированные) из некротизированной ткани кролика, зараженного возбудителем некробактериоза кролика, готовые посевы культур, биопрепараты.

При подготовке к занятию необходимо уяснить следующие вопросы:

1. Морфологические, тинкториальные и культуральные особенности возбудителей столбняка и ботулизма.

2. Схема бактериологической диагностики столбняка и ботулизма.

3. Морфологические, тинкториальные и культуральные особенности возбудителей некробактериоза и копытной гнили.

4. Схема бактериологической диагностики некробактериоза и копытной гнили.

41.1. Возбудитель столбняка

1. Классификация возбудителя

Сем.: Bacillaceae

Род: Clostridium

Вид: С1. tetani

2. Общая характеристика болезни:

Столбняк – острая раневая инфекционная болезнь, характеризующаяся судорожным сокращением мускулатуры.

3. Восприимчивые животные:

- все виды, включая человека.

4. Патогенез и факторы вирулентности:

- болезнь возникает в результате различных ранений и травм при инфицировании их спорами возбудителя, что возможно при загрязнении почвой или калом,

- возбудитель образует экзотоксин, состоящий из двух компонентов – тетаноспазмина и тетанолизина.

Методы диагностики

А. Бактериологический метод (рис. 118):

Рис. 118. Схема лабораторной диагностики столбняка

Исследования проводят в двух направлениях: обнаружение токсина в исследуемом материале; выделение возбудителя с проверкой его токсичности.

1. Материал для исследования:

- раневой секрет, кусочки тканей, гной из раны.

Обнаружение токсина:

- путем постановки биопробы – полученный экстракт из исследуемого материала вводят подкожно в заднюю лапку двум-трем мышам или двум морским свинкам;

- при наличии токсина через 2-4 сут у животных наблюдается тетаническое сокращение мышц, и они погибают,

- в этом случае дальнейшую работу по выделению культуры не проводят.

2. Микроскопия:

а) методы окраски: простой метод, по Граму;

б) микрокартина: тонкие, стройные палочки до 6 мкм, на конце округлая спора (барабанная палочка) (рис. 119);

Рис. 119. С1. tetani в препаратах: 1 - из культуры, 2 — в раннем экссудате. Увеличение х900

в) грамположительные;

г) образуют споры;

д) капсулу не образуют;

е) подвижны.

3. Культивирование:

а) посев на питательные среды: МППБ и кровяной МПА

б) особенности выделения возбудителя:

- строгий анаэроб.

- оптимальная температура 37°С,

- срок культивирования 18-20 ч;

в) культуральные свойства:

- на МППБ – мелкохлопчатое помутнение с незначительным газообразованием;

- на КМПА – нежный налет с периферическими отростками, вокруг колоний гемолиз;

г) биопроба – белые мыши, морские свинки.

Б. Серологические методы.

- реакция нейтрализации со специфическими сыворотками.

В. Аллергические методы – не используются.

5. Биопрепараты для специфической профилактики:

- концентрированный столбнячный анатоксин (вакцина).

6. Биопрепараты для специфической терапии:

- гипериммунная антитоксическая противостолбнячная сыворотка.