ВУЗ: Не указан
Категория: Не указан
Дисциплина: Не указана
Добавлен: 24.04.2024
Просмотров: 1120
Скачиваний: 2
СОДЕРЖАНИЕ
Министерство сельского хозяйства
Бактериологическая диагностика
1.2. Техника безопасности при работе в ветеринарной лаборатории
1.3. Общая схема проведения бактериологической диагностики
1.4. Правила взятия, консервирования и транспортировки патологического материала
Сопроводительное письмо на патологический материал
Задания для самостоятельной работы
2.1. Устройство оптического микроскопа.
2.2. Виды микроскопии и их назначение
3.1. Техника приготовления препаратов для микроскопии
3.2. Бактериологические краски
3.3. Простой метод окрашивания препарата для микроскопии
Задания для самостоятельной работы
Вопросы для самоподготовки и контроля знаний
Тема 4. Сложные (дифференциальные) методы окрашивания бактерий (4.1). Окраска по Граму (4.2)
4.1. Сложные (дифференциальные) методы окрашивания бактерий
Задания для самостоятельной работы
Тема 5. Сложные (дифференциальные) методы окрашивания бактерий: окраска спор (5.1) и капсул (5.2)
Тема 6. Назначение и классификация питательных сред для бактерий (6.1) и их приготовление (6.2)
6.1. Назначение и классификация питательных сред
Классификация питательных сред
6. 2. Приготовление питательных сред
Тема 7. Стерилизация. Методы: физические (7.1), химические (7.2), механические (7.3)
8.1. Техника посевов бактерий на питательные среды
8.2. Методы культивирования бактерий
8.3. Методы выделения чистых культур бактерий
Тема 9. Культуральные свойства бактерий на плотных (9.1) и в жидких (9.2) питательных средах
9.1. Культуральные свойства бактерий на плотных питательных средах
9.2. Культуральные свойства бактерий в жидких питательных средах
Тема 10. Ферментативные (биохимические) свойства бактерий
1. Определение ферментации углеводов
2. Определение протеолитических свойств
3. Определение редуцирующей (восстанавливающей) способности
11.1. Методы серийных разведений
Критерии оценки чувствительности стафилококков к пенициллину
11.2. Метод диффузии в агар (метод бумажных дисков)
Тема 12. Исследование бактерий на подвижность
В. Биологические методы исследований
13.1. Методы заражения лабораторных животных
13.2. Определение вирулентности микробов
13.3. Бактериологическое исследование трупа
Тема 14. Культивирование анаэробных микроорганизмов
Тема 15. Методы изучения микроскопических грибов и ак-тиномицетов
Тема 16. Методы изучения риккетсий (16.1), хламидий (16.2) и микоплазм (16.3)
16.1. Методы изучения риккетсий
16.2. Методы изучения хламидий
16.3. Методы изучения микоплазм
Раздел II. Основы санитарной микробиологии
Тема 17. Санитарно-микробиологическое исследование воздуха (17.1) и почвы (17.2)
17.2. Санитарно-микробиологическое исследование почвы
Санитарно-бактериологические показатели почвы
Тема 18. Санитарно-микробиологическое исследование воды
19.1. Методы количественного определения микробов в исследуемых объектах
19.2. Санитарно-микробиологическое исследование мяса
Тема 20. Санитарно-микробиологическое исследование молока (20.1) и кисломолочных продуктов (20.2)
Классификация молока по редуктазе
Показатели бактериальной чистоты питьевого молока
20.2. Санитарно-микробиологическое исследование кисломолочных продуктов
Раздел III. Серологическая диагностика инфекционных болезней сельскохозяйственных животных
21.1. Реакция кольцепреципитации
21.2. Реакция диск-преципитации
21.3. Реакция диффузионной преципитации (рдп)
22.1. Постановка реакции агглютинации классическим (пробирочным) методом
22.2. Другие модификации постановки реакции. Кольцевая реакция с молоком (кр)
Тема 23. Реакция связывания комплемента (рск)
Задания для самостоятельной работы (для трех занятий)
Тема 24. Методы люминесцентной микроскопии
Тема 25. Иммуноферментный метод (ифм) диагностики инфекционных болезней
Тема 26. Использование в микробиологии полимеразной цепной реакции (пцр)
Тема 27. Использование в микробиологии днк-зондов
Раздел IV. Специальная (частная) микробиология
Тема 28. Патогенные стафилококки.
