Файл: Practicum_po_microbiologii.doc

Туберкулез – хроническая инфекционная болезнь, у животных протекает бессимптомно, которая характеризуется образованием в пораженных органах бугорков (туберкулов) с творожистым перерождением.

3. Восприимчивые животные:

- все виды, включая птиц и человека.

4. Патогенез и факторы вирулентности:

- основные пути заражения: алиментарный, аэрогенный;

- возбудитель на месте локализации вызывает воспалительный процесс с образованием туберкул. В дальнейшем происходит казеозный некроз тканей, затем обызвествление и инкапсуляция;

- микобактерий из первичных фокусов могут попасть в кровь, что приводит к генерализации процесса;

- факторами вирулентности возбудителя являются эндотоксины-туберкулины. Жирные кислоты способствуют распаду тканей. Корд-фактор (рост их в виде жгутов) нарушают дыхание и фосфорилирование клеток организма.

Методы диагностики

А. Бактериологическая диагностика (рис. 125):

1. Материал для исследования:

- в ветеринарии основным материалом являются пораженные органы после убоя животных; а также мокрота, гной, кал, молоко и др.

2. Микроскопия:

а) Методы окраски: по Циль-Нильсену, люминесцентная микроскопия.

Метод окраски по Циль-Нильсену (для кислотоустойчивых бактерий):

1) раствор карболового фуксина

(при подогревании) до 10 мин

2) 3-5%-ный раствор серной кислоты 5-7 с

3) промыть водой

4) раствор метиленовой сини 5 мин

Рис. 125. Схема лабораторной диагностики туберкулеза

Рис. 126. Возбудитель туберкулеза в препарате из патологического материала. Увеличение х900

Кислотоустойчивые бактерии (возбудитель туберкулеза) окрашивается в красный цвет (не обесцвечиваются кислотой), остальные – в синий.

б) микрокартина (рис. 126): тонкие прямые или слегка изогнутые палочки от 1,5 до 5 мкм;

в) грамположительные;

г) спор не образуют;

е) неподвижны;

ж) кислото-спирто-щелочеустойчивые.

3. Культивирование:

а) посев на питательные среды:

- глицериновые – ГМПА и ГМПБ,

- яичные – среда Петраньяни, Левенштейна-Йенсена и др.

- синтетические;

б) особенности выделения возбудителя:

- аэробы,

- оптимальная температура 37°С,

- срок культивирования от 7 до 30 дн.

в) культуральные свойства:

- на жидких средах – поверхностный рост в виде пленки различной структуры (рис. 127);

- на плотных средах – гладкие или шероховатые (бородавчатые) колонии желтоватого, белого или другого цвета;

г) биохимические свойства:

- изучают для идентификации возбудителя, а также для дифференциации от кислотоустойчивых сапрофитов,

- включают в себя тесты – скорость роста, образование пигмента (на свету и в темноте), перооксидазная активность, термостабильная каталаза, уреаза, никотинамидаза и многое другое.

Рис. 127. Рост Мус. tuberculosis (1) и Мус. bovis (2) в глицериновом бульоне

4. Биопроба:

- для выделения Мус. tuberculosis, Мус. bovis заражают морские свинок;

- для выделения Мус. avium и Мус. murium заражают кроликов и кур.

Б. Серологическая диагностика:

- используют РСК, РНГА (реакция непрямой гемагглютинации).

В. Аллергический метод:

- используют для массовой прижизненной диагностики туберкулеза с помощью аллергена туберкулина;

- туберкулин вводят внутрикожно крупному рогатому скоту и др. в области средней трети шеи, свиньям – на наружной поверхности основания уха, курам – в толщу кожи бородки;

- учитывают реакцию через 72 ч по результатам измерения толщины кожной складки;

- положительная реакция проявляется в виде разлитого отека при увеличении кожной складки на 3 мм и более.

5. Биопрепараты для специфической профилактики:

- применяют живую вакцину БЦЖ в хозяйствах, неблагополучных по туберкулезу.

6. Биопрепараты для специфической терапии:

- не разработаны.

