Файл: Practicum_po_microbiologii.doc

МАТЕРИАЛЬНОЕ ОСНАЩЕНИЕ. Для демонстрации необходимы: таблица – методы бактериологической диагностики, культура кампилобактериоза в полужидкой среде, в МППБ и на плотной среде, фиксированные (неокрашенные) препараты-мазки, содержащие кампилобактерии.

При подготовке к занятию необходимо уяснить следующие вопросы:

1. Морфологические, тинкториальные, культуральные и биохимические особенности кампилобактерий.

2. Дифференциация патогенных и непатогенных представителей кампилобактерий.

3. Схема бактериологической диагностики кампилобактерий.

1. Классификация возбудителя

Сем.: Spirillacaceae

Род: Campylobacter

Виды: С. fetus , С. jejuni и др.

2. Общая характеристика болезни:

Кампилобактериоз – половая инфекционная болезнь прежде всего рогатого скота, характеризующаяся абортами, задержаниями последа, метритами, вагинитами.

3. Восприимчивые животные:

- крупный рогатый скот, мелкий рогатый скот, могут болеть свиньи, куры. Болеет и человек.

4. Патогенез и факторы вирулентности:

- заражение чаще всего происходит половым путем;

- основное место локализации – половые органы;

- фактор вирулентности – термостабильный эндотоксин.

Методы диагностики (рис. 137)

А. Бактериологическая диагностика:

1. Материал для исследования:

- от коров – абортированный плод с оболочками, слизь из шейки матки;

- от быков – препуциальная слизь, сперма.

2. Микроскопия:

а) методы окраски: разведенный фуксин (1:5) – 2 мин;

б) микрокартина: полиморфные, тонкие, изогнутые палочки в виде запятой, длиною 0,5-8,0 мкм (рис. 138);

в) грамотрицательные;

г) спор не образуют;

д) капсул не образуют;

е) подвижны.

Рис. 137. Схема лабораторной диагностики кампилобактериоза

Рис. 138. Возбудитель кампилобактериоза из чистой агаровой культуры. Увеличение х900

3. Культивирование:

а) посев на питательные среды: полужидкий мясо-печеночный пептонный агар (ПЖА), МППБ (без масла);

б) особенности выделения чистой культуры:

- микроаэрофилы анаэробы ( в атмосфере 10-15% СО₂);

- оптимальная температура 37°С;

- срок культивирования до 10 дн.

в) культуральные свойства на полужидких средах:

- на поверхности среды – серо-голубой диск;

- нежные мелкоросинчатые колонии;

г) биохимические свойства:

- желатин не разжижают, молоко не свертывают, образуют сероводород;

- гемолиз не вызывают;

- образуют каталазу.

4. Биопроба:

- заражают внутрибрюшинно или внутривагинально двух беременных морских свинок или четырех небеременных белых мышей. У морских свинок происходят аборты.

Б. Серологическая диагностика:

- используют РАВС (реакцию агглютинации с влагалищной слизью), компоненты: 1)влагалищная слизь в разведении от 1:50 до 1:400; 2) кампилобактериозный антиген;

- РА с сывороткой крови овец.

В. Аллергическая диагностика:

- не применяется.

5. Биопрепараты для специфической профилактики:

- эмульсинвакцина против кампилобактериоза овец.

6. Биопрепараты для специфической терапии:

- не разработаны.

Задания для самостоятельной работы

1. Изучить культуральные особенности возбудителя кампилобактериоза.

2. Приготовить препараты-мазки из суточной культуры возбудителя кампилобактериоза, окрасить их фуксином Циля в разведении 1:5 и микроскопировать.

3. Провести реакцию агглютинации с влагалищной слизью.

Тема 47. Возбудитель дизентерии свиней

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ. Изучить свойства возбудителя и методы бактериологической диагностики.

МАТЕРИАЛЬНОЕ ОСНАЩЕНИЕ. Для демонстрации нужны таблицы, пробирки с культурой Т.hyodysenteria, чашки Петри с соевым агаром или трипсином-агаром с 5%-ной цитратной кровью крупного рогатого скота, готовые препараты-мазки, окрашенные методом Романовского-Гимзе, готовые фиксированные препараты-мазки, микроскоп с темнопольным конденсором.

При подготовке к занятию необходимо уяснить следующие вопросы:

1. Морфологические, тинкториальные и культуральные особенности дизентерии.

2. Схема бактериологической диагностики дизентерии свиней.

1. Классификация возбудителя

Сем.: Spirochaetaceae

Род: Treponema

Вид: Т. hyodysenteriae

2. Общая характеристика болезни:

Дизентерия свиней – острая инфекционная болезнь, характеризующаяся геморрагической диареей и некротическим поражением толстого кишечника. Широко распространена, в том числе и в России.

3. Восприимчивые животные:

- свиньи, особенно 5-6-месячного возраста.

4. Патогенез и факторы вирулентности:

- заражение происходит алиментарным путем;

- эндотоксины.

Методы диагностики (рис. 139)

А. Бактериологическая диагностика:

1. Материал для исследования:

- при жизни – кал;

- посмертно – слизистая оболочка большой ободочной кишки.

Рис. 139. Схема лабораторной диагностики дизентерии свиней

Рис. 140. Возбудитель дизентерии свиней в чистой агаровой культуре. Окраска простым методом. Увеличение х1000

2. Микроскопия (рис. 140):

а) проводят в раздавленной капле с конденсором «темное поле», окрашивают разведенным фуксином, по Граму, Романовскому-Гимзе;

б) в темном поле имеет извитую форму в виде нитей с завитками и острыми краями длиною от 8 до 20 мкм, такую же форму имеют и в окрашенных препаратах.

в) грамотрицательные;

г) спор не образуют;

д) капсул не образуют;

е) активно подвижны.

3. Культивирование:

а) посев на питательные среды: трипсин-агар с 5% крови крупного рогатого скота; триптический соевый бульон с 10% сыворотки крови плода коровы;

б) особенности выделения чистой культуры:

- анаэробы,

- оптимальная температура 37°С;

в) культуральные свойства:

- на плотных средах мелкие прозрачные колонии с зоной гемолиза.

4. Биопроба:

- кроликов заражают внутрибрюшинно, трепонемы размножаются и накапливаются в тестикулах.

Б. Серологическая диагностика:

- не применяется.

В. Аллергическая диагностика:

- не применяется.

5. Биопрепараты для специфической профилактики:

- не разработаны.

6. Биопрепараты для специфической терапии:

- не разработаны.

Задания для самостоятельной работы

1. Изучить культуральные особенности возбудителя дизентерии свиней.

2. Приготовить препараты "раздавленная капля" из культуры возбудителя и микроскопировать их с использованием конденсора "темное поле".

3. Окрасить по Граму готовые фиксированные препараты и микроскопировать.

Тема 48. Возбудители микоплазмозов

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ. Изучить свойства микоплазм, методы микробиологической диагностики микоплазмозов.

МАТЕРИАЛЬНОЕ ОСНАЩЕНИЕ. Для демонстрации необходимы схема-таблица микробиологической диагностики микоплазмозов, морфология микоплазм и их рост на плотной питательной среде, готовые окрашенные препараты микоплазм, микоплазменный антиген и агглютинирующая специфическая сыворотка, нормальная сыворотка – для серологической диагностики микоплазмоза птиц.

При подготовке к занятию необходимо уяснить следующие вопросы:

1. Общая характеристика болезней, вызываемых микоплазмозами.

2. Морфологические, тинкториальные, культуральные и биохимические свойства микоплазм.

3. Схема бактериологической диагностики микоплазмозов.

1. Классификация возбудителей:

Сем.: Mycoplasmataceae

Род: Mycoplasma

Виды: Мус. mycoides (перипневмония крупного рогатого скота)

Мус. agalactiae (инфекционная агалактия овец и коз)