Тема 29. Патогенные стрептококки
Тема 30. Возбудители эшерихиозов
Тема 31. Возбудители сальмонеллезов
Тема 32. Возбудитель листериоза
Тема 33. Возбудитель рожи свиней
Тема 34. Возбудитель антропозоонозной чумы
Тема 35. Возбудители гемофилезов
Тема 36. Возбудитель пастереллеза
Тема 37. Возбудитель туляремии
Тема 38. Возбудитель бруцеллеза
Тема 39. Возбудитель сибирской язвы
40.1. Возбудитель эмфизематозного карбункула (эмкара)
40.2. Возбудители злокачественного отека
40.3. Возбудитель брадзота овец
40.4. Возбудитель инфекционной анаэробной энтеротоксемии
41.3. Возбудитель некробактериоза (фузобактериоза)
41.4. Возбудитель копытной гнили
Тема 42. Возбудители туберкулеза (42.1) и паратуберкулеза (42.2)
42.2. Возбудитель паратуберкулеза
Тема 43. Возбудитель актиномикоза
Тема 45. Возбудитель лептоспироза
Тема 46. Возбудитель кампилобактериоза (вибриоза)
Тема 47. Возбудитель дизентерии свиней
Тема 48. Возбудители микоплазмозов
Тема 49. Возбудители риккетсиозов
Тема 50. Возбудители хламидиозов
Тема 52. Возбудители микотоксикозов
Задания для програмированного контроля знаний студентов по частной ветеринарной микробиологии
Ответы на задания для программированного контроля по разделу «Частная микробиология»
- образует экзотоксины: отечный, летальный, защитный (протективный);
- внутри инфицированного организма возбудитель образует капсулы.
Методы диагностики (рис. 103):
Рис. 103. Схема лабораторной диагностики сибирской язвы
А. Бактериологический метод:
1. Материал для исследования:
- при подозрении на сибирскую язву категорически запрещено вскрывать трупы;
- ухо павшего животного или толстые мазки крови;
- при вынужденном убое – паренхиматозные органы, отечная ткань.
2. Микроскопия
а) методы окраски: по Граму, на капсулу (методы Ольта, Михина),
б) микрокартина: крупные палочки до 10 мкм, располагаются одиночно, попарно в виде коротких цепочек, обращенных друг к другу, прямые, резко обрубленные, свободные – слегка закругленные.
в) грамположительные;
г) в почве и культуре образует споры (рис. 104);
д) в инфицированном организме вокруг палочек формируется капсула (рис. 105);
е) неподвижны.
Рис. 104. Возбудитель сибирской язвы из чистой агаровой культуры. Спорообразование. Увеличение х900
Рис. 105. Возбудитель сибирской язвы из селезенки белой мыши. Окраска по Ольту на капсулы. Увеличение х900
3. Культивирование:
а) посев на питательные среды: МПА, МПБ, МПЖ;
б) Особенности выделения возбудителей:
- факультативный анаэроб,
- оптимальная температура 37С,
- срок культивирования 18-20 ч,
в) культуральные свойства:
- на МПБ – прозрачный, на дне пробирки хлопьевидный осадок,
- на МПА – серо-белые колонии до 5 мм, край изрезанный – R-форма (рис. 106),
- на МПЖ – растет в виде «елочки», перевернутой верхушкой вниз.
г) биохимические свойства:
- обладает умеренными сахаролитическими свойствами и протеолитической активностью, разжижает МПЖ;
- гемолиза на кровяном МПА не вызывает.
д) биопроба:
- заражают подкожно белых мышей, морских свинок.
Для идентификации возбудителя используют дополнительные методы:
- на гемолитические свойства,
- фаготипирование, реакцию иммунофлюоресценции (РИФ),
- тест «жемчужного ожерелья» (выращивание на МПА с пенициллином); при положительном результате – возбудитель принимает шаровидную форму, расположенную в виде цепочек (рис. 107);
- реакцию преципитации.
Рис. 106. Край колонии (R-форма) возбудителя сибирской язвы. Увеличение х10
Рис. 107. Феномен «ожерелья» у возбудителя сибирской язвы под воздействием пенициллина. Увеличение х1350
Б. Серологический метод:
- реакцию преципитации (РП) используют для исследования кожевенно-мехового сырья, шерсти, мяса, загнившего исследуемого материала, для идентификации выделенных культур.
В. Аллергический метод:
- для выявления свежих случаев и ретроспективной диагностики предложен аллерген ВНИИВиМ (антраксин).
5. Биопрепараты для специфической профилактики:
- живая бескапсульная вакцина-штамм СТИ,
- живая бескапсульная вакцина из штамма 55.
6. Биопрепараты для специфической терапии
- гипериммунная противосибиреязвенная сыворотка,
- противосибиреязвенный гаммаглобулин.
Задания для самостоятельной работы
1. Изучить культуральные свойства вакцинных штаммов СТИ, Ланге, Ценковского на МПА, МПБ и кровяном агаре.
2. Приготовить препараты-мазки из суточной агаровой культуры вакцинного штамма СТИ, окрасить их по Граму и микроскопировать.
3. Приготовить препараты-отпечатки из печени морской свинки, павшей от вакцины Ценковского, окрасить на капсулу (по Ольту или Михину) и микроскопировать.
4. Провести постановку РП методом наслаивания и оценить ее результаты.
Тема 40. Патогенные анаэробы – возбудители эмфизематозного карбункула (40.1), злокачественного отека (40.2), брадзота овец (40.3), инфекционной анаэробной энтеротоксемии (40.4)
ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ. Изучить особенности морфологических, культурально-биохимических свойств патогенных анаэробов и схему проведения бактериологической диагностики.
МАТЕРИАЛЬНОЕ ОСНАЩЕНИЕ. Для демонстрации необходимы таблицы: морфология микробов-анаэробов, формы колоний, схема бактериологической диагностики. Трупы морских свинок, павших после заражения (каждым видом отдельно) культурами, питательные среды – МППБ, глюкозо-кровяной агар, среда Вильеона-Блера, стерильные пастеровские пипетки, наборы инструментов. Окрашенные препараты.
При подготовке к занятию необходимо уяснить следующие вопросы:
1. Сущность анаэробного дыхания.
2. Методы создания анаэробиоза.
3. Морфологические, тинкториальные, культуральные и биохимические способности возбудителей анаэробных инфекций.
4. Схема бактериологической диагностики.
5. Биопрепараты для профилактики и терапии анаэробных инфекций.
40.1. Возбудитель эмфизематозного карбункула (эмкара)
1. Классификация возбудителя
Сем.: Bacillaceae
Род: Clostridium
Вид: Cl. Chauvoei (клостридиум Шаво)
2. Общая характеристика болезни:
Эмкар – острая неконтагиозная болезнь, преимущественно крупного рогатого скота, реже овец, характеризующаяся развитием крепитирующих отеков в мышцах, хромотой и быстрой гибелью животных (рис. 108).
Рис. 108. Эмфизематозный карбункул – инфильтрат в межчелюстном пространстве
3. Восприимчивые животные:
- крупный рогатый скот, реже мелкий рогатый скот.
4. Патогенез и факторы вирулентности:
- заражение происходит при попадании спор с кормом, водой, через раны, укусы кровососущих насекомых. С током крови возбудитель попадает в мышцы, где интенсивно размножается, выделяя экзотоксин, гиалуронидазу, гемолизин. При этом происходит нарушение целостности кровеносных сосудов, что приводит к отеку и некрозу тканей, образовавшиеся газы вызывают образование крепитирующих припухлостей.
Методы диагностики:
А. Бактериологическая диагностика (рис 109):
1. Материал для исследования
- кусочки пораженных мышц, отечный экссудат, печень, селезенка, кровь сердца.
Рис. 109. Схема лабораторной диагностики эмфизематозного карбункула
2. Микроскопия
а) методы окраски: простой метод, по Граму, по Муромцеву,
б) микрокартина: полиморфные толстые, с закругленными концами палочки до 8 мкм (рис. 110).
в) грамположительные,
г) образуют споры,
д) не образуют капсулу,
е) подвижны.
Рис. 110. Возбудитель эмфизематозного карбункула из отечной жидкости погибшей коровы. Увеличение х900
3. Культивирование:
а) посевы на питательные среды: МППБ, сахарный кровяной МПА;
б) особенности выделения чистой культуры:
- облигатный анаэроб,
- оптимальная температура 37°С,
- срок культивирования 18-20 ч.
в) культуральные свойства:
- на МППБ – помутнение, осадок, газообразование незначительное,
- на сахарном кровяном агаре – колонии в виде «перламутровой» пуговицы или виноградного листа (края изрезанные), узкая зона гемолиза.
4. Биопроба:
- заражают внутримышечно морских свинок.
Б. Серологическая диагностика:
- не применяется.
В. Аллергическая диагностика:
- не применяется.
5.Биопрепараты для специфической профилактики: инактивированная ГОА формолвакцина, живая вакцина из штамма №2/14.
6. Биопрепараты для специфической терапии: гипериммунная сыворотка.
40.2. Возбудители злокачественного отека
1. Классификация возбудителей
Сем.: Bacillaceae
Род: Clostridium
Виды: С1. septicum
С1. perfringens
С1. novji (С1. oedematiens)
С1. histoliticum
2. Общая характеристика болезни:
Злокачественный отек – острая неконтагиозная инфекционная болезнь животных, характеризующаяся быстрым появлением газовых отеков, распадом тканей и сепсисом.
3. Восприимчивые животные:
- все виды животных и человек.
4. Патогенез и факторы вирулентности:
- возникает после ранений, родов, травм, кастрации;
- образует экзотоксины, различные ферменты – протеолитические, сахаролитические, гемолитические и др., которые вызывают в мягких тканях отеки, некроз, скопление газа и интоксикацию организма.
Методы диагностики:
А. Бактериологическая диагностика (рис. 111):
1. Материал для исследования – кусочки пораженных органов, мышц, экссудат.
2. Микроскопия:
а) методы окраски: простой метод, по Граму, по Муромцеву;
б) микрокартина: С1. septicum – изолированные палочки с закругленными концами, в мазках-отпечатках с серозных оболочек – нити (рис. 112);
- С1. perfringens – толстые, короткие палочки, расположенные одиночно (рис. 113);
- С1. novji – крупные палочки, расположенные одиночно
(рис.114),
- С1. histoliticum – тонкие, стройные, с закругленными концами, расположенные одиночно, попарно (рис. 115),
в) все возбудители по Граму окрашиваются положительно;
г) образуют споры;
д) не образуют капсулу;
е) подвижны, за исключением С1. perfringens, который образует капсулу и неподвижен.
Рис. 111. Схема лабораторной диагностики злокачественного отека животных
Рис 112. С1. septicum в препаратах: 1 – из культуры; 2 – с поверхности печени морской свинки
3. Культивирование:
а) посевы на питательные среды: МППБ и сахарный кровяной МПА (КМПА),
б) особенности выделения чистой культуры:
- облигатные анаэробы,