42.2. Возбудитель паратуберкулеза

1. Классификация возбудителя

Сем.: Mycobacteriaceae

Род: Mycobacterium

Вид: Мус. paratuberculosis

2. Общая характеристика болезни:

Паратуберкулез — хроническая инфекционная болезнь, протекающая в основном скрытно и характеризующаяся при клиническом проявлении истощением, расстройством желудочно-кишечного тракта и летальным исходом.

3. Восприимчивые животные:

- крупный рогатый скот, реже мелкий рогатый скот.

4. Патогенез и факторы вирулентности:

- заражение происходит алиментарным путем;

- возбудитель проникает в ворсинки кишечника, фагоцитируется (незавершенный фагоцитоз) и вызывает деструктивные их изменения, приводящие к нарушениям функции желез кишечника;

- основными факторами вирулентности являются эндотоксины.

Методы диагностики

А. Бактериологический метод (рис. 128):

Рис.128. Схема лабораторной диагностики паратуберкулеза

Материал для исследования:

- кал, пораженные участки тонкого кишечника, брыжеечные лимфатические узлы.

2. Микроскопия:

а) методы окраски: по Цилю-Нильсену;

б) микрокартина: мелкие одиночные кислотоустойчивые палочки до 0,5-1,5 мкм, располагаются кучками;

в) грамположительные;

г) спор не образуют;

д) капсулу не образуют;

е) неподвижны.

3. Культивирование:

а) посев на питательные среды: среда Петраньяни и др. с экстрактом из кислотоустойчивых сапрофитов;

б) особенности выделения возбудителя:

- аэробы,

- оптимальная температура 37°С,

- срок культивирования от 6 нед до 7 мес.

в) культуральные свойства:

- на плотных питательных средах пигментированные мелкие колонии, с течением времени проявляются складчатые наложения.

4. Биопроба:

- лабораторные животные невосприимчивы.

Б. Серологический метод:

- РСК.

В. Аллергический метод:

- используется внутрикожный метод;

- применяют в качестве аллергена паратуберкулин или птичий туберкулин.

5, 6. Биопрепараты для специфической профилактики и терапии

- не разработаны.

Задания для самостоятельной работы

1. Изучить культуральные особенности возбудителя туберкулеза на среде Петраньяни.

2. Приготовить мазки из культуры и препараты-отпечатки из легкого кролика, павшего от туберкулеза. Окрасить эти препараты по Циль-Нильсену, промикроскопировать, зарисовать микрокартину, отдифференцировать от посторонней микрофлоры возбудитель туберкулеза.

3. Изучить морфологию возбудителя паратуберкулеза на демонстрационных препаратах.

Тема 43. Возбудитель актиномикоза

ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ. Изучить свойства возбудителя и методы микробиологической диагностики актиномикоза.

МАТЕРИАЛЬНОЕ ОСНАЩЕНИЕ. Для демонстрации необходимы таблицы, слайды, окрашенные микроскопические препараты из возбудителя актиномикоза, культуры возбудителя на плотных питательных средах.

При подготовке к занятию необходимо уяснить следующие вопросы:

1. Морфологические и тинкториальные особенности возбудителя актиномикоза.

2. Культуральные и биохимические свойства возбудителя актиномикоза.

3. Микологическая диагностика актиномикоза.

1. Классификация возбудителя:

Род: Actinomyces

Вид: Act. bovis

2. Общая характеристика болезни:

Актиномикоз – хроническая инфекционная болезнь, характеризующаяся образованием плотных опухолей (актиномиком) в области языка, кожи головы и шеи, межчелюстном пространстве.

3. Восприимчивые животные:

- крупный рогатый скот, овцы, свиньи, человек.

4. Патогенез и факторы вирулентности:

- возбудитель из внешней среды попадает в организм через поврежденные слизистые оболочки ротовой полости при поедании грубых кормов, через соски вымени;

- факторами вирулентности являются различные токсины и ферменты патогенности.

Методы диагностики (рис. 129):

А. Микологическая диагностика: